银耳中米酵菌酸检测方案(其它色谱仪及分离设备)

月旭科技 银耳中米酵菌酸的测定 适用范围 适用于银耳中米酵菌酸的检测。（本实验样品采用银耳） 参考标准《GB 5009.189-2016 食品安全国家标准 食品中米酵菌酸的测定》 溶液的配置 米酵菌酸铵盐标准工作液： 精确称量0.1mg米酵菌酸铵盐样品，用甲醇定容至10mL，即0.01mg/mL储备液。 2）流动相B：pH=2水：水用冰乙酸调pH至2.5。 3）洗脱液：2%甲酸甲醇：2mL甲酸用甲醇稀释并定容至100mL。 4）提取液：80mL甲醇，加入1mL氨水，加水定容至100mL。 提取步骤 精确称取2g样品置于50mL的螺口尖底离心管 加入20mL提取液（2-4），振荡混匀2min，超声20min，离心5000rpm下5min，移取上清液5mL待净化。 SPE净化步骤 SPE柱：月旭Welchrom®P-SAX，规格：60mg/3mL。 活化：依次5mL甲醇，5mL水活化，弃去； 上样：待净化液全部上样，控制流速，不宜过快，弃去； 淋洗：依次5mL水，5mL甲醇，弃去； 洗脱： 精确移取6mL 2%甲酸甲醇洗脱，抽干，收集于15mL离心管中； 复溶：洗脱液于40℃水浴氮吹干，用甲醇定容至1mL，经0.22μm有机滤头，供液相检测。 注意事项 加标水平：在2g样中加入200μL 0. 01mg/mL的盐酸雷洛西芬标准工作液，加标水平1mg/kg，机度数0.5mg/L。 色谱条件 色谱柱：月旭Ultimate®XB- C18，4.6×250mm,5μm 流动相：A-甲醇，B-pH=2.5的水（梯度A:B=75：25） 流速：1.000mL/min 柱温：30℃ 进样量：20μL 检测波长：267nm 7、色谱图或者加标回收率结果 图1. 米酵菌酸铵盐0.5mg/L标准图谱 序号 峰名称 保留时间 峰面积 峰高 相对峰面积 拖尾因子 不对称度 分离度 塔板数 min mAU*min mAU % (EP) (EP) (EP) 1 米酵菌酸铵盐 20.462 0.484 1.025 100.00 0.91 0.91 n.a. 12217 图2. 银耳空白过柱图谱 图3. 银耳样加标1mg/kg过柱图谱 表1.加标回收表 名称 加标水平mg/kg 平均回收率% RSD%（n=2） 米酵菌酸铵盐 1.0 98 2.54 8、相关产品信息 货号 名称 规格 00524-20016 SPE小柱 Welchrom® P-SAX,60mg/3ml,50pk 00837-05006 离心管 Welchrom® 一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装,未灭菌，50mL，50/包 00837-05003 离心管 Welchrom® 一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装,灭菌，15mL，25/包 00824-31001 固相萃取装置 Welch 固相萃取装置，12位方缸 00821-32291 盖子+垫片 Welchrom® 预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖 中心孔6mm 100pk 00821-40927 样品瓶 Welchrom® 2ml 透明短螺纹广口样品瓶 带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk 00201-31043 液相色谱柱 Ultimate®XB- C18 ，4.6×250mm,5μm 00802-02201 针头式过滤器 Welchrom® 进口NY,13mm*0.22μm,100pk 声明:除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168号Tel:400-810-6969 邮编：321000E-mail:lingyuyu@welchmat.com 适用范围PART 01适用于银耳中米酵菌酸的检测。（本实验样品采用银耳）参考标准：《GB 5009.189-2016 食品安全国家标准 食品中米酵菌酸的测定》 提取步骤PART 02精q称取2g样品置于50mL的螺口尖底离心管，加入20mL提取液（配制方法见备注），振荡混匀2min，超声20min，离心5000rpm下5min，移取上清液5mL待净化。 注：提取液的配制：80mL甲醇，加入1mL氨水，加水定容至100mL。 SPE净化步骤PART 03SPE柱：月旭Welchrom®P-SAX，规格：60mg/3mL；活化：依次5mL甲醇，5mL水活化，弃去；上样：待净化液全部上样，控制流速，不宜过快，弃去；淋洗：依次5mL水，5mL甲醇，弃去；洗脱：精q移取6mL 2%甲酸甲醇洗脱，抽干，收集于15mL离心管中；复溶：洗脱液于40℃水浴氮吹干，用甲醇定容至1mL，经0.22μm有机滤头，供液相检测。 色谱条件PART 04色谱柱：月旭Ultimate®XB-C18，4.6×250mm,5μm；流动相：A-甲醇，B-pH=2.5的水（梯度A:B=75：25）；流速：1.000mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL；检测波长：267nm。 谱图加标回收率PART 05相关产品信息PART 06