牛奶/猪肉中喹诺酮检测方案(离心机)

兽残篇www.biocomma.cn 53固相萃取产品应用手册(6版) indd 532021/1/2715：04：50 动物源性食品中喹诺酮检测的固相萃取方法(CopureHLB) 《GB/T 21312-2007动物品性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法》 一、样品提取 表1流动相梯度洗脱 准确称取牛奶/猪肉试样5.00g(精确至0.01)于50mL离心管中，加入10 mL EDTA-Mellvaine缓冲液，涡旋1min， 超声提取10 min， 再于4000 r/min 下离心5 min， 取上清液，按上述步骤再提取两次，离心，合并三次上清液，用EDTA-Mellvaine 缓冲液定容至30 mL 备用。 时间/min A(%) B(%) 0 10.0 90.0 3.0 20.0 80.0 10.0 35.0 65.0 11.0 65.0 35.0 12.0 10.0 90.0 10.0 90.0 流速：1.0 mL/min 二、SPE柱净化 (CopureHLB， 200 mg/6mL) 进样体积：20L 活化：净化前固相萃取柱依次使用6mL甲醇活化、6mL水平衡。 四、实验结果 上样和洗脱：取10 mL上清液上样，弃去流出液，加2mL5%甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，将小柱抽干，再用6mL甲醇洗脱并收集洗脱液。 表22添加水平为1.2 mg/kg 牛奶和猪肉基质中喹诺酮的添加回收结果 重新溶解：洗脱液于50℃下氮吹至近干，加1mL甲醇重新溶解，涡旋混匀，过0.22 Hm有机虑膜，待上机测试。 三、仪器条件 设备： Waters Alliance 2695 目标物 基质 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 培氟沙星 牛奶 92.9 100.5 100.7 98.0 4.5 猪肉 99.0 105.9 105.4 103.4 3.7 恩诺沙星 牛奶 99.5 100.4 98.8 99.6 0.8 猪肉 95.9 93.6 91.4 93.6 2.4 色谱柱： InerSustain@-C18 (4.6 mm×250 mm， 5 Hm) 0.0 检测器： Waters 2487紫外检测器 检测波长：254 nm 流动相：A：乙腈 B： 0.1%甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱，见表1 图1添加水平为1.2 mg/kg 喹诺酮检测的液相色谱图 订购信息 货号 描述 包装 COHLB6200 Copure@ HLB 固相萃取柱， 200 mg/6 mL 30支/盒 SF130-45-PTFE PTFE/D13 mm/0.45 Hm/有机系 100个/盒 MF047-45-MCE MCE/D47 mm/0.45 H4m/水系 200片/盒 MF047-45-PTFE PTFE/D47 mm/0.45 Hm/有机系 200片/盒 V2-AL 2mL棕色短螺纹广口样品瓶，带书写处 100个/盒 SC2-5 2mL 蓝色聚丙烯盖，预开口，9-425 100个/盒 SPEMF12G 12 位固相萃取负压装置，玻璃缸体 1个/盒 一、样品提取 准确称取牛奶 / 猪肉试样 5.00 g（精确至 0.01）于 50 mL 离 心管中，加入 10 mL EDTA-Mellvaine 缓冲液，涡旋 1 min，超 声提取 10 min，再于 4000 r/min 下离心 5 min，取上清液， 按上述步骤再提取两次，离心，合并三次上清液，用 EDTAMellvaine 缓冲液定容至 30 mL 备用。二、SPE 柱净化（Copure® HLB，200 mg/6 mL） 活化：净化前固相萃取柱依次使用 6 mL 甲醇活化、6 mL 水 平衡。 上样和洗脱：取 10 mL 上清液上样，弃去流出液，加 2 mL 5% 甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，将小柱抽干，再用 6 mL 甲醇 洗脱并收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 50℃下氮吹至近干，加 1 mL 甲醇重新溶解，涡旋混匀，过 0.22 µm 有机滤膜，待上机测试。 三、仪器条件 设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：InerSustain®-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：254 nm 流动相：A：乙腈   B：0.1% 甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1 表 1 流动相梯度洗脱