牛奶中黄曲霉毒素 M1检测方案

真菌毒素 牛奶中黄曲霉毒素M1检测的免疫亲和柱法 (Copure@黄曲霉毒素M1免疫亲和柱) 本方法适用于牛奶中黄曲霉毒素M1的检测 一、样品提取 称取4.0g牛奶样品，加10 mL甲醇涡旋10分钟，4℃下6000转冷冻离心10分钟，取2mL提取液加40 mL PBS溶液稀释待净化。 二、免疫亲和柱净化(Copure°黄曲霉毒素M1免疫亲和柱，1mL) 上样：将20mL上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液以 1-2滴/秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。淋洗和洗脱：加10 mL水淋洗柱子，弃掉流出的液体抽干小柱加入4mL 乙腈分两次缓慢洗脱，流速约为2-3秒/滴。重新溶解：在40℃下氮吹至近干，加初始流动相定容至1 mL， 过0.22Hm滤膜，待上机测试。 三、仪器条件 设备：岛津HPLC-30A 色谱柱： Inertsil ODS-3 (2.1 mm×75 mm， 3 Hm) 检测器： RF-20A 荧光检测器 检测波长：激发波长：435 nm2发射波长：365nm 流动相：A：乙腈 B：水 洗脱方式：等度洗脱， A： B=25： 75 流速：0.3 mL/min 进样体积：1 四、实验结果 表11.0 ug/kg牛奶中黄曲霉毒素M1 的添加回结果 图1添加水平为1.0 ug/kg牛奶中黄曲霉毒素Ml检测的液相色谱图 订购信息 货号 描述 包装 COAFMM101 Copure@ 黄曲霉毒素M1免疫亲和柱，1mL 25支/盒 SF130-22-PTFE PTFE/中13 mm/0.22 Hm/有机系 100个/盒 MF047-45-MCE MCE/47 mm/0.45 Pm/水系 200片/盒 MF047-45-PTFE PTFE/47 mm/0.45 Hm/有机系 200片/盒 V2-AL 2mL透明短螺纹广口样品瓶，带书写处 100个/盒 SC2-5 2 mL 蓝色聚丙烯盖，预开口， 9-425 100个/盒 SPEMF12G 12位固相萃取负压装置，玻璃缸体 1个/盒 CT020-SL-2 20 mL上样器 50支/包 玉米粉中玉米赤霉烯酮含量的免疫亲和柱法 (Copure@玉米赤霉烯酮免疫亲和柱) 本方法适用于玉米粉中玉米赤霉烯酮的测定 一、样品提取 称取5.00g(精确到0.01 g)玉米粉到50 mL离心管，加入1.0 g NaCl 和20 mL 70%甲醇水溶液，振荡30 min， 4000r/min 下离心5 min， 取上清液1mL于15 mL离心管中，加水4mL，混匀待净化。 二、免疫亲和柱净化(Copure°玉米赤霉烯酮免疫亲和柱，3mL) 上样：将20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化样品1mL以1-2滴/秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。淋洗和洗脱：加入20mL水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流出的液体；抽干小柱；加入3mL甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速约为2-3秒/滴。 重新溶解：50℃下氮吹至近干，加1mL 50%乙腈水溶液溶解，0.22 Hm滤膜过滤， 供HPLC分析。 三、仪器条件 设备： Waters Alliance 2695 色谱柱： Inertsustain C18 (4.6 mm×250 mm， 5 Hm) 检测器： Waters 2475 荧光检测器 检测波长：激发波长：274nm发射波长：440 nm 流动相： A：乙腈 B：水C：甲醇 洗脱方式：等度洗脱， A： B： C=46：46：8 流速：1mL/min 进样体积：20儿 四、实验结果 表11.0 mg/kg玉米粉中玉米赤霉烯酮的添加回收结果 图1添加水平为1.0 ug/kg玉米粉中玉米赤霉烯酮检测的液相色谱图 订购信息 货号 描述 包装 COAFZEA103 Copure@玉米赤霉烯酮免疫亲和柱，3mL 20支/盒 SF130-22-PTFE PTFE/中13 mm/0.22 Hm/有机系 100个/盒 MF047-45-MCE MCE/中47 mm/0.45 Pm/水系 200片/盒 MF047-45-PTFE PTFE/47 mm/0.45 Hm/有机系 200片/盒 V2-AL 2 mL棕色短螺纹广口样品瓶，带书写处 100个/盒 SC2-5 2mL 蓝色聚丙烯盖，预开口，9-425 100个/盒 SPEMF12G 12位固相萃取负压装置，玻璃缸体 1个/盒 CT020-SL-2 20 mL上样器 50支/包 一、样品提取 称取 4.0 g 牛奶样品，加 10 mL 甲醇涡旋 10 分钟，4℃下 6000 转冷冻离心 10 分钟，取 2 mL 提取液加 40 mL PBS 溶液 稀释待净化。 二、免疫亲和柱净化（Copure® 黄曲霉毒素 M1 免疫亲 和柱，1 mL） 上样：将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱：加 10 mL水淋洗柱子，弃掉流出的液体；抽干小柱； 加入 4 mL 乙腈分两次缓慢洗脱，流速约为 2-3 秒 / 滴。 重新溶解：在 40℃下氮吹至近干，加初始流动相定容至 1  mL，过 0.22 µm 滤膜，待上机测试。 三、仪器条件 设备：岛津 HPLC-30 A 色谱柱：Inertsil ODS-3 (2.1 mm×75 mm, 3 µm) 检测器：RF-20A 荧光检测器 检测波长：激发波长：435 nm 发射波长：365 nm 流动相：A：乙腈 B：水 洗脱方式：等度洗脱，A：B=25：75 流速：0.3 mL/min 进样体积：1 µL 四、实验结果 表 1 1.0 μg/kg 牛奶中黄曲霉毒素 M1 的添加回结果