茶叶中百草枯和敌草快检测方案(液相色谱仪)

预处理 应用简报 Agilent食品检测与农业Trusted Answers 茶叶中百草枯和敌草快的分析 Agilent Bond Elut CBA SPE 和 LC/MS/MS 方法 作者 Xia Yana安捷伦科技有限公司 许多国家/地区都对茶叶中的百草枯和敌草快提出了广泛的监测和监管要求1-2。本应用简报开发了一种采用 Agilent Bond Elut CBA 的简单样品前处理工作流程以及 LC/MS/MS方法，该方法使用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱对百草枯和敌草快进行分析。 Bre Bre 敌草快 百草枯LogP： -4.6 LogP： -4.5 仪器与材料 Agilent 1290 Infinity II LC 配备安捷伦喷射流电喷雾离子源的Agilent 6470A 三重四极杆液质联用系统 Agilent Bond Elut CBA LRC柱，500 mg， 10mL (部件号12113037) Agilent Vac Elut 20 真空萃取装置(部件号12234101) HPLC条件 色谱柱 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z， 2.1×100 mm，2.7 pm， 部件号685775-924 柱温 35°C 自动进样器温度 15°C 进样量 2pL A) 50 mmol/L甲酸铵水溶液， pH=3 流动相 B)0.1%甲酸的乙腈溶液 流速 0.5mL/min 时间(min) B% 0 95 1 95 2 90 2.5 75 5 55 6 95 停止时间 8.5 min 质谱参数 电离模式 正离子 加速电压 3 气体温度 325℃ 气体流速 10L/min 雾化器 45 psi 鞘气温度 400°℃ 鞘气流速 11 L/min 毛细管 3000V 名称 保留时间 (min) 离子对 (m/z) 碰撞能量 (eV) 敌草快 5.17 183→157 24 183→130 40 敌草快-d4 5.16 188-156 20 百草枯 4.88 186→171 20 171→77 45 百草枯-d8 4.87 194-179 20 称取 1.0g均质茶叶粉末，置于50mL离心管中，并加入标准溶液。 分析物储备液、样品前处理和分析所用的所有样品瓶必须为塑料瓶。绿茶空白样品购自本地超市，并将其研磨成粉末。将5mL水加入1g茶叶粉末中形成匀浆。SPE 净化之前的预处理过程如图1所示。考察了不同的萃取溶剂，结果表明，含5% FA 的 Me0H/H20 (1：1)对百草枯和敌草快的萃取效率最佳(图2)。加入EDTA溶液(最终浓度约为20 mmol/L)以掩蔽金属离子，否则在 SPE 过程中，它们将与分析物发生竞争(图3)。 加入5mL水并静置15分钟；加入5mL甲醇/水/FA 溶液 (50：45：5)并涡旋混合1分钟。 在80℃水浴中加热样品15分钟； 然后再次涡旋混合1分钟后冷却。 在4000 rpm 的转速下离心10分钟，移取1mL上清液，用 8mL水和1 mL 200 mmol/L 的 EDTA 溶液进行稀释。 使用 5% NH，OH水溶液将样品的 pH调节为7.0，样品现可用于 SPE。 SPE 净化： Agilent Bond Elut CBA LRC 柱， 500 mg， 10 mL (部件号12113037) 活化/平衡 图 1. 采用 Agilent Bond Elut CBA SPE 的绿茶样品前处理流程 结果与讨论 按与茶叶相对应的加标浓度(2、10、20、40、100、200和400 ng/g)将标准溶液加标至 MeOH/H，0 (1：1)中以配制溶剂标准曲线。将含有敌草草-D4和百草枯-D8的内标溶液以100 ng/g 的浓度加标至茶叶样品中。如图4所示，具有两性离子键合相的 InfinityLab Poroshell 120HILIC-Z 色谱柱对这两种极性农药均可以获得良好的峰形。通过溶剂加标 IS校证标准曲线，在两种QC 浓度下，对该方法进行了验证，结果如表1所示。 结论 本研究展示了一种采用 Agilent Bond ElutCBA SPE 的简单样品前处理工作流程，用于对茶叶中的百草枯和敌草快进行LC/MS/MS分析。所有回收率数据均高于80%， RSD 低于 10%。 1. 中国国家标准 GB2763.1-2018 2. European Commission Regulation(EU)， EU Pesticides database.https：//ec.europa.eu/food/plant/pesticides/eu-pesticides-database/public/?event=pesticide.residue.selection&language=EN www.agilent.com/chem 本文中的信息、说明和指标如有变更，恕不另行通知。 ( @安捷伦科技(中国)有限公司，2019 ) ( 2019年11月7日，中国出版 ) 图2.当茶叶中加标浓度为400ng/g时，采用不同的萃取溶剂，茶叶中敌草快和百草枯的归一化萃取效率(n=2) 图3.当茶茶中加标浓度为 200 ng/g时，在添加和不添加 EDTA 的情况下，经预处理和 SPE 净化后，茶叶中敌草快和百草枯的绝对回收率(n=2) 图4.当加标浓度为 20 ng/g 时， SPE 净化后茶叶中百草枯和敌草快的色谱图 表1.绿茶中加标浓度为 20 ng/g 和200 ng/g时，敌草快和百草枯的方法定量结果(n=4) 线性范围(ng/g) R2 20 ng/g 200 ng/g 回收率(%) RSD (%) 回收率(%) RSD (%) 敌草快 2-400 0.991 88.0 5.0 93.1 4.2 百草枯 10-400 0.998 110.9 8.6 102.4 3.8 许多国家/地区都对茶叶中的百草枯和敌草快提出了广泛的监测和监管要求。本应用开发了一种采用 Agilent Bond Elut CBA 的简单样品前处理工作流程以及 LC/MS/MS方法，该方法使用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱对百草枯和敌草快进行分析。