精品仪器领航未来 3 L-色氨酸的比旋度测定 1前言 L-色氨酸是人体和动物所必需的8种必需氨基酸之一,不能通过自身合成,只能通过食物来摄取。L-色氨酸又被称为第二必需氨基酸,目前广泛应用于医药、食品、饲料等方面。随着生产技术的不断进步,微生物法替代了传统的化学合成法和蛋白质水解法,占据了市场主导地位,主要产地集中在欧美、日本等少数地方。但目前在产业化生产L-色氨酸的过程中,均会存留少量杂质,因此下游的分离纯化工艺非常重要。 比旋光度是旋光物质的重要物理常数,可以用来检测 L-色氨酸的纯杂程度,进而为提升L-色氨酸的生产效率提供参考。 2仪器与试剂 2.1仪器 上海佳航--全自动旋光仪Digipol-P630 3实验方法 3.1实验步骤 (1)色氨酸溶液 精准称取约1.0g色氨酸,加入适量水,在水浴(60℃)中温热溶解,定容至100mL,制成每1mL约含10mg的溶液。 (2)空白测试 将控温旋光管用三级水清洗3次以上,然后加满水至管路中无气泡。将旋光管水平放置于旋光仪中,连接温控线,设置温度20℃,等待仪器温度稳定后,点击“清零” (3)样品测试 将控温旋光管取出,用色氨酸溶液清洗3次以上,然后加满溶液至管路中无气泡。等待仪器温度稳定后,点击“试”。 3.2仪器参数 样品名称:色氨酸 测试次数:3 样品质量:0.99952g 显示位数:3 试管长度: 10cm 结果类型:比旋度 温度:20℃ 测量准确:高精度测量 4结果与讨论 4.1实验结果 编号 测试温度 比旋度 平均值 1 20℃ -32.085 -32.11 -32.135 -32.135 2 -32.135 -32.035 -32.135 4.2讨论 两次平行的结果均符合药典中对于L-色氨酸比旋度的要求(-30.0°~-32.5°),此实验能够为L-色氨酸的纯度测定提供一定的依据。 ( 参考文献 ) ( [1]陈荣庆,刘伟,等.L-色氨酸的研究进展[J].安徽农业科学,2014,(14):4438-4440,4443.[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].二部.北京:中国医药科技出版社,2015:388. ) 注意事项 1、本次实验所用试剂和水,在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和三级水。 2、色氨酸略溶于水(1.1g/100mL,25℃),建议在水浴中温热溶解。建议先加入50-60mL的水,搅拌溶解大部分样品,再添加少量水至样品全部溶解,再于冰水中冷却至20℃。最后将样品液和清洗液全部转移至100mL容量瓶中,定容。也可使用超声波仪器加速溶解。 3、溶液配制好后建议在 30min 内测试完毕。 4可、通过旋光管两侧的透光玻璃孔观察管中是否有气泡,同时检查并擦净玻璃上的水渍和污迹。 5、为旋光管更换样品液时建议将仪器的温控关闭。操作方法是将参数设置里的“温度"选项关闭。 L-色氨酸的比旋度测定 1 前言 L-色氨酸是人体和动物所必需的 8 种必需氨基酸之一,不能通过自身合成,只能通过食物来摄取。L-色氨酸又被称为第二必需氨基酸,目前广泛应用于医药、食品、饲料等方面。随着生产技术的不断进步,微生物法替代了传统的化学合成法和蛋白质水解法,占据了市场主导地位,主要产地集中在欧美、日本等少数地方。但目前在产业化生产 L-色氨酸的过程中,均会存留少量杂质,因此下游的分离纯化工艺非常重要。比旋光度是旋光物质的重要物理常数,可以用来检测 L-色氨酸的纯杂程度,进而为提升L-色氨酸的生产效率提供参考。2 仪器与试剂 2.1 仪器上海佳航--全自动旋光仪Digipol-P630 3 实验方法 3.1 实验步骤(1) 色氨酸溶液精准称取约 1.0g 色氨酸,加入适量水,在水浴(60℃)中温热溶解,定容至 100mL, 制成每 1 mL 约含 10mg 的溶液。(2) 空白测试将控温旋光管用三级水清洗 3 次以上,然后加满水至管路中无气泡。将旋光管水平放置于旋光仪中,连接温控线,设置温度 20℃,等待仪器温度稳定后,点击“清零”。(3) 样品测试将控温旋光管取出,用色氨酸溶液清洗 3 次以上,然后加满溶液至管路中无气泡。等待仪器温度稳定后,点击“测试”。3.2 仪器参数 样品名称:色氨酸测试次数:3样品质量:0.99952g显示位数:3试管长度:10cm结果类型:比旋度温度:20℃测量准确:高精度测量4 结果与讨论 4.1 实验结果 编号测试温度比旋度平均值 1 20℃-32.085 -32.11-32.135-32.135 2-32.135-32.035-32.1354.2 讨论两次平行的结果均符合药典中对于 L-色氨酸比旋度的要求(-30.0°~-32.5°),此实验能够为L-色氨酸的纯度测定提供一定的依据。参考文献 [1] 陈荣庆,刘伟,等.L-色氨酸的研究进展[J].安徽农业科学,2014,(14):4438-4440,4443.[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].二部.北京:中国医药科技出版社,2015:388.注意事项 1、本次实验所用试剂和水,在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和三级水。2、色氨酸略溶于水(1.1g/100mL,25℃),建议在水浴中温热溶解。建议先加入 50-60 mL 的水,搅拌溶解大部分样品,再添加少量水至样品全部溶解,再于冰水中冷却至 20℃。最后将样品液和清洗液全部转移至 100mL 容量瓶中,定容。也可使用超声波仪器加速溶解。3、溶液配制好后建议在 30min 内测试完毕。4、可通过旋光管两侧的透光玻璃孔观察管中是否有气泡,同时检查并擦净玻璃上的水渍和污迹。5、为旋光管更换样品液时建议将仪器的温控关闭。操作方法是将参数设置里的“温度” 选项关闭。