7种藻类植物药中汞含量检测方案(原子荧光光谱)

微波消解－原子荧光光谱法测定7种藻类植物药中的汞含量 杨 钊*， 张春辉1， 范 莹2 （1. 青岛市药品检验所，山东青岛266071：2. 解放军青岛第一疗养院，山东青岛266071） 摘 要：目的 测定7种藻类植物药中汞的含量。方法用微波消解系统消化样品，原子荧光光谱仪测定。结果 测定汞的检出限为0.045μg·L-1，相对标准差（RSD）＝ l.65％，平均回收率为97.77％。结论 该法具有操作简便、准确、灵敏、重复性好等优点，可用于7种藻类植物药中汞的含量测定。 关键词：微波消解原子荧光光谱法；藻类植物药；汞 中图分类号：R9l7，Q949．2 文献标识码：A 文章编号：1002－3461（2006）02－0055－03 Determination of mercury in seven kinds of algal plant drugs by the microwave digestion-atomic fluorescence spectrometry YANG Zhao1, ZHANG Chun-hui1, Fan Ying2 (1. Qingdao Institute for Drug Control, Qingdao 266071, China; 2. The Qingdao First Sanatorium of PLA, Qingdao 266071, China) Abstract: Objective To determine the mercury in seven kinds of algal plant drugs. Method The mercury in the samples was determined by the atomic fluorescence spectrometry after been digested by microwave. Results The detection limit of mercury was 0.045μg·L-1 . The relative standard deviation was 1.65% and the average recovery was 97.77%. Conclusion The method had the advantages of simple operation, higher precision, higher sensitivity and repeatability and was suitable for the determination of mercury in the algal plant drugs. Key words: microwave digestion-atomic fluorescence spectrometry; algal plant drugs; mercury 汞是具有积蓄性的有毒元素，它进入人体后蓄积在中枢神经、肝和肾脏内，引起有关器官损害和中毒。因此中药中的汞含量是制定中药质量标准和质量监测中的必测项目。汞的测定方法较多，常用的有原子吸收光谱法［1，2］、原子荧光光谱法［3，4］、电化学法［5］、色谱法［6］、JCP质谱［7］等。其中原子荧光光谱法是80年代以来我国发展较快的一种新的痕量分析技术［8］，具有灵敏度高、选择性好、干扰小等特点。近年兴起的微波消解，在样品前处理中以快速、分解完全、元素无挥发损失、酸耗量少等优点，日益受到实验室工作者的青睐［9］。 本文报道用梯度升压微波消解样品，原子荧光光谱法测定藻类植物药中汞含量的方法。 1 实验材料 1.1 试验材料 海藻，马尾藻科植物海蒿子Sargassum pallidum（Turn．）C．Ag．的干燥藻体；昆布，翅藻科植物黑昆布 Ecklonia kurome Okam．的干燥叶状体；海带，海带科植物海带Laminaria japonica Aresch．的干燥叶状体；海带根，海带科植物海带Laminaria japonica Aresch．的干燥根部；裙带菜，翅藻科植物 Undaria pinnatifida（Harv．）Sur．的干燥叶状体；紫莱，红毛菜科植物甘紫菜 Porphyra tenera Kjellm．的干燥叶状体；石花菜，红翎菜科植物琼枝Eucheuma gelatinae (Esp.) J. Ag.的干燥藻体。 以上样品均购于潍坊海王医药集团股份有限公司青岛分公司，并经青岛市药品检验所中药科吴爱英主任药师鉴定。 1.2 仪器 AF-610A原子荧光光谱仪（北京瑞利分析仪器公司）；汞空心阴极灯（河北衡水宁强光源有限公司）；BERGHOF MWS-3+微波消解系统（美国利曼－徕伯斯公司）。 1.3 标准品 汞单元素标准溶液1000μg·mL-1（国家标准物质 GBW 08617），购于国家标准物质中心。用10％的硝酸（V/V）溶液将汞单元素标准溶液逐级稀释至10ng·mL-1，作为汞标准使用液。 1.4 试剂 所用水均为双蒸水；硝酸和盐酸均为优级纯试剂；氢氧化钾和硼氢化钾均为分析纯试剂。 2 实验方法 2.1 样品的消化 取试样约0.25g，精密称定，置于消解罐中加入3.0mL硝酸，盖好内盖（内盖要经常扩张），盖上防爆膜，拧上外盖。将消解罐放入微波消解系统中，按照预先设定的程序（见表1）进行程序升温消化。待消化完毕后，取出消化罐，放冷。将消化液定量移入25mL容量瓶中，用双蒸水少量多次洗罐，稀释至刻度，混匀，即供试样液。同样做试剂空白液。 表1 微波消解程序 步骤 目标温度/℃ 升温时间/min 保温时间/min 1 2 3 4 155 155 170 100 2 2 2 1 4 15 10 10 2.2 仪器工作条件 光电倍增管负高压：260V，灯主电流（峰值）：40mA，辅助阴极电流：0mA，原子化器温度：低温，原子化器的高度：7mm，载气（Ar）流量：600mL·min-1，测量方式：标准曲线法，信号类型：峰面积，积分时间：18s，延迟时间：4s，泵速：100 r·min-1。载流：2％HCI溶液（V/V），KBH4溶液浓度：0.05％。 2.3 标准曲线的制备 分别吸取汞标准使用液（10ng·mL-1）0.00，1.00，2.00，4.00，8.00mL于100mL容量瓶中，用10％的硝酸（V/V）溶液稀释至刻度，混匀。分别相当于汞浓度0.00，0.10，0.20，0.40，0.80 ng·mL-1，在2.2的条件下测定。 2.4 检出限的测定 先用空白溶液进行连续11次测定，求出测定值的标准偏差。汞标准系列重复测定2次，取算术平均值后，按线性回归法求出标准曲线的相关系数和斜率。以3倍空白的标准偏差除以标准曲线的斜率，得到检出限。 2.5 精密度试验 在2.2的条件下，连续11次重复测定0.10ng·mL-1汞标准溶液，计算RSD。 2.6 重复性试验 将海藻剪细混匀，取6份，每份约0.25g，精密称定。依法消解后分别测定汞的含量并计算RSD。 2.7 回收率试验 采用加标回收法，精密称取已知含量的海藻样品，分别精密加入汞标准溶液，依法分别测定汞的含量，计算回收率和RSD。 2.8 样品的测定 分别将海藻、昆布、海带、海带根、裙带菜、紫菜和石花菜等7种藻类植物药剪细或粉碎，各取约0.25g，精密称定，依法消解后测定其中汞的含量。 3 结果 3.1 线性回归方程，检出限及精密度 配制一系列汞标准溶液，测定其荧光强度If。线性回归方程为：If=1340.46C 3/3.16，相关系数r＝0.99999；经测定、计算，汞的检出限为0.045μg·L-1。连续11次重复测定0.10ng·mL-1汞标准溶液，RSD=1.65％。 3.2 重复性实验 取海藻样品6份，测得样品中平均汞含量为0.0215mg·kg-1，RSD=2.89％（n=6）。 3.3 回收率实验 表2 回收率实验结果 编号 样品量 /g 样品中汞的量 /ng 汞标准品的加入量 /ng 汞的测定总量 /ng 回收率 /％ 平均回收率 /％ RSD /％ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0.0800 0.0801 0.0803 0.1201 0.1204 0.1204 0.1600 0.1603 0.1613 1.72 1.72 1.73 2.58 2.59 2.59 3.44 3.46 3.47 3.80 3.80 3.80 2.80 2.80 2.80 2.00 2.00 2.00 5.50 5.25 5.25 5.259 5.50 5.25 5.25 5.50 5.25 99.64 95.11 94.94 97.58 102.04 97.40 96.51 100.73 95.98 97.77 2.57 3.4 样品的测定结果 7种藻类植物药汞的含量见表3。 表3 藻类植物药汞的含量测定结果 （n=6，±s） 汞含量 / mg·kg-1 海 藻 昆 布 海 带 海带根 裙带菜 紫 菜 石花菜 0.0213 ± 0.0006 0.0487 ± 0.0015 0.1140 ± 0.0120 0.2347 ± 0.0119 0.0640 ± 0.0026 0.0230 ± 0.0010 0.0550 ± 0.0026 4 讨论 用微波消解系统消化样品时，应以样品完全溶解，消解液无色澄清（或略带黄色）为消解完全。采用程序梯度升温方式，目的是在较低的温度和压力下消化易氧化的有机物，再用高温高压消解难分解的有机物，可获得满意的消化效果。消化过程中应注意每个消解罐是否都达到设定的温度，否则会有个别样品消化不彻底，影响测定结果的精密度。 中药中重金属的检查方法自中国药典1977年版附录［10］起有收载，采用经典的化学方法（即纳氏比色法）进行目视法检查，测定结果只是限度粗略值。根据每种微量重金属元素的生理活性，结合世界卫生组织规定的周期摄入量和我国的具体国情，自2005版中国药典［11］起，一部标准对黄芪、甘草、白芍、丹参、金银花、西洋参中重金属含量规定了限度不得超过千万分之二（即≤0.2mg·kg-1）。 参照上述标准，测定的海藻、昆布、海带、裙带菜、紫菜和石花菜6种藻类植物药汞的含量较低而海带根的汞含量较高。这可能与汞易于在海带的根部富集有关，具体原因尚需进一步探讨。 参考文献： ［1］ Horvat M , Liang L , Azemard S, et al. 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