基于HILIC模式的SCION（赛里安）LC6000高效液相色谱仪对功能糖的测定

前言：全球对于乳制品中功能糖的数量和质量的控制需求越来越高。乳果糖是一种在乳制品中发现的功能糖，当以少量摄入时，能够调节肠道健康。乳果糖、乳糖和半乳糖的化学结构非常相似，导致色谱分离困难。本文开发了一种使用亲水作用液相色谱（HILIC）检测并完全分离乳果糖、乳糖和半乳糖的方法。HILIC是一种利用极性固定相和流动相（包含水和更少极性的溶剂，如乙腈）的一定比例的色谱技术。结论：本应用使用SCION（赛里安）LC6000配置LC6460 RI检测器，在HILIC模式下实现乳果糖、半乳糖和乳糖优异的分离度和线性，并且在十五分钟内完成分析，该方法是应对复杂糖分析的理想解决方案。 TTechcomp 基于HILIC模式的SCION(赛里安) LC6000高效液相色谱仪对功能糖的测定 前言 全球对于乳制品中功能糖的数量和质量的控制需求越来越 高。乳果糖是一种在乳制品中发现的功能糖，当以少量摄入 时，能够调节肠道健康。乳果糖、乳糖和半乳糖的化学结构非 常相似，导致色谱分离困难。 本文开发了一种使用亲水作用液 相 色谱(HILIC)检 测 并完全 分离乳果糖、乳糖和半乳糖 的 方法。HILIC是一种利用极性固 定相和流动相(包含水和更少极性的溶剂，如乙腈)的一 定 比 例 的 色谱技术。 Author： 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司色谱市场部 A b st r act 本应用介绍了SCION LC6000高效液相色谱仪对功能性糖的分析。为了完全分离功能性糖，使用H I L I Cpak VG-50色谱柱，并进行方法优 化。HILICpak VG-50系 列 是一款适用糖类和亲水性化合物分析的聚 合基质氨基柱 ，填 料 使用键合了氨基的聚乙烯醇。实现 了 乳果糖、半 乳糖和乳糖优良分离度和线性 。 仪 器 采用包含以下模块的SCION(赛里安)LC6000高效液相色谱 仪系统： ·集成六通道 真 空脱气的SCION L C6100四元泵 ·SCION LC6210 高精度、低残留自动进样器 ·SCION LC6320 立式 柱 温箱 ·SCION LC6460 Rl示差检测器 液 相 色 谱条 件 表1.方法参数 色谱柱： 柱箱： 流动相： 流速： HILICpak VG-50 250mm×4.6mm×5um 40℃ 水/乙腈/甲醇 5：75：20 1ml/min 制备了包含每个目标分析物(乳果糖、乳糖和 半 乳糖)的校准 标准品 ，浓度范围从0.01%到0.05%。 结果 示 例 图 谱 当分析功能糖时，最关键的是完全分离每个目标化合物。图1展 示了 使用HILICpak VG-50柱的分离度。 图 1乳糖、乳果 糖 和半乳糖示例色谱图 中国药典(2020年版)描 述 了在使用 R I检测器 和 HILIC模式色 谱分 析 功 能 糖 时 必须满足的分离 规 范 。中国药典(2020年版)规定：“乳果糖和乳 糖 之间 的 分离度大于2.0”。 使用HILICpak VG-50色谱柱 与 SCION LC6000-RI 检 测器 相 结 合，所得到 的 分析分离度超过了药典要求，且 在 15min内完 成分离，突显了 在H I L IC模式下使 用 LC6000液相色谱仪时 进 行 色谱分离 的 卓越性能。下表是中国药典(2020年版)规 定 的 乳果糖到乳糖的分离度要求， LC6000完全满足要求： 表2.乳果糖 和 乳糖之间的分 离 度 化合物 中国药典(2020年版)规定分离度 乳果糖到乳糖 ≥2.0 标 准 曲线 所有目标化合物在0.01%至0.05%浓度范围内的校准曲线。所有目标化合物表现出良好的线性，相关系数R2≥0.9991.详 见图2、图3、图4。 图3半乳糖标准曲线 图4乳糖标准 曲 线 本应用使用SCION(赛里安)LC6000配置LC6460 RI检测器，在 HILIC模式下实现乳果糖、半乳糖和乳糖优异的分离度和线 性，并且在十五分钟内完成分析，该方法是应对复杂糖分析的 理想解决方案。 为满足客户多方面样品分析需求，天美公司可提供从消耗品到进样系统全方位解决方案，如液体自动进样器、顶空进样器、多功能进样器、热解析仪、吹扫捕集浓缩仪等。 个Techcomp 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司 Techcomp Instrument Co.，Ltd 区 techcomp@techcomp.cn 天美集团总部 北京分公司 全国免费服务热线 香港新界葵涌永得利广场1座2606 北京市朝阳区北苑路58号航空科技大厦1号楼4层 400-810-7898 \852-27519488 <010-64010651 www.techcomp.cn techcomp@techcomp.com.hk 区 techcomp@techcomp.cn www.techcomp.com.hk 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司 广州分公司 口点 上海市松江新桥民益路201号16幢 广州市海珠区南边路38号保利1918产业园自编20号楼A218 二 021-67687200 、020-32644011