尿素是一种保湿成分,具有保湿和软化角质的功效,常用于面膜、护肤水、膏霜、护手霜地那个产品中保湿成分的的添加。
尿素含量过多会导致皮肤过敏、红肿等症状,并且尿素含量过多的产品可能会伴随激素类药物成分长时间使用会造成皮肤黏膜损害。
本实验由样品在偏酸性条件下,所含尿素被尿素酶分解为铵盐,用酸滴定,由此计算尿素含量。
加热磁力搅拌器在化妆品中尿素含量的测定 酶催化法中的作用(根据中华人民共和国国家标准 GB/T 29661-2013)一、原理尿素是一种保湿成分,具有保湿和软化角质的功效,常用于面膜、护肤水、膏霜、护手霜地那个产品中保湿成分的的添加。尿素含量过多会导致皮肤过敏、红肿等症状,并且尿素含量过多的产品可能会伴随激素类药物成分长时间使用会造成皮肤黏膜损害。本实验由样品在偏酸性条件下,所含尿素被尿素酶分解为铵盐,用酸滴定,由此计算尿素含量。二、使用试剂1. 尿素酶:0.5g以下可将0.25g尿素于40~45℃在1h内完全分解。2. 0.1mol/L盐酸3. 0.1mol/L NaOH溶液:称取0.40g NaOH固定,溶于100ml水中。4. 无水乙醇5. 塑料薄膜三、使用仪器1. 高型烧杯,100ml2. 酸式滴定管3. 超声波清洗仪4. 磁力搅拌器5. pH计:精度0.016. 分析天平:感量0.01g7. 恒温水浴锅四、分析步骤1. 试样制备(1) 水剂类、乳液类、膏霜类(O/W)样品称取均匀样品0.5g(精确至0.01g)于高型烧杯中,加入50ml水,用塑料薄膜封口,超声提取20min。将高型烧杯放在WIGGENS WH280-NH红外增强加热磁力搅拌器上,边搅拌边滴加盐酸中和至pH4.0(用ChemTron PH610专家型台式pH 计,不计量,若溶液呈pH<4.0,则需滴加NaOH溶液到pH>4.0,再用盐酸中和至pH4.0),加入0.2g粉碎较细的尿素酶立即用塑料薄膜封口,置于50℃WIGGENS WA20通用水浴槽中不时的摇晃,30min后取出冷却至室温,边搅拌边用0.1mol/L的盐酸滴定至pH4.0,记录消耗的0.1mol/L盐酸标准溶液的体积。同时做一组空白实验,记录消耗的0.1mol/L盐酸标准溶液的体积。(2) 膏霜类(W/O)、油溶性样品称取均匀样品0.5g(精确至0.01g)于15ml离心管中,加入10ml无水乙醇,超声提取20min。用WIGGENS BIOCEN 22R微量台式离心机以不低于5000r/min离心15min,将上清液全部转移至高型烧杯中,再加入40ml水,摇匀。重复(1)中接下来的步骤。(3) 唇膏类样品称取均匀样品0.5g于15ml离心管中,加入10ml无水乙醇,在80℃水浴中加热3min~5min使唇膏融化,用WIGGENS Vortex 3000 Elite涡旋振荡器涡旋1min,超声提取20min。以不低于5000r/min离心15min,将上清液全部转移至高型烧杯中,再加入40ml水,摇匀。重复(1)中接下来的步骤。2. 平行实验按上述步骤,对同一样品进行平行实验测定。五、结果计算六、注意事项1. 若检测尿素含量超过20%,需要以减少样品称样量的方式重新进行测定。2. 化妆品中尿素的定量测定,其定量下限为0.025%。3. 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的10%。4. 尿素含量在0.1%~20.0%范围内,回收率在95%~110%,相对标准偏差小于10%。ChemTron PH610 专家型台式 pH计WIGGENS UA03MFDN 超声波清洗器 加热磁力搅拌器在化妆品中尿素含量的测定酶催化法中的 作用 (根据中华人民共和国国家标准 GB/T 29661-2013) 一、原理 尿素是一种保湿成分,具有保湿和软化角质的功效,常用于面膜、护肤水、膏霜、护手霜地 那个产品中保湿成分的的添加。 尿素含量过多会导致皮肤过敏、红肿等症状,并且尿素含量过多的产品可能会伴随激素类药 物成分长时间使用会造成皮肤黏膜损害。 本实验由样品在偏酸性条件下,所含尿素被尿素酶分解为铵洁,用酸滴定,由此计算尿素含 量。 二、使用试剂 1.尿素酶:0.5g以下可将 0.25g尿素于40~45℃在 1h 内完全分解。 2. 0.1mol/L盐酸 3. 0.1mol/L NaOH溶液:称取0.40g NaOH 固定,溶于 100ml水中。 4.无水乙醇 5.塑料薄膜 三、使用仪器 1.高型烧杯, 100ml 2.酸式滴定管 3.超声波清洗仪 4.磁力搅拌器 5. pH计:精度0.01 6.分析天平:感量0.01g 7.恒温水浴锅 WIGGENS WH280-NH红外增强加热磁力搅拌器 WIGGENS WA20 通用水浴槽 WIGGENS Vortex 3000 Elite 涡旋振荡器 1.试样制备 (1)水剂类、乳液类、膏霜类 (O/W)样品 称取均匀样品 0.5g(精确至0.01g)于高型烧杯中,加入50ml水,用塑料薄膜封口,超 声提取 20min。 将高型烧杯放在 WIGGENS WH280-NH红外增强加热磁力搅拌器上,边搅拌边滴加盐酸 中和至 pH4.0 (用ChemTron PH610 专家型台式 pH计,不计量,若溶液呈 pH<4.0,则需滴加 NaOH 溶液到pH>4.0, 再用盐酸中和至 pH4.0), 加入0.2g粉碎较细的尿素酶 立即用塑料薄膜封口,置于 50℃WIGGENS WA20 通用水浴槽中不时的摇晃, 30min 后取 出冷却至室温,边搅拌边用0.1mol/L的盐酸滴定至 pH4.0, 记录消耗的 0.1mol/L 盐酸标 准溶液的体积。同时做一组空白实验,记录消耗的 0.1mol/L 盐酸标准溶液的体积。 (2)膏霜类 (W/O)、油溶性样品 称取均匀样品0.5g(精确至0.01g)于15ml离心管中,加入10ml 无水乙醇,超声提取 20min。用 WIGGENS BIOCEN 22R 微量台式离心机以不低于 5000r/min 离心 15min,将上清液全部转移至高型烧杯中,再加入40ml水,摇匀。重复(1)中接下来的步骤。 (3)唇膏类样品 称取均匀样品0.5g于15ml离心管中,加入10ml无水乙醇,在80℃水浴中加热3min~5min 使唇膏融化,用 WIGGENS Vortex 3000 Elite 涡旋振荡器涡旋 1min, 超声提取 20min。以不低于 5000r/min 离心 15min, 将上清液全部转移至高型烧杯中,再加入40ml水,摇 匀。重复(1)中接下来的步骤。 2.平行实验 按上述步骤,对同一样品进行平行实验测定。 五、结果计算 按式(1)计 算尿素含量,以 %表示 : 式中 : 60.06——尿素的相 对 分 子 质量: ——样品消耗0.1 mol /L盐酸标准溶液的体积 ,单位为毫 升 (mL); ——空白试验消 耗 0.1 m ol /L 盐酸标准溶液的体 积 ,单位为毫 升 (mL); C ——0.1 m ol /L 盐酸标准溶液的浓度 ,单位为摩尔每升(m o l /L ); ——试验样品质量,单位为克 (g )。 六、注意事项 1.若检测尿素含量超过20%,需要以减少样品称样量的方式重新进行测定。 2.化妆品中尿素的定量测定,其定量下限为 0.025%。 3.在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的10%。 4.尿素含量在0.1%~20.0%范围内,回收率在95%~110%,相对标准偏差小于10%。
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