饲料中地西泮检测方案(固相萃取仪)

LabTech 固相萃取-液相色谱法测定饲料中的地西泮 前言 地西泮别名安定、苯并二氮卓、苯甲二氮卓，主要用于人和动物镇定催眠及癫痫的治疗。由于，地西泮添加到饲料中可以提高动物的生长速度和减少饲料用量，故部分养殖企业为谋取更多效益，在饲料中非法添加地西泮，我国农业部与质量监察部门已经严格禁止 在饲料中添加地西泮。地西泮具有蓄毒性，在饲料中长期添加，会导致其在肌肉组织中富集，从而进一步危害消费者健康，所以建立一种高效、快速的定量流程及检测方法尤为重要。本文使用SPE1000 全自动固相萃取系统对饲料中的地西泮进行固相萃取富集，用高效液相色谱仪进行检测。 本文参考《T/CFIAS003-2019 饲料中地西泮的测定高效液相色谱法》采用 SPE1000 全自动 固相萃取系统，测定地西泮的回收效果，实验证明，地西泮回收率在86.8%~99.4%之间，重现性 RSD为5.9%，回收率和重现性良好，说明 SPE1000全自动固相萃取系统可靠、稳定，适用于饲料中的地西泮样品前处理。 关键词：地西泮， SPE1000 全自动固相萃取系统，高效液相色谱法，饲料 1实验过程 1.1仪器与试剂 SPE1000全自动固相萃取系统(莱伯泰科公司)； LC600高压高效液相色谱仪(莱伯泰科公司)； 地西泮，1000mg/L，坛墨质检； 甲醇(色谱纯)； 甲酸(分析纯)； 氨水(分析纯)； PCX混合型阳离子交换柱，((60mg/3mL莱伯泰科)； 实验用水：超纯水。 传真：010-80486354(总部)/64974268(市场) 取1mL地西泮标品于10mL容量瓶中，甲醇定容，配置成浓度为 100ug/mL 的标准储备液。 取 20pL的标准储备液，用甲醇定容到1mL， 配制成 2 ug/mL 标准工作液。 1.3试验方法 1.3.1样品准备 将饲料样品打碎，称取2.0g样品，加入400pL的标准工作液，使饲料中地西泮的加标浓度为 0.4mg/kg， 加入20mL乙腈，涡旋 5min，超声20min， 5000rad/min 离心 10min，取5mL上清液，待固相萃取处理。 同时做样品空白。 1.3.2固相萃取及浓缩 按照图1所示的方法进行 SPE1000方法编辑，并加载方法到相应通道，进行样品的固相萃取。收集洗脱液到收集瓶中，中吹浓缩至1mL以下，甲醇定容至 1mL， 待测。 图1地西泮的 SPE 富集方法 1.3.3HPLC测定水中地西泮 色谱柱： C18， 5um， 4.6nm*150mm； 波 长：230nm； 流 速：1.0mL/min； 进样量：20uL； 流动相：甲醇：水=65：35 V/V 北京莱伯泰科仪器有限公司 ( 电 话 ： 01 0-804 86450 (总部 )/ 649 73 11 9(市 场) ) 传真：010-80486354(总部)/64974268(市场) 2.1.1地西泮标品色谱图 图2为取 100pL的标准工作液，用甲醇：水(8：2)定容到 1.0mL 检测(200ug/L)，地西泮标品出峰色谱图，出峰时间为11.88min。 图2地西泮标品出峰色谱图 2.1.2饲料中地西泮加标样品色谱图 图3地西泮加标样品出峰色谱图，出峰时间为 11.90min。 图3地西泮加标样品出峰色谱图 北京莱伯泰科仪器有限公司 ( 电 话 ： 01 0-804 86450 (总部 )/ 649 73 11 9(市 场) ) 传真：010-80486354(总部)/64974268(市场) 2.1.3饲料中地西泮样品色谱图 图4为空白样品色谱图。 图4空白样品色谱图 2.2 HPLC测定饲料中地西泮回收率 HPLC测定饲料中地西泮回收率计算结果如下表，萃取富集后的回收率在 86.8%~99.4%之间，重现性 RSD 为 5.9%。 表1饲料中地西泮的加标回收率(加标量0.4mg/kg) 名称 回收率(%) 平均值 RSD(%) 编号 1 2 3 4 5 6 (%) 地西泮 86.8 89.5 89.7 99.4 96.3 99.4 93.5 5.9 3结论与讨论 1 254nm 和 230nm 的波长均可检测到地西泮，但地西泮在 230nm 波长下，信号响应最高。 2 SPE1000全自动固相萃取系统净化的样品，其回收率和重现性良好，，.工作效率高，可应用于此类样品的前处理方法中。 参考文献 T/CFIAS003-2019饲料中地西泮的测定高效液相色谱法 撰稿人徐加乐 审稿人 JJ DCF SLP WWW 北京莱伯泰科仪器有限公司 ( 地址 ：北京空港 工 业区 电 话 ： 01 0-804 86450 (总部 )/ 649 73 11 9(市 场) 传真 ： 010 - 8 0 4 86354( 总 部 )/6 4 974268( 市 场 ) ) Your Lab， Our Tech 地址：北京空港工业区Your Lab， Our Techwww.labtechgroup.com 地西泮别名安定、苯并二氮卓、苯甲二氮卓，主要用于人和动物镇定催眠及癫痫的治疗。由于，地西泮添加到饲料中可以提高动物的生长速度和减少饲料用量，故部分养殖企业为谋取更多效益，在饲料中非法添加地西泮，我国农业部与质量监察部门已经严格禁止在饲料中添加地西泮。地西泮具有蓄毒性，在饲料中长期添加，会导致其在肌肉组织中富集，从而进一步危害消费者健康，所以建立一种高效、快速的定量流程及检测方法尤为重要。本文使用SPE1000全自动固相萃取系统对饲料中的地西泮进行固相萃取富集，用高效液相色谱仪进行检测。本文参考《T/CFIAS003-2019 饲料中地西泮的测定 高效液相色谱法》采用SPE1000全自动固相萃取系统，测定地西泮的回收效果，实验证明，地西泮回收率在86.8%~99.4%之间，重现性RSD为5.9 %，回收率和重现性良好，说明SPE1000全自动固相萃取系统可靠、稳定，适用于饲料中的地西泮样品前处理。