苹果汁中展青霉素的测定 | Copure® MAX混合阴离子固相萃取柱

苹果汁中展青霉素的测定（Copure® MAX混合阴离子交换柱）《GB 5009.185-2016 食品安全国家标准 食品中展青霉素的测定》苹果汁在人们的生活中是种很常见的饮料，作为饮料饮品，其食用安全性的关注越来越高。展青霉素广泛存在于霉变的水果中，是影响苹果汁质量安全的要素之一，长期摄入会对人体健康造成危害。逗点生物结合市场需求，建立了固相萃取-高效液相色谱法测定苹果汁中的展青霉素含量的方法，样品经阴离子交换固相萃取柱净化、浓缩后，采用高效液相色谱仪结合紫外检测器测定，外标法定量。经验证，加标回收率范围90-100%，RSD值小于5%，满足测试要求。一、样本前处理1.1提取准确称取苹果汁2.00 g(精确至0.01 g)于15 mL离心管(带盖)中待净化。1.2净化    分别用6.0 mL甲醇、6.0 mL水活化Copure® MAX固相萃取柱（货号COMAX6500），然后将上述待净化提取液加入固相萃取柱。然后依次加入3 mL 的乙酸铵溶液和3 mL水淋洗，抽干。加入4 mL甲醇洗脱，收集洗脱液，整个固相萃取过程控制流速在3 mL/min左右。在洗脱液中加入20 μL乙酸，40℃恒温水浴氮吹至近干，用乙酸溶液定容至1.0 mL，涡旋30 s，0.22 μm尼龙滤膜过滤，收集滤液于进样小瓶中，上液相色谱进行测试。1.3过程空白实验不称取试样，按上述步骤进行实验。1.4标准曲线制备准确吸取适量展青霉素标准工作液，用乙酸水溶液（乙酸：水=1:25）稀释配制成5、10、50、100、200 ng/mL的标准工作溶液，制作校准曲线，利用校准曲线对样品进行定量计算。二、仪器条件设备：Thermo Scientific UltiMate 3000色谱柱：Commasil® AQ-C18（4.6 mm*250 mm，5 um）检测器：紫外检测器检测波长：276 nm流动相：A：水  B：乙腈色谱柱温：40℃流速：0.8 mL/min进样体积：50 µL洗脱方式：梯度洗脱表1 梯度洗脱程序时间/minA/%B/%0.0095513.0095514.00010016.00010017.0095522.00955三、实验测试结果表2 苹果汁中展青霉素加标回收实验结果检测项目加标浓度（μg/kg）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）展青霉素6.0092.492.10.40591.792.2展青霉素10.01001000.241101100图1 展青霉素标准曲线图2 苹果汁本底液相色谱图图3 苹果汁中展青霉素的液相色谱图（加标浓度6.00 μg/kg）图4 苹果汁中展青霉素的液相色谱图（加标浓度10.00 μg/kg）四、订购信息货号描述包装COMAX6500Copure® MAX固相萃取柱，500 mg/6 mL30支/盒SDC-3000-Dbiocomma® 多管涡旋混匀仪1台/箱SF130-22-NL尼龙针式过滤器 直径13 mm，孔径0.22 μm100个/盒SC2-12 mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425100个/盒V2-AL2 mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm，9-425100个/盒苹果汁中展青霉素的测定 (Copure@MAX 混合阴离子交换柱) 《GB 5009.185-2016 食品安全国家标准食品中展青霉素的测定》 苹 果 汁 在人们 的 生 活 中是种很常见的饮料，作为饮料饮品，其食用安全性 的 关注越来越 高 。展青霉 素 广泛存在于 霉 变 的水果 中，是影响 苹果汁质 量 安全 的 要素之 一 ，长期 摄 入会对 人体健康造成危 害。 逗点生物结合市场需求，建立了固相萃取-高效液相色谱法测定苹果汁中的展青霉素含 量的方法，样品经阴离子交换固相萃取柱净化、浓缩后，采用高效液相色谱仪结合紫外检测 器测定，外标法定量。经验证，加标回收率范围90-100%， RSD 值小于5%，满足测试要求。 一、样本前处理 1.1提取 准确称取苹果汁2.00g(精确至0.01 g)于 15 mL 离心管(带盖)中待净化。 1.2净化 分别用 6.0 mL 甲醇、6.0 mL 水活化 CopureQ MAX固相萃取柱(货号COMAX6500)，然后将上述待净化提取液加入固相萃取柱。然后依次加入3mL 的乙酸铵溶液和3mL 水淋 洗，抽干。加入4mL甲醇洗脱，收集洗脱液，整个固相萃取过程控制流速在3 mL/min 左 右。在洗脱液中加入 20 pL 乙酸， 40℃恒温水浴氮吹至近干，用乙酸溶液定容至 1.0mL，涡旋 30 s， 0.22 um 尼龙滤膜过滤，收集滤液于进样小瓶中，上液相色谱进行测试。 1.3过程空白实验 不称取试样，按上述步骤进行实验。 1.4标准曲线制备 准确吸取适量展青霉素标准工作液，用乙酸水溶液(乙酸：水 =1：25)稀释配制成5、10、50、100、200 ng/mL 的标准工作溶液，制作校准曲线，利用校准曲线对样品进行定量 计算。 二、仪器条件 设备：： Thermo Scientific U l tiMate 3000 色谱柱： Commasil@ AQ-C18 (4.6 mm*250 mm， 5um) 检测器：紫外检测器 检测波长：276nm 流动相：A：水 B 3：：乙腈 色谱柱温：40℃ 流速：0.8mL/min 进样体积：50uL 洗脱方式：梯度洗脱 表1梯度洗脱程序 时间/min A/% B/% 0.00 95 5 13.00 95 5 14.00 0 100 16.00 0 100 17.00 95 5 22.00 95 5 三、实验测试结果 表2苹果汁中展青霉素加标回收实验结果 检测项目 加标浓度 (ug/kg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 展青霉素 6.00 92.4 92.1 0.405 91.7 92.2 展青霉素 10.0 100 100 0.241 101 100 展青霉素标准曲线 图1展青霉素标准曲线 图2苹果汁本底液相色谱图 4 品a 100 120 14a 150 10 70。 图3苹果汁中 展 青霉素的液相色谱图(加标浓度6.00 ug/kg) 明开发素 10pgKg平汁 UVVS1WVL270m 4.0 Q.0 10.0 120 14.0 18.0 图4苹果汁中展 青霉素 的液相色谱图(加标浓度10.00 ug/kg) 四、订购信息 货号 描述 包装 COMAX6500 CopureMAX 固相萃取柱， 500 mg/6 mL 30支/盒 SDC-3000-D biocomma@多管涡旋混匀仪 1台/箱 SF130-22-NL 尼龙针式过滤器直径13mm， 孔径0.22 u.m 100个/盒 SC2-1 2 mL 蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫， 9-425 100个/盒 V2-AL 2 mL 螺纹棕色样品瓶，带书写处 11.6*32 mm， 9-425 100个/盒