川乌中气味变化检测方案(感官智能分析)

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检测样品: 中药材和饮片
检测项目: 理化性质
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发布时间: 2021-05-10
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研究制川乌炮制过程中各个阶段的气、味变化特征,表征制川乌炮制过程的气、味变化与内在有效成分之间的变化关系。

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中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第51卷第23期2020年12月·5956· 基于仿生技术的制川乌炮制过程变化研究 毕 胜1,谢若男2,金传山1,3*,马 凯4,张永强4,李田士4 1.安徽中医药大学药学院,安徽合肥2230012 2.安徽中医药大学附属第二医院,安徽合肥230061 3.中药饮片制造新技术安徽省重点实验室,安徽合肥 230012 4.亳州市永刚饮片厂有限公司,安徽亳州 236800 摘 要:目的 研究制川乌炮制过程中各个阶段的气、味变化特征,表征制川乌炮制过程的气、味变化与内在有效成分之间的变化关系。方法 制作3批不同炮制时间的制川乌样品,使用电子鼻、电子舌对制川乌炮制过程中“气”“味”变化进行检测,通过雷达图、线性判别分析法(LDA)、主成分分析(PCA)对获取的数据进行分析处理,并与制川乌炮制过程中生物碱类成分进行相关性分析。结果 电子鼻、电子舌可以区分出制川乌不同炮制程度的样品。通过 Pearson 相关性分析得出,电子鼻 FAC1 与乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、单酯型生物碱总量均呈显著相关性(P<0.01),电子舌 FAC2 与苯甲酰新乌头原碱、单酯型生物碱总量均呈显著相关(P<0.01),与苯甲酰乌头原碱含量呈相关性(P<0.05)。结论 电子鼻、电子舌仿生技术可运用于制川乌炮制过程质量研究,为中药炮制研究提供了一种新思路。 关键词:川乌;电子鼻;电子舌;炮制;质量研究;气;味;雷达图;线性判别分析法;主成分分析;相关性;乌头碱;新 乌头碱;苯甲酰乌头原碱;苯甲酰新乌头原碱;单酯型生物碱 中图分类号:R283.1 文献标志码:A 文章编号:0253-2670(2020)23-5956-07 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2020.23.007 Changes of processing process of Aconiti Radix Cocta based on bionic technology BI Sheng', XIE Ruo-nan, JIN Chuan-shan,3, MA Kai, ZHANG Yong-qiang, LI Tian-shif 1. School of Pharmacy, Anhui University of Chinese Medicine, Hefei 230012,China 2. The Second Affiliated Hospital of Anhui University of Chinese Medicine, Hefei 230061, China 3. Anhui Key Laboratory of New Manufacturing Technology for Traditional Chinese Medicine Decoction Pieces, Hefei 230012,China 4. Bozhou Yonggang Chinese Medicine Decoction Pieces Co., Ltd., Bozhou 236800, China Abstract: Objective To study the characteristics of gas and taste changes in different stages during the processing of Aconiti RadixCocta (ARC), and characterize the relationship between the changes of gas and taste and the internal active components. MethodsThe changes of gas and taste of three batches of ARC samples with different processing time were detected by using electronic noseand electronic tongue system, the obtained data from processing were analyzed through the radar map, linear discriminant analysis(LDA), principal component analysis (PCA), and the correlation analysis was made with alkaloids from ARC processing. ResultsElectronic nose and electronic tongue could distinguish the samples of different processing degree of ARC. Pearson correlationanalysis showed that electronic nose FAC1 was significantly correlated with aconitine, neoaconitine, benzoylaconitine,benzoylneoaconitine and monoester alkaloids (P<0.01). Electronic tongue FAC2 was significantly correlated with the total amount ofbenzoylaconitine and monoester alkaloids (P <0.01), and correlated with the content of benzoylaconitine (P <0.05). ConclusionThe bionic technology of electronic nose and electronic tongue could be used to study the processing quality of ARC. This methodprovides a new way of thinking for the Chinese medicine processing study. Key words: Aconiti Radix Cocta; electronic nose; electronic tongue; processing; quality research; gas, taste; radar map; lineardiscriminant analysis; principal component analysis; correlation; aconitine; neoaconitine; benzoylaconitine; benzoylneoaconitine;monoester alkaloids ( 收稿日期:20 2 0-06-20 ) ( 基金项目:国 家 重点研发计划项目(2018YFC1707004) ) ( 作者简介:毕 胜 ( 1 987一),男, 硕 士研究生 , 研究方向为中药炮制。 Tel:1 5 255961857 E -mail:419972994@qq.com ) ( *通信作者 金传山( 1 963一),男, 教 授,硕 士 研究生导师,研究方向为中药炮制。Tel: 1 3 355512699 E -mail: jcs4@sohu.com ) 制川乌为毛莨科乌头属植物乌头 Aconitumcarmichaelii Debx.干燥母根的炮制加工品,具有祛风除湿、温经止痛的功效,临床常用于风寒湿痹、关节疼痛、心腹冷痛、寒疝作痛及麻醉止痛。现代研究表明,川乌中主要含有生物碱类成分,在炮制过程中,毒性较大的双酯型生物碱,逐步转化为毒性程度较小的单酯型生物碱,从而起到了炮制减毒、增效的作用[2]。随着科学技术的不断发展,仿生技术作为一种新型的质量评价手段已经逐步应用于至日化、食品等的气味及滋味的判别。“气”味”是中药传统质量评价的重要手段,21世纪以来,仿生技术已经逐步被应用至中药领域的研究,其中电子鼻与电子舌是最常用的2种使用手段[4-5]。本实验通过利用电子鼻、电子舌的仿生技术手段,研究制川乌炮制过程中各个阶段的气、味变化特征,表征制川乌炮制过程的气、味变化与内在有效成分之间的变化关系。 1仪器与试药 Ultimate 3000 高效液相色谱仪,美国 ThermoFisher Scientific 公司;PEN3型电子鼻,德国AirsenseAnalytics 公司; SA402B型电子舌,日本 InsentIntelligent Sensor Technology 公司; XS204 型十万分之一电子天平,德国梅特勒-托利多国际贸易有限公司; EZ28BS05 型蒸锅,浙江苏泊尔股份有限公司;JC101型电控恒温鼓风干燥箱,上海精宏实验设备有限公司; KH-330型超声波仪,上海亚荣生化仪器厂。 乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰新乌头原碱对照品,购于中国食品药品检定研究院,批号分别为110720-201111、110798-201308、110799-201608、111794-201705、111796-201303、111795-201303;乙腈和四氢呋喃为色谱纯级,其他试剂为分析纯级,水为超纯净水。 川乌药材购于亳州市永刚饮片厂有限公司,经安徽中医药大学金传山教授鉴定为毛莨科乌头属植物乌头 A. carmichaelii Debx.的干燥母根。 2方法与结果2川乌的炮制 根据《中国药典》2015年版一部制川乌项下炮制方法,取大小均匀川乌去除非药用部分和杂质,平行分成3组,每组(2000±100)g,先用水浸泡至内无干心,取出,放入蒸锅(温度100℃)进行 蒸制,蒸制12h,分分在蒸制2、4、6、8、10、12h时分别取出样品约200g, 晾至六成干,于80℃下烘箱干燥6h。 2.2 电子鼻分析 2.2.1 样品处理 分别称取3组川乌及其炮制2、4、6、8、10、12h样品,粉碎,过3号筛,备用。精密称取样品粉末4.0 g, 置于20 mL 顶空进样瓶中,室温静置15 min, 分别对3组不同炮制程度川乌样品进行测定。 2.2.2 分析方法 数据获取持续时间60 s, 取样间隔1s, 冲洗时间60s,零点微调时间10s, 预采样时间5.0s, 空气体积流量100 mL/min,初始注入体积流量100 mL/min,测定温度26℃,采集5859、60s的3组数据作为输出值。 2.2.3 精密度考察 电子鼻由10个传感器构成,分别为W1C、W5S、W3C、W6S、W5C、W1S、W1W、W2S、W2W、W3S,用于检测不同种类化合物,具体信息见表1。以横坐标为采样测试时间,纵坐标为传感器响应强度,以100s内达到平衡状态的特征响应值作为输出值,见图1。 为了考察电子鼻的精密度,重复测定同一样品6次,数据见表2。结果表明,各传感器的RSD 值均<3%,数据结果稳定,表明仪器精密度良好。 2.2.4 “气”变化特征数据分析 (1)传感器响应值分析:取3批川乌及其不同炮制时间的样品的电子鼻10种气味传感器数值检测值的平均值(表3),使用雷达图进行分析[6,结果如图2。结果显示川乌及其不同炮制时间的样品在电子鼻传感器 W1W、W2W、W5S、W1S数值上存在较大有差异,其中 W1W 的变化差异最为突出; 表1 电子鼻传感器性能描述 Table 1 Performance description of electronic nose sensor 阵列序号 传感器名称 性能描述 W1C 芳香成分 2 W5S 灵敏度大,对氮氧化合物很灵敏 3 W3C 氨水,芳香成分 4 W6S 氢气 5 W5C 烷烃芳香类成分 6 W1S 对甲烷等短链烷烃灵敏 7 W1W 对无机硫化物灵敏 8 W2S 乙醇 9 W2W 芳香类成分,有机硫化物灵敏 10 W3S 烷烃 图1 制川乌电子鼻响应强度曲线 Fig.1FResponse intensity curve of electronic nose for Aconiti Radix Cocta 表2 电子鼻精密度考察 Table 2Study on precision of electronic nose W3S、W1C、W6S、W5C、W3C、W2S传感器数值差异不明显。 传感器 RSD/% 传感器 RSD/% W1C 1.85 W5S 2.10 W3C 1.30 W6S 0.34 W5C 0.54 W1S 2.50 W1W 2.61 W2S 2.80 W2W 2.78 W3S 2.20 (2)线性判别分析(LDA):将电子鼻获取的川乌及3批不同炮制时间传感器响应值进行电子鼻仪器配备的LDA软件进行分析,结果见图3。分析结果显示第1主成分与第2主成分的总贡献率达97.63%,说明其能够较好的反映原始数据的信息。LDA分析显示,电子鼻可以实现不同炮制时间的制 表3川乌及其不同炮制时间的样品电子鼻传感器数值 Table 3Electronic nose sensor data of Aconiti Radix Cocta at different processing time 类别 WIC W5S W3C W6S W5C WiS WIW W2S W2W W3S 生品 1.483 5.358 1.309 1.002 1.087 3.589 8.823 1.810 6.329 1.189 蒸2h 1.413 2.731 1.289 1.020 1.092 3.635 8.523 2.004 5.643 1.279 蒸4h 1.500 3.850 1.348 1.051 1.112 4.098 9.098 2.147 6.203 1.334 蒸6h 1.498 3.661 1.361 1.051 1.121 4.023 9.698 2.101 6.054 1.228 蒸8h 1.160 2.136 1.131 0.980 1.028 2.015 5.427 1.481 2.821 1.089 蒸10h 1.364 3.643 1.239 1.020 1.062 3.097 7.902 1.924 4.565 1.219 蒸12h 1.331 2.810 1.210 1.015 1.054 2.990 7.397 1.925 4.509 1.163 川乌区分,反应了不同炮制阶段制川乌的“气”味 声提取 30 min, 400 r/min 离心5 min, 滤纸滤过,发生了明显变化。 2.3 电子舌分析 2.3.1 样品处理里分别称取3组川乌及其炮制2、4、6、8、10、12h样品,粉碎,过3号筛,备用。精密称定3组不同炮制程度的制川乌样品5 g, 置250mL锥形瓶中,加入100 mL纯化水,充分浸润后超 将滤液分装至样品杯中(约每份40 mL), 26℃下进行测定。 2.3.2 分析方法 传感器在3组清洗溶液中分别清洗90、120、120s,在平衡液(2.2365g氯化钾和0.045g酒石酸加水配制成1000 mL的混合溶液)中平衡30 s,重复平衡数次至各传感器电势值均低 图2川乌及不同炮制时间气味雷达图 Fig. 2 Radar chart of electronic nose data of Aconiti RadixCocta at different processing time 图3川乌及不同炮制时间样品电子鼻LDA分析图 Fig. 3 LDA analysis of electronic nose data of AconitiRadix Cocta at different processing time 于0.5mV,传感器平衡后对样品进行测定30s, 样品测定后传感器在另外2组清洗液中分别清洗3s,清洗后 CPA solution中测定回味,时间30s。 2.3.3精密度考察电子舌由 CTO、CAO、AE1、AAE、COO共5个传感器进行数据采集,以30 s内传感器平均响应值作为输出值,各传感器性能描述见表3。采用“2.3.2”项所述分析方法采集数据,进行精密度考察。重复测定同一批制川乌样品6次, 计算得出各传感器输出值 RSD 均小于3%, 证明该结果可靠,仪器良好,数据结果见表4。 表3 电子舌传感器性能描述 Table 3 Performance description of electronic tongue sensor 感官信息 传感器名称 性能描述 咸味 CTO 膳食中的盐引起的咸味 酸味 CAO 柠檬酸和酒石酸等产生的酸味 涩味 AE1 涩味物质引起的辛辣味 鲜味 AAE 氨基酸和核酸等引起鲜味 苦味 COO 苦味物质引起的苦味,低浓度 表4电子舌精密度考察 Table 4Study on precision of electronic tongue 传感器 RSD/% 传感器 RSD/% CTO 2.02 CAO -1.24 AE1 2.16 AAE 1.64 COO 1.42 2.3.4 “味”变化特征数据分析 (1)传感器响应值分析:川乌及其不同炮制时间的样品通过电子舌味觉传感器对酸味(sourness)、苦味 ( bitterness )、涩味 (astringency)、咸味(saltiness )、丰富性 (richness)、鲜味 (umami)、涩味的回味 (aftertaste-A)、苦味的回味 (aftertaste-B)8种味觉值进行检测,3批样品传感器响应值平均值见表5。将传感器响应值使用雷达图分析,如图4。结果显示,生川乌及不同炮制时间的样品8种味觉传感器响应值变化均不明显。 (2)主成分分析(PCA)[8]:将电子舌获取的川乌及3批不同炮制时间传感器响应值进行 PCA,得出第1主成分(FAC1)和第2主成分(FAC2),累计贡献率达85.07%。结果见图5。PCA法分析显示川乌生品及不同炮制时间的电子舌“味”觉发生 表5川乌及其不同炮制时间的样品电子舌味觉值 Table5 Electronic tongue data of Aconiti Radix Cocta at different processing time 类别 酸味 苦味 鲜味 丰富性 咸味 涩味 涩味的回味 苦味的回味 生品 -38.82 1.01 10.55 -0.76 9.50 1.42 2.37 1.17 蒸2h -38.44 4.01 9.98 -0.65 6.22 1.64 3.04 1.70 蒸4h -37.75 3.60 9.50 -0.79 4.95 0.32 1.63 0.91 蒸6h -35.09 3.38 8.76 -0.70 5.32 1.02 1.79 1.70 蒸8h -34.88 3.60 8.70 -0.66 5.08 0.91 1.87 1.22 蒸10h -35.54 6.82 9.42 -0.24 5.07 0.55 2.11 4.20 蒸12h -33.88 5.61 8.72 -0.36 5.19 0.86 2.17 2.99 苦味的回味 图4 川乌及不同炮制时间样品味觉值雷达图 Fig. 4 Radar chart of electronic tongue data of AconitiRadix Cocta at different processing time 图5 川乌及不同炮制时间样品电子舌 PCA 图 Fig. 55 PCA analysis of electronic tongue data of AconitiRadix Cocta with different processing time 了明显变化。其中生品、蒸2h、蒸10 h、蒸12h样品之间“味”觉差异明显;蒸4h、蒸6h、蒸8h样品之间“味”觉值差异相对较小。选取毫州市永刚饮片厂有限公司10名经验药工,将3批不同炮制程度制川乌样品进行人工口尝盲评,根据口尝结果对样品进行麻舌程度的评定,综合汇总分析试验结果见表6。结果显示人工口尝结果与PCA 法聚类结果相似。 表6 川乌及不同炮制时间样品的口尝味道 Table6 Taste of Aconiti Radix Cocta at differentprocessing time 样品 口尝味道 样品 口尝味道 生品 辛辣、严重麻舌 蒸8h 微麻舌 蒸2h 微辛辣、麻舌 蒸10h 无麻舌 蒸4h 微麻舌 蒸12h 无麻舌 蒸6h 微麻舌 2.4 生物碱类成分含量测定 2.4.1 色谱条件按照《中国药典》2015年版一部制川川项下条件, Agilent Extend-C18色谱柱(250mm×4.6mm, 5 um);以乙腈-四氢呋喃(25:15)为流动相A, 0.1 mol/L 醋酸铵溶液为流动相 B, 进行梯度洗脱:0~48 min, 15%~26%A; 48~49 min,26%~35%A; 49~58min, 35%A; 58~65min,35%~15%A;检测波长为235 nm。 2.4.2 对照品溶液的制备 精密称取乌头碱2.5mg、次乌头碱 7.5 mg、新乌头碱7.5 mg, 加入异丙醇-三氯甲烷(1:1)定容至50mL,摇匀,配制成含乌头碱 50 ug/mL、次乌头碱和新乌头碱各 0.15mg/mL 的混合对照品溶液。精密称取苯甲酰乌头原碱对照品 15.0 mg、苯甲酰次乌头原碱对照品2.5mg、苯甲酒新乌头原碱2.5 mg, 加入异丙醇-三氯甲烷(1:1)定容至50mL,摇匀,配制成含苯甲酰乌头原碱和苯甲酰次乌头原碱各50 ug/mL、苯甲酰新乌头原碱 0.3 mg/mL 的混合对照品溶液。 2.4.3 供试品溶液的制备 取各不同炮制程度的川乌样品粉末(过3号筛)约2g, 精密称定,置具塞锥形瓶中,加氨试液3mL, 精密加入异丙醇-醋酸乙酯(1:1)50 mL,称定质量,超声处理(功率300 W,频率 40kHz;水温在25℃以下)30 min,放冷,再称定质量,用异丙醇-醋酸乙酯(1:1)补足减失的质量,摇匀,滤过。精密量取续滤液25mL,40℃以下减压回收溶剂至干,残渣精密加入异丙醇-三氯甲烷(1:1) 3 mL溶解,滤过,取续滤液,即得。 2.4.4 生物碱类成分变化分析 对3组不同炮制时间的川乌样品,按照上述《中国药典》2015年版的检测方法进行检测,分别检测得出6种不同生物碱含量、单酯型生物碱总量和双酯型生物碱总量,见表7.分析得出,随着炮制时间的增加,双酯型生物碱含量明显下降,蒸制6h后含量几乎为0;单酯型生物碱总量呈现出先增加后下降的趋势,蒸制10h后下降趋势明显。 2.5 气、味变化与生物碱相关性分析 2.5.1 “气”与指标成分的相关性分析 运用 SPSS17.0统计软件将电子鼻“气”味值与各生物碱含量变化进行相关性分析。取3批川乌及不同炮制时间样品电子鼻数据,通过主成分分析法进行降维处理,得到第1主成分(FAC1)和第2主成分(FAC2),累计贡献率达95.21%,因此可认为 FAC1 与 FAC2 代表了样品电子鼻特征。通过 Pearson 相关性分析得出,电子鼻FAC1 与乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、单酯型生物碱总量 均呈显著相关性(P<0.01), FAC2 与各生物碱含量相关性不显著[10],见表8. 2.5.2 “味”与指标成分的相关性分析 运用 SPSS 表7 不同炮制时间各生物碱含量 Table 7 Content of alkaloids at different processing time 质量分数/(ugg) 炮制程度 乌头碱 次乌头碱 新乌头碱 双酯型生物碱 苯甲酰新乌头 苯甲酰乌头 苯甲酰次乌头 单酯型生物碱 总量 原碱 原碱 原碱 总量 生川乌 139.2 268.1 420.8 828.1 0.0 0.0 0.0 0.0 1-蒸2h 0.0 1404.3 0.0 1404.3 814.2 85.1 55.8 955.1 1-蒸4h 0.0 585.8 0.0 585.8 1107.5 115.4 99.8 1322.7 1-蒸6h 0.0 0.0 0.0 0.0 948.0 114.2 85.2 1147.4 1-蒸8h 0.0 0.0 0.0 0.0 869.2 105.3 119.1 1093.6 1-蒸10h 0.0 0.0 0.0 0.0 1103.2 147.6 149.8 1400.6 1-蒸12h 0.0 0.0 0.0 0.0 927.1 118.8 172.2 1218.1 2-蒸2h 0.0 1941.3 0.0 1941.3 765.3 88.1 77.9 931.3 2-蒸4h 0.0 531.0 0.0 531.0 1017.4 136.8 139.2 1293.4 2-蒸6h 0.0 0.0 0.0 0.0 984.1 138.3 150.6 1273.0 2-蒸8h 0.0 0.0 0.0 0.0 1143.2 186.2 111.3 1440.7 2-蒸10h 0.0 0.0 0.0 0.0 1149.1 177.2 154.8 1481.1 2-蒸 12h 0.0 0.0 0.0 0.0 977.7 142.5 153.1 1273.3 3-蒸2h 0.0 1986.2 0.0 1986.2 942.2 118.8 1037.2 2098.2 3-蒸4h 0.0 934.4 0.0 934.4 891.3 134.1 118.7 1144.1 3-蒸6h 0.0 308.5 0.0 308.5 939.2 154.7 179.2 1273.1 3-蒸8h 0.0 0.0 0.0 0.0 1085.1 151.7 163.4 1400.2 3-蒸10 h 0.0 0.0 0.0 0.0 974.1 154.3 164.1 1292.5 3-蒸12h 0.0 0.0 0.0 0.0 893.4 135.7 196.7 1225.8 表8电子鼻与各生物碱相关性分析 Table 8Correlation analysis between electronic nose data and alkaloids 类别 乌头碱 次乌头碱 新乌头碱 双酯型生物碱 苯甲酰新乌头 苯甲酰乌头 苯甲酰次乌头 单酯型生物碱 总量 原碱 原碱 原碱 总量 FCA1 0.966** -0.304 0.966** 0.009 -0.819° -0.906** -0.703 -0.950** FCA2 0.152 0.362 0.152 0.403 -0.282 -0.207 -0.007 -0.191 **在0.01水平(双侧)上显著相关,*在0.05水平(双侧)上显著相关 **Significant correlation is found on 0.01 level (bilateral), "Significant correlation is found on 0.05 level (bilateral) 17.0统计软件将电子舌“味”值与各生物碱含量变化进行相关性分析。取3批川乌及不同炮制时间样品电子舌数据,通过主成分分析法进行降维处理,得到 FAC1 和FAC2, 累计贡献率达85.07%,可认为 FAC1 与 FAC2 代表了样品电子舌特征。通过Pearson 相关性分析得出,电子舌FAC2与苯甲酰乌头原碱、单酯型生物碱总量均呈显著相关(P<0.01),与苯甲酰乌头原碱含量呈相关性(P<0.05), FAC1与各生物碱含量变化相关性不显著,结果见表9. 3 讨论 本实验采用电子鼻、电子舌仿生技术,分析了川乌及在不同炮制时间过程中“气”“味”的变化情况,实现了不同炮制程度的制川乌“气”“味”的数字化表征。实验研究显示,随着制川乌炮制程度的不断增加,电子鼻“气”变化呈现出一定规律性, 表9电子舌与各生物碱相关性分析 Table 9 Correlation analysis between electronic tongue data and alkaloids 类别 乌头碱 次乌头碱 新乌头碱 双酯型生物碱 苯甲酰新乌头 苯甲酰乌头 苯甲酰次乌头 单酯型生物碱 总量 原碱 原碱 原碱 总量 FCA1 0.153 0.287 0.153 0.330 -0.218 -0.218 0.448 -0.084 FCA2 0.745 0.456 0.745 0.683 -0.891** -0.823* -0.128 -0.758* **在0.01水平(双侧)上显著相关,*在0.05水平(双侧)上显著相关 “Significant correlation is found on 0.01 level (bilateral), "Significant correlation is found on 0.05 level (bilateral) 通过线性判别分析(LDA)法,可以明显区分出不同炮制程度的制川乌。电子舌可在一定程度上区分不同炮制程度川乌“味”变化,生品、蒸2h、蒸10h、蒸12h区分十分明显,可以明确区分出炮制程度,但在区分蒸4h、蒸6h、蒸8h之间炮制程度时区分不明显,这可能因为这3个样品炮制程度较为相近。 在电子鼻的气味变化与内在生物碱含量变化相关性分析中,研究表明电子鼻主成分 FAC1 与乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、单酯型生物碱总量等6类成分变化均呈显著相关(P<0.01),表明了川乌在炮制过程中内在生物碱的变化可能直接影响了电子鼻“气”的变化。根据有关文献对川乌的挥发性成分研究显示显11,川乌的挥发性成分中含有阿替生烯(atiserene),而阿替生烯是合成二帖生物碱的前体物质。在下一步研究中,拟将使用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)深入探讨川乌的挥发性成分组成,探讨其与电子鼻“气”、生物碱含量之间的关系。电子舌主成分二FAC2与苯甲酰新乌头原碱、单酯型生物碱总量均呈显著相关 (P<0.01),与苯甲酰乌头原碱含量呈相关性 (P<0.05),初步显示制川乌炮制过程中单酯型生物碱与制川乌炮制过程中“味”的变化的物质基础可能存在相关性,,为进一步探讨川乌炮制过程中“麻舌感”变化机制提供了新的研究方法。 本实验将电子鼻、电子舌仿生技术运用于制川乌炮制过程“气”“味”变化研究,将传统的“气”“味”信息进行了数字量化表征,并与制川乌炮制过程中内在有效成分变化进行了相关性分析,为中药炮制研究提供了一种新的思路。本课题组将在后续的研究中,拟构建制川乌电子鼻、电子舌响应值与 生物碱类成分变化数学模型[12],进一步探讨通过电子鼻、电子舌等仿生技术快速鉴别制川乌炮制程度的研究技术方法。 ( 参考文献 ) ( 中国药典 [S]. 一部 .2015. ) ( 秦语欣.川乌炮制过程中影响质量的因素分析及质量控制研究[D]. 北京:北京中医药医学,2016. ) ( [3] 毕 胜,谢若男,金传山.中药饮片炮制机制研究方法概述及展望[].安徽中医药大学学报,2019,38(6): 89-92 ) ( [4] 费程浩,戴 辉 , 苏 杭,等.电子鼻技术的研究进展 及其在中药行业中的应用[].世界中医药,2019, 14(2):257-262. ) ( [5] 付智慧,李淑军,刘 鹏,等.电子舌在中药研究中的应用现状及前景展望 [J].中成药,2016,38(11): 2454-2457. ) ( [6] 汪云伟,钟 恋,谭茂 兰 ,等.基于电子鼻技术的附子 (黑顺片)等级及产地的区分研究[].中成药,2014, 36(12):2565-2569. ) ( [7] 张新新,李 雨,纪玉佳,等.主成分-线性判别分析在中药药性识别中的应用[J].山东大学学报:医学版, 2012,50(1):143-146. ) ( 付智慧,李淑军,胡慧华,等.基于电子舌技术的豨莶 草炮制前后滋味比较 [J].中草药,20 1 7,48(4): 673-680. ) ( [9] 黄永亮.毒性中药半夏、川乌有关炮制与“麻舌”评价 的初刃 [D]. 成都 : 成都中医药大学,2011. ) ( [10]解达帅, 刘 玉杰,杨诗龙,等.基于“内外结合”分析 马钱子的炮制火候[].中国实验方剂学杂志,2016, 22(8): 1 -5. ) ( [11]张荣祥,赵德刚.黔产乌头挥发性化学成分的 GC-MS 分析[J].贵州农业科学,2011,39(12):55-58. ) ( [12]赵丽莹.基于电子鼻技术苦杏仁“走油”预警模型的建 立 [D] . 北京 : 北京 中 医药大学,2017. ) 实验摘要:研究制川乌炮制过程中各个阶段的气、味变化特征,表征制川乌炮制过程的气、味变化与内在有效成分之间的变化关系。实验方法:制作3批不同炮制时间的制川乌样品,使用电子鼻、电子舌对制川乌炮制过程中"气""味"变化进行检测,通过雷达图、线性判别分析法(LDA)、主成分分析(PCA)对获取的数据进行分析处理,并与制川乌炮制过程中生物碱类成分进行相关性分析。实验样品:川乌实验仪器:电子鼻、电子舌实验结果:电子鼻、电子舌可以区分出制川乌不同炮制程度的样品。通过Pearson相关性分析得出,电子鼻FAC1与苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、单酯型生物碱总量均呈显著相关性(P<0.01),电子舌FAC2与苯甲酰新乌头原碱、单酯型生物碱总量均呈显著相关(P<0.01),与苯甲酰乌头原碱含量呈相关性(P<0.05)。结论电子鼻、电子舌仿生技术可运用于制川乌炮制过程质量研究,为中药炮制研究提供了一种新思路。
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