菌落总数指标主要用来评价食品清洁度,反映食品在生产加工、储存、运输等过程中被微生物污染的程度及卫生质量的重要指标。近年来在市场简单管理总局发布的食品监督抽检微生物不合格中,菌落总数指标不合格占比居于首位。菌落总数即为食品检样经过处理,在壹定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器在食品微生物学检验 菌落总数测定中的作用(根据中华人民共和国国家标准GB 4789.2-2022)1、 原理菌落总数指标主要用来评价食品清洁度,反映食品在生产加工、储存、运输等过程中被微生物污染的程度及卫生质量的重要指标。近年来在市场简单管理总局发布的食品监督抽检微生物不合格中,菌落总数指标不合格占比居于首位。菌落总数即为食品检样经过处理,在壹定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。2、 使用仪器1. 恒温培养箱2. 冰箱:2℃~5℃3. 天平:感量为0.1g4. 恒温装置5. 均质器6. 振荡器7. 无菌吸管8. 无菌锥形瓶9. 无菌培养皿10. pH计或pH比色管或精密pH试纸11.菌落计数器 WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器 WIGGENS WH-650 恒温培养箱 WIGGENS D-500Pro 数显均质乳化器 WIGGENS HG400 pro拍打式均质器3、 分析步骤1. 样品稀释(1)固体和半固体样品:称取25g样品置于盛有225魅力,无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌介质杯中,使用WIGGENS D-500Pro 数显均质乳化器8000r/min ~10000r/min均质1min-2min,或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中,用WIGGENS HG400 pro拍打式均质器拍打1min-2min,制成1:10的样品匀液。(2)液体样品:以无菌吸管吸取25ml样品置于225ml,无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌锥形瓶中,充分混匀,或放入225ml,稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min,制成1:10的样品匀液。当结果要求为每g样品中菌落总数时,按第一步操作。(3)用1ml无菌吸管吸取1:10样品匀液1ml,沿管壁缓慢注于9ml稀释液的无菌试管中,在振荡器上振荡混匀,制成1:100的样品匀液。按操作,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1ml无菌吸管或吸头。(4)根据对样品污染状况的估计,选择1~3个适宜稀释度的样品匀液,吸取1ml在 无菌培养皿中,各两个,同时分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌培养皿内做空白对照。(5)及时将15ml~20ml冷却至46℃~50℃的平板计数琼脂培养基(可放置于48℃±2℃ WIGGENS WH-650 恒温培养箱中保温)倾注培养皿,并转动培养皿使其混合均匀。2.培养水平放置待琼脂凝固,平板翻转36℃±1℃培养48h。水产品30℃±1培养72h±3h。3.菌落计数(1)可用肉眼观察,必要时用WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。(2)选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板技术菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。(3)其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无较大片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分步又很均匀,可计算半个平板后*2代表一个平板菌落数。(4)当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数器四、得出结论 五、注意事项1.菌落总数小于100CFU时,按“四舍五入”原则修约,以整数报告。2.使用仪器时,注意使用规范,严格按照实验手册和实验室规范进行操作。 WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器在食品微生物学检验菌落总数测定中的作用 (根据中华人民共和国国家标准GB 4789.2-2022) 一、原理 菌落总数指标主要用来评价食品清洁度,反映食品在生产加工、储存、运输等过程中被微生物污染的程度及卫生质量的重要指标。近年来在市场简单管理总局发布的食品监督抽检微生物不合格中,菌落总数指标不合格占比居于首位。菌落总数即为食品检样经过处理,在壹定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。 二、使用仪器 1. 恒温培养箱 2. 冰箱:2℃~5℃ 3. 天平:感量为0.1g 4. 恒温装置 5. 均质器 6. 振荡器 7. 无菌吸管 8. 无菌锥形瓶 9. 无菌培养皿 10. pH计或 pH比色管或精密 pH试纸 11.菌落计数器 WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器 WIGGENS WH-650 恒温培养箱 WIGGENS D-500Pro 数显均质乳化器 WIGGENS HG400 pro 拍打式均质器 三、分析步骤 1.样品稀释 (1)固体和半固体样品:称取25g样品置于盛有225魅力,无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌介质杯中,使用 WIGGENS D-500Pro 数显均质乳化器 8000r/min~10000r/min 均质1min-2min,或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中,用WIGGENSHG400 pro 拍打式均质器拍打1min-2min,制成 1:10 的样品液。 (2)液体样品:以无菌吸管吸取 25ml 样品置于225ml, 无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌锥形瓶中,充分混匀,或放入225ml,稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min, 制成 1:10 的样品匀液。当结果要求为每g样品中菌落总数时,按第一步操作。 (3)用1ml无菌吸管吸取1:10样品匀液1ml, 沿管壁缓慢注于9ml稀释液的无菌试管中,在振荡器上振荡混匀,制成1:100 的样品匀液。按操作,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1ml 无菌吸管或吸头。 (4)根据对样品污染状况的估计,选择1~3个适宜稀释度的样品匀液,吸取1ml在无菌培养皿中,各两个,同时分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌培养皿内做空白对照。 (5) 及时将15ml~20ml 冷却至46℃~50℃的平板计数琼脂培养基(可放置于48℃±2℃WIGGENS WH-650 恒温培养箱中保温)倾注培养皿,并转动培养皿使其混合均匀。 2.培养 水平放置待琼脂凝固,平板翻转36℃±1℃培养 48h。水产品 30℃±1培养72h±3h。 3.菌落计数 (1)可用肉眼观察,必要时用 WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。 (2)选取菌落数在 30CFU~300CFU 之间、无蔓延菌落生长的平板技术菌落总数。低于30CFU 的平板记录具体菌落数,大于 300CFU 的可记录为多不可计。 (3)其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无较大片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分步又很均匀,可 计算半个平板后*2代表一个平板菌落数。 (4)当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数器 四、得出结论 7.1.2 若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按式(1)计算,示例见B.2。 式中: NV—样品中菌落数; ZC——平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和; 72: ——第一稀释度(低稀释倍数)平板个数; ——第二稀释度(高稀释倍数)平板个数;d——稀释因子(第一稀释度)。 五、注意事项 1.菌落总数小于100CFU时,按“四舍五入”原则修约,以整数报告。 2.使用仪器时,注意使用规范,严格按照实验手册和实验室规范进行操作。
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