环境样品中羰基-DNPH 衍生物检测方案(工作站及软件)

应用简报 Agilent环境Trusted Answers 应用 Agilent InfinityLab Poroshell 120色谱柱实现现代化 HPLC 方法 使用 Poroshell 120 SB-C18 色谱柱分析羰基-DNPH 衍生物，样品通量提高三倍 Rong-jie Fu安捷伦科技(上海)有限公司 在传统的 5 pm 色谱柱上开发羰基二硝基苯肼 (DNPH)衍生物的原始分析方法，然后将该方法转移并扩展应用于不同粒径的 Agilent InfinityLab Poroshell 120 SB-C18色谱柱，其中包括4、2.7和1.9 um 色谱柱。将该方法从较大的全多孔颗粒填料色谱柱扩展至较小的表面多孔色谱柱后，运行时间和溶剂消耗显著减少。 ( 羰基化合物是通常存在于空气和土壤中的一类有害物质。美国、欧盟、中国和日本 的许多法规都要求控制不同环境样品中羰基化合物的含量1. 2 1。由于羰基化合物具有高挥发性和反应活性，在液相色谱分析 之前， 通 常会转化为 DNPH 衍生物。 ) ( 在本应用简报中，我们将采用 Agilent ZORBAX StableBond C18， 4.6× 2 50 mm， 5 um 色谱柱分析16种羰基-DNPH衍生物的原始方法转移到了相同规格的4 umPoroshell 120 SB-C18 色谱柱上。然后将 该方法扩展到了不同粒径的色谱柱(包括2.7 和1.9 um)上，分离度保持不变。运 行时间和溶剂消耗大幅减少。 ) ( 试剂与化学品 ) ( 所有试剂均为 HPLC 级或更高等级。 ) ( HPLC 级及腈购自 J. T . Baker (Center Valley， PA， US A )。水经由 ELGA PURELAB Chorus 系统 (High Wycombe，UK)纯化。 标准储备液购自安谱实验科技公司(中国 上海)。用乙腈稀释储备液至最终浓度为10 ug/m L ， 制得混标溶液。 ) 设备与材料 仪器 ( 色谱柱进口： Agi l ent InfinityLabQuick Connect 快速连接液相色谱接头(部件号5067-5965) ) ( 色谱柱出口： Agi l ent In f inityLab Quick Turn 液相色谱接头 ( (部件号 5067-5966) ) ( 安捷伦样品瓶，螺口，棕色，带书 写签，经认证，2mL(部件号5182- 0716) ) ( 安捷伦固定螺口盖，蓝色，带PTFE/红色硅胶隔垫(部件号5190-7024) ) ( Agilent InfinityLab 溶剂瓶，棕色， 1 000mL ( 部件号9301-6526) ) ( Agilent InfinityLab Stay Safe 溶剂瓶 安全盖， GL45，3口， 1个放空阀(部件号5043-1219) ) ( Eppendorf 移液管和重复用移液器 ) 表1.本应用简报中分析的目标羰基-DNPH 化合物 序号 名称 CAS 储备液浓度(pg/mL) 1 乙醛-DNPH 1019-57-4 100 2 丙酮-DNPH 1567-89-1 100 3 丙烯醛-DNPH 888-54-0 100 4 苯甲醛-DNPH 1157-84-2 100 5 2-丁酮-DNPH 958-60-1 100 6 丁醛-DNPH 1527-98-6 100 7 丁烯醛-DNPH 1527-96-4 100 8 环己酮-DNPH 1589-62-4 100 9 甲醛-DNPH 1081-15-8 100 10 己醛-DNPH 1527-97-5 100 11 异丁烯希-DNPH 5077-73-6 100 12 丙醛-DNPH 725-00-8 100 13 邻甲苯甲醛-DNPH 间甲苯甲醛-DNPH 1773-44-0 2880-05-9 100100 14 对甲苯甲醛-DNPH 2571-00-8 100 15 戊醛-DNPH 2057-84-3 100 ( Agilent 1290 Infinity ll 高速泵 (G7120A) ) ( Agilent 1290 Infinity I I Multisampler (G7167B) ) ( Agilent 1290 Infinity ll 高容量柱温箱 (G7116B) ) ( Agilent 1290 I nfinity II DAD (G7117B) ) ( Agilent OpenLab CDS， C .01.07 版 ) 色谱柱 流动相组成 流速 (mL/min) 进样量(pL) 柱温箱(℃) 二极管阵列检测器 Agilent ZORBAX StableBond C18， 4.6×250 mm，5 pm (部件号880975-902) 水/ACN： 0-8 min， 57% ACN，8-10min， 57%至75%ACN，10-17 min， 75% ACN 1.5 5 50 360 nm， 5Hz Agilent InfinityLab Poroshell 120 SB-C18，4.6×250mm，4pm(部件号680970-902) Agilent InfinityLab Poroshell 120 SB-C18， 4.6×150 mm，2.7 pm(部件号683975-902) 水/ACN： 0-5 min， 57% ACN，5-6 min，57%至75%ACN，6-10min， 75% ACN 1.5 3 50 360 nm， 40 Hz Agilent InfinityLab Poroshell 120 SB-C18，3.0×100 mm，1.9 pm (部件号685675-302) 水/ACN： 0-3.3 min，57%ACN，3.3-4 min，57%至75%ACN，4-6.7 min， 75% ACN 0.64 0.85 50 360 nm， 80 Hz 如图1B所示，使用全多孔颗粒填料ZORBAX StableBond C18，4.6×250 mm，5pm色谱柱，在14分钟内完成对16种 羰基-DNPH 衍生物的原始分离。图1A展示了在 InfinityLab Poroshell 120 SB-C18，4.6×250 mm， 4 um 色谱柱上采用相同的液相色谱方法分析同一样品获得的结果。与具有相同固定相的5 um 全多孔颗粒填 料色谱柱相比，4 um表面多孔颗粒填料色谱柱将效率提高了一倍。结果表明，在不改变分析方法的情况下，使用4um表面多孔颗粒填料色谱柱可以提高分离度。 图1.比较使用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 SB-C18 色谱柱和 ZORBAX StableBond C18 色谱柱获得的色谱图 图2展示了在4、2.7和1.9 um表面多孔颗粒填料色谱柱之间的方法可扩展性。3种色谱柱的柱长与粒径之比 (L/dp) 相似。这使得分离可以在不同粒径的色谱柱 之间转移。使用小粒径和短色谱柱的优点包括缩短运行时间、、节省溶剂。相比于SB-C18 250 mm， 4 um 方法，使用2.7 um色谱柱时分析速度提高了40%，所用流 动相减少了41%，同时分离度不变。与250 mm 色谱柱相比，1.9 pm 色谱柱的分析速度提高了61%，所用流动相减少83%。结果汇总于表3中。 图2.在4、2.7和1.9 pm Agilent InfinityLab Poroshell 120 SB-C18 色谱柱之间进行方法扩展获得的色谱图 表3.使用不同规格色谱柱的分析结果 色谱柱规格 L/dp 运行时间 溶剂消耗 4.6×250 mm， 4 pm 62.5 17 min 25.5mL 4.6×150mm， 2.7 pm 55.6 10 min (-41%) 15mL (-41%) 3×100 mm， 1.9 um 52.6 6.7 min (-61%) 4.3 mL (-83%) ( 使用传统色谱柱(例如ZORBAX StableBond C18， 5 pm色谱柱)实现的分 离， 可以使用相同规格的 Poroshell 120 SB-C18， 4 um色谱柱进行改进。由于选 择性相同，该方法可以轻松扩展至不同的 颗粒填料系列 (ZO R BAX 和 Poroshell) 和粒径。采用小颗粒的色谱柱能够采用更短的柱长，从而显著减少运行时间和溶剂消耗。 ) ( 1. Determination of Carbonyl Compounds by High PerformanceLiquid Chromatography (HPLC). EPA Method 831 5 a，Environmenta/ Protection Agency， Washington， D C， USA， 1996 ) Soil and Sediment 一 Determinationof Carbonyl Compounds -High Performance LiquidChromatography. HJ 997-2018，Standards of EnvironmentalProtection， China， 2018 查找当地的安捷伦客户中心：www.agilent.com/chem/contactus-cn 免费专线： 800-820-3278，400-820-3278(手机用户) 联系我们： LSCA-China_800@agilent.com 在线询价：www.agilent.com/chem/erfq-cn www.agilent.com DE.194837963 本文中的信息、说明和指标如有变更，恕不另行通知。 2020年3月9日， 中国出版 5994-1809ZHCN 在传统的 5 μm 色谱柱上开发羰基二硝基苯肼 (DNPH) 衍生物的原始分析方法，然后将该方法转移并扩展应用于不同粒径的 Agilent  InfinityLab Poroshell 120 SB-C18 色谱柱，其中包括 4、2.7 和 1.9 μm 色谱柱。将该方法从较大的全多孔颗粒填料色谱柱扩展至较小的表面多孔色谱柱后，运行时间和溶剂消耗显著减少。