水中抗生素检测方案(固相萃取仪)

自动化样品前处理解决方案-RK-2021 Knowledge Optimized Laboratory 解决方案 全自动固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定水中24种抗生素 全自动固相萃取仪；全自动氮吹浓缩仪；液相色谱-中联质谱；抗生素 介绍 近年来，环境水污染问题日益突出，水中药品及个人护理用品 (PHARMACEU-TICALS AND PERSONAL CARE PRODUCTS， 简称PPCPS)这类新型污染物，也日益受到公众和学术界的广泛关注。抗生素药物作为其中的一类，随着畜牧业和渔业养殖的扩大，常以代谢产物随着动物的排泄物、屠宰血水或药物滥用等方式进入地球的水循环体系，对水体造成非常大的破坏。因此，开发水中抗生素的检测方法，对提升自然水体和废水小抗生素的监测能力具有重要意义。 2.仪器和耗材 仪器 Raykol Fotector Plus全自动固相萃取仪 Agilent 1290+6470 高效液相色谱-串联质谱仪 Raykol EVA 80 全自动氮吹浓缩仪 耗材 HLB 固相萃取柱 (RayCure， 500mg/6mL， 货号：RC-204-36477) 试剂 甲醇(优级纯)乙二胺四乙酸二钠(分析纯)浓氨水(分析纯)超纯水 浓盐酸(分析纯) 3.样品制备 水样先用0.45 um滤膜过滤，准确量取500 mL， 加入1 g Na2EDTA 超声溶解，用浓盐酸调节 pH=4，待萃取。 3.1富集和浓缩 依次用10 mL甲醇和 10 mL 超纯水对固相萃取柱进行活化，将水样以5 mL/min 的速度进行上样，之后用 10 mL 超纯水淋洗柱子，除去杂质及 Na2EDTA。用氮气将小柱吹干，以5mL甲醇和5 mL 5%氨水甲醇洗脱目标化合物(具体步骤请见图-1)。将洗脱液 用RaykolEVA-80 全自动氮吹浓缩仪于40℃条件下浓缩至干，加入内标物磺胺甲恶唑-d4、诺氟沙星-d5、罗红霉素-d7和地美环素，用30%甲醇水溶液定容至1mL， 涡旋混匀，过滤膜上机检测。 3.2固相萃取条件 全自动固相萃取仪 Raykol Fotector Plus 固相萃取柱 HLB(RayCure， 500mg/6mL) 活化 甲醇、超纯水 洗脱 甲醇、5%氨水甲醇 序号 命令 溶剂 排出 流速(mL/min) 体积(mL) 时间(min) 1 清洗样品通道 甲醇 1.5 2 活化 甲醇 有机废液 5 10 2.6 3 活化 水 废水 5 10 2.6 4 大体积上样 废水 5 520 130.3 5 淋洗 水 有机废液 5 10 2.6 6 气推 有机废液 80 20 1.6 7 吹干 20 8 清洗注射泵 甲醇 60 3 0.4 9 洗脱 甲醇 收集 1 5 5.4 10 洗脱 5%氨化甲醇 收集 1 5 5.4 11 气推 收集 20 10 1.3 12 结束 13 图-1 Fotector Plus 固相萃取方法 为了验证该方法的准确度和精密度，本实验向纯水样品(500mL)加入24种抗生素混标进行加标回收验证(n=4)，加标水平为20 ng/L，数据如表-1所示。除四环素类抗生素的回收率小于60%之外， 其余抗生素的加标回收率均在 60%-130%之间， RSD值控制在10%以内。说明该方法能够较好地用于水中24种抗生素的检测。 表-1.纯水样品的加标回收率及 RSD 值 (n=4) 序号 化合物 回收率(%)样品-1 回收率(%)样品-2 回收率(%)样品-3 回收率(%)样品-4 平均回收率(%) RSD(%) 1 磺胺嘧啶 69.9 70.8 61.5 74.6 69.2 8.0 2 磺胺噻唑 76.0 69.9 73.5 71.0 72.6 3.7 3 磺胺吡啶 88.5 84.0 86.9 84.4 85.9 2.5 4 磺胺甲基嘧啶 91.0 88.5 89.4 85.9 88.7 2.4 5 磺胺二甲嘧啶 95.2 89.4 91.6 94.3 92.6 2.9 6 磺胺甲恶唑 82.9 83.5 84.1 81.7 83.0 1.2 7 磺胺喹恶啉 90.0 86.1 84.6 83.9 86.1 3.2 8 左氧氟沙星 88.5 93.7 92.8 84.3 89.8 4.8 9 氧氟沙星 85.2 88.8 88.4 86.5 87.2 2.0 10 诺氟沙星 74.3 68.8 68.5 69.1 70.2 4.0 11 环丙沙星 75.4 66.6 68.8 72.2 70.7 5.4 12 恩诺沙星 75.1 80.9 81.3 72.4 77.4 5.7 13 阿奇霉素 68.1 61.3 77.0 67.9 68.6 9.4 14 克林霉素 96.2 87.1 95.9 90.2 92.3 4.8 15 青霉素 116.1 99.9 119.0 114.3 112.3 7.6 16 红霉素 126.5 123.8 114.7 124.2 122.3 4.3 17 罗红霉素 68.9 67.0 61.1 62.7 64.9 5.6 18 甲砜霉素 94.4 95.3 95.4 90.7 93.9 2.3 19 氟甲砜霉素 111.4 120.9 125.9 121.4 119.9 5.1 20 氯霉素 99.1 81.7 90.4 84.1 88.8 8.7 21 四环素 51.6 64.1 57.3 56.2 57.3 9.0 22 强力霉素 52.2 51.2 60.3 56.4 55.0 7.6 23 土霉素 62.2 53.5 56.2 54.8 56.7 6.8 24 金霉素 55.0 51.8 59.3 53.3 54.9 5.9 5.总结 1.睿科Raykol Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪可同步进行6个样品净化，连续自动处理60个样品，做样通量高；同时可无人值守，大幅度减少了工作人员的工作量，提高了工作效率。此外还可避免工作人员因操作失误导致的检测偏差，也可将实验人员更迭对检测结果的影响最小化； 2.睿科Raykol EVA 80全自动氮吹浓缩仪处理通量高，80个样品可同时进行氮吹，实验平行性好；而且采用氮吹针自动追随液面设计，无需手动调节氮吹针高度且耗气量小，省时省力； Raykol 睿科集团股份有限公司 RayKol Group Corp.， Ltd. 网址： www.raykol.com 电话：400-885-1816 邮箱： info@raykol.com 本文中的信息、说明和技术指标如有变更，恕不另行通知◎睿科集团股份有限公司 2020年10月版 邮箱： info@raykol.com热线：址：www.raykol.com 邮箱： info@raykol.com网址：www.raykol.com热线： 近年来，环境水污染问题日益突出，水中药品及个人护理用品（PHARMACEUTICALSANDPERSONALCAREPRODUCTS，简称PPCPS）这类新型污染物，也日 益受到公众和学术界的广泛关注。抗生素药物作为其中的一类，随着畜牧业 和渔业养殖的扩大，常以代谢产物随着动物的排泄物、屠宰血水或药物滥用 等方式进入地球的水循环体系，对水体造成非常大的破坏。因此，开发水中 抗生素的检测方法，对提升自然水体和废水中抗生素的监测能力具有重要意 义。