上皮细胞中DNA测序检测方案(移液工作站)

NGS 杂交捕获自动化解决方案 NGS杂交捕获是针对感兴趣的基因组区域设计特异性探针，将其与基因组DNA进行杂交，富集目目基因组区域的 DNA片段，而后利用高通量测序技术进行测序的检测方法。在此方法上引入自动化液体处理平台，可以大幅提高处理通量，将研究人员从重复繁杂的实验工作中解放出来。 1.自动化流程 说明：：1，标橙色部分为手工操作，因杂交涉及到浓缩冻干，无法实现自动化步骤，故前后步骤都用手工操作。 2， 1X杂交洗脱液的准备，手工配制 1X 杂交洗脱液，然后倒入LH-1808工作站的相应的试剂槽中即可。 2.在LH-1808全自动液体处理工作站自动化完成杂交捕获过程 步骤一：打开软件，选择“杂交捕获”程序； LH-1808全自动液体处理工作站 步骤二：以16个杂交后文库为例(最高可达48个杂交后文库)，进行台面布置，如下图； 头库(1mL单通道，8通道250头) 24孔适配器(捕获磁珠， Post-PCR 式剂，纯化磁珠) 试剂槽(杂交洗涤buffer， TE，酒精) PCR 仪 头库(抓手) 96孔深孔板(磁珠纯化板) 温控器(65℃ wash buffer1，stringent washbuffer) 1mL 吸头 PCR 适配器 (PCR反应板) 磁力架 250uL 吸头 PCR适配器(杂交样本板) 振荡器 250uL 吸头 250uL 吸头 废液槽 步骤三：点击”Start”运行，程序运行。 3. LH-1808 全自动液体处理工作站配件及作用 配件名称 数量 规格参数 作用 1mL 单通道移液头 1 10uL CV<3% 捕获磁珠、纯化磁珠吹打混匀，分装，Post-PCR mix配制 250uL8通道移液头 1 2uLCV<5% 加样、杂交洗脱，磁珠纯化， 抓手 1 转移 PCR 板至 PCR仪和返回，转移深孔板至磁力架上和返回 24孔适配器 1 4*61.5mL/2.0mLEP 管 放置磁珠， Post-PCR 试剂 振荡器 1 200-2000rpm 样本与磁珠混匀 PCR适配器 1 96 孔 放置 PCR板 试剂槽 1 7道 放置杂交洗涤液，70%酒精和洗脱液 磁力架 1 96环型 捕获磁珠 PCR仪 1 温度孵育反应 温控器 1 4-75℃ 放置65℃wash bufferl， stringent washbuffer LH-1808全自动液体处理工作站帮助用户实现 NGS 杂交捕获自动化流程，不仅保证了样本结果的重复性和均一性，还节省了人力成本，缩短了检测时间，非常适合高通量测序技术发展的需求。 NGS杂交捕获是针对感兴趣的基因组区域设计特异性探针，将其与基因组DNA进行杂交，富集目标基因组区域的DNA片段，而后利用高通量测序技术进行测序的检测方法。在此方法上引入自动化液体处理平台，可以大幅提高处理通量，将研究人员从重复繁杂的实验工作中解放出来。1.       自动化流程说明：1，标橙色部分为手工操作，因杂交涉及到浓缩冻干，无法实现自动化步骤，故前后步骤都用手工操作。2，1X杂交洗脱液的准备，手工配制1X杂交洗脱液，然后倒入LH-1808工作站的相应的试剂槽中即可。2.       在LH-1808 全自动液体处理工作站自动化完成杂交捕获过程步骤一：打开软件，选择“杂交捕获”程序；步骤二：以16个杂交后文库为例（可达48个杂交后文库），进行台面布置，如下图；步骤三：点击”Start”运行，程序运行。    3.       LH-1808 全自动液体处理工作站配件及作用LH-1808 全自动液体处理工作站帮助用户实现NGS 杂交捕获自动化流程，不仅保证了样本结果的重复性和均一性，还节省了人力成本，缩短了检测时间，非常适合高通量测序技术发展的需求。