NGS杂交捕获是针对感兴趣的基因组区域设计特异性探针,将其与基因组DNA进行杂交,富集目标基因组区域的DNA片段,而后利用高通量测序技术进行测序的检测方法。在此方法上引入自动化液体处理平台,可以大幅提高处理通量,将研究人员从重复繁杂的实验工作中解放出来。
NGS 杂交捕获自动化解决方案 NGS杂交捕获是针对感兴趣的基因组区域设计特异性探针,将其与基因组DNA进行杂交,富集目目基因组区域的 DNA片段,而后利用高通量测序技术进行测序的检测方法。在此方法上引入自动化液体处理平台,可以大幅提高处理通量,将研究人员从重复繁杂的实验工作中解放出来。 1.自动化流程 说明::1,标橙色部分为手工操作,因杂交涉及到浓缩冻干,无法实现自动化步骤,故前后步骤都用手工操作。 2, 1X杂交洗脱液的准备,手工配制 1X 杂交洗脱液,然后倒入LH-1808工作站的相应的试剂槽中即可。 2.在LH-1808全自动液体处理工作站自动化完成杂交捕获过程 步骤一:打开软件,选择“杂交捕获”程序; LH-1808全自动液体处理工作站 步骤二:以16个杂交后文库为例(最高可达48个杂交后文库),进行台面布置,如下图; 头库(1mL单通道,8通道250头) 24孔适配器(捕获磁珠, Post-PCR 式剂,纯化磁珠) 试剂槽(杂交洗涤buffer, TE,酒精) PCR 仪 头库(抓手) 96孔深孔板(磁珠纯化板) 温控器(65℃ wash buffer1,stringent washbuffer) 1mL 吸头 PCR 适配器 (PCR反应板) 磁力架 250uL 吸头 PCR适配器(杂交样本板) 振荡器 250uL 吸头 250uL 吸头 废液槽 步骤三:点击”Start”运行,程序运行。 3. LH-1808 全自动液体处理工作站配件及作用 配件名称 数量 规格参数 作用 1mL 单通道移液头 1 10uL CV<3% 捕获磁珠、纯化磁珠吹打混匀,分装,Post-PCR mix配制 250uL8通道移液头 1 2uLCV<5% 加样、杂交洗脱,磁珠纯化, 抓手 1 转移 PCR 板至 PCR仪和返回,转移深孔板至磁力架上和返回 24孔适配器 1 4*61.5mL/2.0mLEP 管 放置磁珠, Post-PCR 试剂 振荡器 1 200-2000rpm 样本与磁珠混匀 PCR适配器 1 96 孔 放置 PCR板 试剂槽 1 7道 放置杂交洗涤液,70%酒精和洗脱液 磁力架 1 96环型 捕获磁珠 PCR仪 1 温度孵育反应 温控器 1 4-75℃ 放置65℃wash bufferl, stringent washbuffer LH-1808全自动液体处理工作站帮助用户实现 NGS 杂交捕获自动化流程,不仅保证了样本结果的重复性和均一性,还节省了人力成本,缩短了检测时间,非常适合高通量测序技术发展的需求。 NGS杂交捕获是针对感兴趣的基因组区域设计特异性探针,将其与基因组DNA进行杂交,富集目标基因组区域的DNA片段,而后利用高通量测序技术进行测序的检测方法。在此方法上引入自动化液体处理平台,可以大幅提高处理通量,将研究人员从重复繁杂的实验工作中解放出来。1. 自动化流程说明:1,标橙色部分为手工操作,因杂交涉及到浓缩冻干,无法实现自动化步骤,故前后步骤都用手工操作。2,1X杂交洗脱液的准备,手工配制1X杂交洗脱液,然后倒入LH-1808工作站的相应的试剂槽中即可。2. 在LH-1808 全自动液体处理工作站自动化完成杂交捕获过程步骤一:打开软件,选择“杂交捕获”程序;步骤二:以16个杂交后文库为例(可达48个杂交后文库),进行台面布置,如下图;步骤三:点击”Start”运行,程序运行。 3. LH-1808 全自动液体处理工作站配件及作用LH-1808 全自动液体处理工作站帮助用户实现NGS 杂交捕获自动化流程,不仅保证了样本结果的重复性和均一性,还节省了人力成本,缩短了检测时间,非常适合高通量测序技术发展的需求。
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