染发剂中苯类有机物检测方案(液相色谱仪)

悟空仪器 高效液相色谱法检测染发剂中的苯类有机物 化妆品是满足人们对美的需求的消费品，直接作用于人体，其质量关系人民群众健康。近年来，我国化妆品产业迅速发展，市场规模逐年增长，同时也出现了一些新情况、新问题。 非法添加等违法现象日益突出，2018年我国药监局针对不合格化妆品发布公告30条；2019年针对不合格化妆品发布公告更是达到了54条。其中，染发剂通告批次占到了不合格化妆品8成以上的比例。 染发剂直接接触皮肤，且在染发过程中需要加热，会使其中的苯类有机物通过头皮进入毛细血管，然后随血液循环到达骨髓，长期反复作用于造血干细胞会导致造血干细胞发生恶变，从而诱发白血病。 为了对化妆品生产经营活动及其监督管理予以规范，国家药品监督管理局制定修改了新的《化妆品监督管理条例》。 对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间二二酚是染发剂中常见的物质，且这三种成分均具有一定的致毒致癌性。因此，新的《化妆品监督管理条例》对其添加限量进行了严格的规定。 当然，追求美丽是每个人都无法抗拒的事情，但要注意染发次数不宜太多，平时注重头发养护。 实验部分高效液相色谱法检测染发剂中的对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚 仪器与试剂 仪器与设备： 悟空 K2025高效液相色谱仪；分析天平；涡旋振荡器；离心机；超声波清洗机；容量瓶(10mL、25mL)等。 K2025高效液相色谱仪 试剂与材料： 符合 GB/T6682 的一级水；甲醇(色谱级)；乙腈(色谱级)；醋酸铵(色谱级)；氨水(色谱级)；对苯二胺，99.9%；2，5-二氨基甲苯，≥98.0%；间间苯二酚， 99.9%。 实验方法 样品前处理： 称取染发剂样品 0.1~0.5 g， 置于 25mL棕色容量瓶中，加入5%(w/v)亚硫酸钠1mL， 再用10mL甲醇溶解样品，最后用流动相定容至刻度，在4000r/min 条件下离心3min，取上清液用 0.22um 有机相滤膜过滤，上机测定。 标准溶液配制： 将对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚标准品各 10mg 用甲醇完全溶解，转移至10mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀，即得对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚浓度均为 1000mg/L 的标准储备溶液；用流动相配制对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚浓度依次为 1mg/L、5mg/L、10mg/L、50mg/L 和 100mg/L的系列混合标准工作液。 色谱条件： a)色谱柱： C184.6×150mm， 5um 或者相当的色谱柱； b)流动相：乙腈：甲醇：0.02mol/L醋酸铵缓冲液(pH7.5)(2.5：2.5：95)； c)柱温：25℃； d)进样量：20uL； e)流速：1.0mL/min； f)波长：280nm； 结果与讨论： 1、按照上述色谱条件进行采集，对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚系列混合标准溶液色谱图如图1所示(n=7)。 图1对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚混标连续进样7针叠加色谱图 2、对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚混合标准溶液连续进样7针重复性测试，保留时间 RSD 依次为0.070%、0.045%和0.061%，峰面积 RSD 依次为 0.374%、0.588%和 0.091%。 表1对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚混标连续进样7针重复性数据统计 目标物 标准品 1 2 3 4 5 6 7 RSD% 对苯二胺 保留时间 2.835 2.838 2.838 2.837 2.838 2.835 2.833 0.070 峰面积 468.465 466.082 465.424 464.380 464.623 464.024 463.133 0.374 2.5-二氨基甲苯 保留时间 5.297 5.298 5.298 5.293 5.295 5.295 5.292 0.045 峰面积 436.518 435.684 435.265 433.139 431.387 431.637 429.750 0.588 间苯二酚 保留时间 9.728 9.737 9.730 9.722 9.722 9.728 9.720 0.061 峰面积 860.228 859.580 859.076 858.560 860.539 858.697 860.068 0.091 3、将市售染发剂样品按照上述方法进行前处理后提取液连续进样7针，色谱图如图2所示(n=7)。 图2市售染发剂样品提取液连续进样7针色谱图 4、、该市售染发剂样品连续进样7针重复性测试数据见表2；经计算该染发剂中对苯二胺含量为1.29%，间苯二酚含量为0.97%， 而2，5-二氨基甲苯未检出。 表2样品提取液进样7针重复性数据统计 目标物 样品 1 2 3 4 5 6 7 RSD% 对苯二胺 保留时间 2.852 2.852 2.845 2.852 2.850 2.848 2.848 0.095 峰面积 457.069 455.222 454.146 453.042 450.320 449.243 442.897 1.048 间苯二酚 保留时间 9.753 9.760 9.755 9.757 9.763 9.762 9.762 0.040 峰面积 487.294 486.360 485.447 482.955 481.327 480.717 473.366 0.982 为了验证方法的可靠性，在染发剂样品中添加对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚，计算回收率，实验得到对苯二胺的回收率为 93.29%，2，5-二氨基甲苯的回收率为99.25%，间苯二酚的回收率为 99.77%，表明该方法完全满足要求。 讨论 结果表明，使用 Wooking K2025高效液相色谱仪测定测定染发剂中的对苯二胺、2，5-二氨基甲苯和间苯二酚，完全满足2021年版《化妆品监督管理条例》相关法规标准，为提高化妆品质量控制和监管水平提供了参考。 化妆品是满足人们对美的需求的消费品，直接作用于人体，其质量关系人民群众健康。近年来，我国化妆品产业迅速发展，市场规模逐年增长，同时也出现了一些新情况、新问题。 非法添加等违法现象日益突出，2018年我国药监局针对不合格化妆品发布公告30条；2019年针对不合格化妆品发布公告更是达到了54条。其中，染发剂通告批次占到了不合格化妆品8成以上的比例。 染发剂直接接触皮肤，且在染发过程中需要加热，会使其中的苯类有机物通过头皮进入毛细血管，然后随血液循环到达骨髓，长期反复作用于造血干细胞会导致造血干细胞发生恶变，从而诱发白血病。 为了对化妆品生产经营活动及其监督管理予以规范，国家药品监督管理局制定修改了新的《化妆品监督管理条例》。 对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚是染发剂中常见的物质，且这三种成分均具有一定的致毒致癌性。因此，新的《化妆品监督管理条例》对其添加限量进行了严格的规定。 当然，追求美丽是每个人都无法抗拒的事情，但要注意染发次数不宜太多，平时注重头发养护。