玉米中植物根系活力检测方案(紫外分光光度计)

TTC法根系活力的测定实验 原理氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液，但还原后通过下列反应，生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下：　 生成的甲臜呈稳定的红色，不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原，可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到加强；而被丙二酸、碘乙酸所严重抑制。所以，它能够测定脱氢酶的活性。由该酶活性表示根系活力。 材料与仪器 水培或砂培的玉米或小麦根植物材料（需洗净） 美析UV-1500PC紫外分光光度计 玉米 小麦根 乙酸乙酯 连二亚硫酸钠 1%TTC溶液 0.1 M  pH7.5磷酸缓冲液 2N硫酸 温箱 研钵 漏斗 移液管 容量瓶 实验步骤 TTC标准曲线制作： 取0.2  ml  0.5%的TTC溶液加入到10  ml 具塞刻度试管中，再加入少许Na2S2O4粉末，摇匀后即产生红色的甲臜。再用乙酸乙酯定容至刻度，摇匀。然后分别取此液0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 ml 至10 ml 具塞刻度试管中，以乙酸乙酯定容至刻度，即得到含甲臜 0.025、0.05、0.10、0.15、0.20毫克的标准比色系列。以空白作参比，在485nm0波长下测定光密度，绘制标准曲线。 定性测定方法 取样品0.25g放入三角瓶，加入0.5%TTC溶液和0.1 M 磷酸缓冲液（pH7.5）各5  ml 充分混匀，并将根尖完全浸入在溶液中，至37℃保温箱内1小时，保温时间一到立即加入2N H2SO4溶液2  ml 以终止反应。如根尖显红色表明该处具有活跃的脱氢酶存在。 定量测定方法 取出定性显色的根段，用滤纸吸干外附水分，至研钵中，加乙酸乙酯3－4  ml 研磨。将提取的红色TTF小心倒入刻度试管中，残渣用乙酸乙酯冲洗2－3次，直至洗液不带红色为止，全部洗液合并于试管中，最后用乙酸乙酯定容至10  ml ；摇匀后，以乙酸乙酯为对照于485n M 下比色，记录光密度值。查标准曲线，即可求出TTC还原量。 仪器参数 UV-1500PC紫外可见分光光度计 仪器特点 *采用单片微机控制，128*64位液晶显示 *宽大的液晶显示器可显示多组数据 *巨大的内存空间，可存储多组数据和曲线 *自动调0、调100%功能 *波长自动调节 *光源自动切换，滤色片自动切换 *宽大样品池（5mm～100mm） *具有最多十点标样建标准曲线测量功能 *可通过直接输入K、B因子建立标准曲线进行定量测量 *可直接输入标样和对应浓度值建立标准曲线进行定量测量 *可断电保存测量设置的标准曲线参数 *配备通用并行打印接口，可打印标题栏、测量数据、曲线参数、曲线标准样品点和曲线 *配USB接口 *可通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求 技术指标及基本参数 *波长范围： 190～1100nm *光谱带宽： 2nm *波长准确度：±0.5nm *波长重现性：≤0.2nm *透射比准确度: ±0.3% τ *透射比重复性：0.15% τ *杂散光：≤0.05% τ (220nm NaI，340nm NaNO2) *稳定性： 0.001A/h（500nm预热后） *测光方式：透过率、吸光度、浓度、能量 *波长调节：自动调节 *光度范围： -0.3～3A *显示方式： 128*64液晶 *检测器：进口硅光二极管 *光源：进口氘灯，进口钨灯 *电源： AC 220V/50Hz或110V/60Hz *功率： 120W *仪器尺寸：480×350×220mm *主机净重： 15Kg 关于我们 上海美析仪器公司简介 上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。       美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP电感耦合等离子体质谱仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。 美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在江苏、上海、山东三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。 （美析仪器不仅仅只是一家高新技术认证企业，更通过了CE认证、FCC认证、RoHS认证以及国内多项资质审查认证，并有着多项自行研发的光谱类专利版权等等） 氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液，但还原后通过下列反应，生成红色而不溶于水的三苯基甲臢，生成的甲臜呈稳定的红色，不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原，可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到加强；而被丙二酸、碘乙酸所严重抑制。所以，它能够测定脱氢酶的活性。由该酶活性表示根系活力