动物源性食品中常见有机磷农药的测定检测方案(固相萃取仪)

动物源性食品中常见有机磷农药的测定GB 23200.91-2016 适用范围 适用于动物源性食品中5种（乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、对硫磷、喹硫磷）有机磷的测定。（本实验选用样品为猪肉） 参考标准：《GB 23200.91-2016食品国家安全标准 动物源性食品中9种有机磷农药残留量的测定 气相色谱法》 溶液的配置 有机磷标准品储备液（固体标准品）/单标：称取适量有机磷标准物质，用适量丙酮溶解，浓度为1mg/mL。 有机磷中间液/混标：准确移取5种有机磷单标标准储备液各0.1mL，用丙酮稀释至10mL，浓度为10mg/L。 有机磷标准使用液/混标：准确移取1mL有机磷混标中间液，用丙酮稀释至10mL，浓度为1mg/L。 提取步骤 称取5g样品（取肌肉组织搅碎、混匀）于50mL具塞离心管中，加入30mL 乙酸乙酯。在匀浆机上匀浆5min，涡旋混匀5min，超声提取30min，8000r/min离心5min，将有机相全部移至旋转蒸发瓶中；残渣中再次加入20mL 乙酸乙酯，重复提取一次，合并有机相于旋转蒸发瓶中，35℃浓缩至1mL左右，加入2mL乙酸乙酯-环己烷（1：1）溶液，再浓缩至1mL左右，如此重复三次，直到溶剂完全转化为乙酸乙酯-环己烷（1：1）。将残液取出，用乙酸乙酯-环己烷（1：1）定容至5mL。待净化。 净化步骤 凝胶渗透色谱条件如下： GPC仪器型号 月旭 GPC-1600凝胶色谱仪 凝胶色谱柱 月旭Bio-Beads S-X3凝胶色谱柱，规格25×700mm 流动相 乙酸乙酯-环己烷（1:1） 流速 5.0 mL /min 进样量 5.0 mL 收集时间 37-46min 波长 254nm 将待净化液经凝胶色谱柱以乙酸乙酯-环己烷（1:1）洗脱，流速5mL/min，收集37-46min流分，将其旋转蒸发至5mL 左右，用氮气吹除溶剂，丙酮定容至1mL。经0.22μm滤头过滤后，留待GC分析。 注意事项 GPC柱启用前以1mL/min 冲洗1-2h后使用效果更佳。 加标水平：5g样中，添加0.1mL 1mg/L标准使用液，得到加标水平为0.02mg/kg。最终定容到1mL，机读数为0.1mg/L。 色谱条件 仪器型号 Panna A91 色谱柱 WM-1701，30.0m×0.32mm×0.25μm 进样口温度 250℃ 检测器（FPD）温度 250℃ 载气 N2，尾吹气流速：30mL/min；氢气流速：75mL/min，空气流速：90mL/min。 进样方式 脉冲不分流进样，脉冲压力25psi，脉冲时间0.75min 载气流量 2.0mL/min 进样量 4μL 升温程序 100℃保持2min，10℃/min升到270℃，保持5min； 7、色谱图或者加标回收率结果 图1. 5种有机磷标准品0.1mg/L 图谱 表1：相关峰信息 序号 峰名称 保留时间 /Min 峰高 /Hz 峰面积 /[Hz*s] 相对峰面积 /% 分离度 塔板数 1 乐果 14.149 122.74 369.46 18.8637 28.463 570986 2 甲基对硫磷 15.129 155.35 487.38 24.8842 12.790 590391 3 马拉硫磷 15.458 68.12 237.53 12.1275 3.979 508605 4 对硫磷 15.917 95.35 343.06 17.5159 5.106 459198 5 喹硫磷 16.273 119.00 521.15 26.6087 3.546 368256 图2.猪肉样品空白图谱 图3.猪肉样品加标20.0ng/g图谱 表2：加标回收率 分类 加标水平ng/g 回收率/% RSD（n=2）/% 乐果 20.0 100.20% 3.33% 甲基对硫磷 94.35% 0.85% 马拉硫磷 80.22% 2.81% 对硫磷 88.43% 1.55% 喹硫磷 86.82% 2.75% 8.相关产品信息 货号 名称 规格 00837-05006 50mL螺口尖底离心管 Welchrom® 一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装,未灭菌，50mL，50/包 00837-05002 15mL螺口尖底离心管 Welchrom® 一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装,未灭菌，15mL，50/包 00824-31001 固相萃取装置 Welch 固相萃取装置，12位方缸 00821-32291 盖子+垫片 Welchrom® 预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖中心孔6mm 100pk 00821-40927 样品瓶 Welchrom® 2mL 透明短螺纹广口样品瓶带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk 00802-02201 针头式过滤器 进口NY,13mm*0.22μm,100pk 03907-32001 气相色谱柱 WM-1701  30m*0.32mm*0.25um 00823-00003 GPC凝胶色谱柱 Welch Bio-Beads S-X3 700*25mm 00826-70383 对硫磷标准溶液 A2S, CAS No.:56-38-2, 1000μg/mL于甲醇, 1mL 00826-70406 甲基对硫磷标准溶液 A2S, CAS No.:298-00-0, 1000μg/mL于甲醇, 1mL 00826-70363 乐果标准溶液 A2S, CAS No.:60-51-5, 1000μg/mL于甲醇, 1mL 00826-M002P100 马拉硫磷标准品 A2S, CAS No.:121-75-5, 100mg 00826-Q001P250 喹硫磷标准品 A2S, CAS No.:13593-03-8, 250mg 声明:除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168号Tel:400-810-6969 邮编：321000E-mail:lingyuyu@welchmat.com 1 适用范围适用于动物源性食品中5种（le果、甲基对硫lin、马拉硫lin、对硫lin、喹硫lin）有机磷的测定。（本实验选用样品为猪肉） 参考标准：《GB 23200.91-2016食品国家安quan标准 动物源性食品中9种有机磷农药残留量的测定 气相色谱法》 2 净化步骤凝胶渗透色谱条件如下：将待净化液经凝胶色谱柱以乙酸乙酯-环己烷（1:1）洗脱，流速5mL/min，收集37-46min流分，将其旋转蒸发至5mL 左右，用氮气吹除溶剂，丙酮定容至1mL。经0.22μm滤头过滤后，留待GC分析。 3 色谱条件4 色谱图或者加标回收率结果图1. 5种有机磷标准品0.1mg/L 图谱 表1：相关峰信息图2.猪肉样品空白图谱图3.猪肉样品加标20.0ng/g图谱 表2：加标回收率5 相关产品信息