食品中邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯检测方案(液质联用仪)

食品中多种塑化剂的LC-MS/MS分析方法 食品中多种塑化剂的LC-MS/MS分析方法 食品中多种塑化剂的LC-MS/MS分析方法 一、背景 塑化剂，又称增塑剂。增塑剂是工业上被广泛使用的高分子材料助剂，在塑料加工中添加这种物质，可以使其柔韧性增强，容易加工，台湾厂商用一种常见的增塑剂DEHP代替棕榈油配制的有毒起云剂，能够产生和乳化剂相似的增稠效果，引发“芦笋汁”事件。有食品专家指出，塑化剂毒性为三聚氰胺的20倍，1个人喝1杯500毫升掺塑化剂饮料就已经超过单日食量上限，所以塑化剂DEHP不仅不能被添加在食物中，甚至不允许使用在食品包装上。当前，可能被塑化剂污染的产品包括运动饮料、水果饮料、茶饮料，连水果糖浆、儿童钙片、乳酸菌咀嚼片也赫然在列。不幸的是，污染目录还将随时间而增长。 国内已出台相应气相质谱仪标准用于分析塑化剂《GB/T21911-2008食品中邻苯二甲酸酯的测定》，但是由于随着人们研究的深入，由原有的22种塑化剂扩大到800多种，单单依靠气相质谱法难以满足日渐扩大的塑化剂范围，所以国家各相关部门正在酝酿新液相色谱法来覆盖更多的塑化剂检测。本文中将详细介绍采用ABSCIEX API 4000TM LC-MS/MS检测22种塑化剂，并且经实验证实AB SCIEX API 4000*TM、4000 QTRAP、API 5000TM、API 5500TM以及QTRAP5500同样适用与该方法。 二、化合物信息 表1.化合物基本信息 化合物 英文通用名 分子量 CAS 分子式 邻苯二甲酸酯二甲酯 Dimethyl phthalate 194.2 131-11-3 C10H1004 邻苯二甲酸二乙酯 Diethyl phthalate 222.2 84-66-2 C12H1404 邻苯二甲酸二丙酯 Dipropyl phthalate 250.3 131-16-8 C14H1804 邻苯二甲酸二异丙酯 Diisopropyl phthalate 250.3 605-45-8 C14H1804 邻苯二甲酸二烯丙酯 Diallyl phthalate 244.2 131-17-9 C14H1404 邻苯二甲酸二异丁酯 Diisobutyl phthalate 276.3 84-69-5 C16H2004 邻苯二甲酸二丁酯 Dibutyl phthalate 278.3 84-74-2 C16H2204 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 Bis(2-methoxyethyl) phthalate 280.3 117-82-8 C14H160。 邻苯二甲酸二异戊酯 Diisopentyl phthalate 236.3 605-50-5 C18H2604 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 Bis(4-methyl-2-pentyl) phthalate 334.4 146-50-9 CH3O 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 Bis(2-ethoxyethyl) phthalate 310.3 605-54-9 C16H2206 邻苯二甲酸二戊酸 Dipentyl phthalate 306.4 131-18-0 C18HO 邻苯二甲酸丁基苄基酯 Benzyl butyl phthalate 518.6 85-68-7 CzH3FO， 邻苯二甲酸二己酯 Dihexyl phthalate 334.4 84-75-3 C20H3004 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)酯 Bis(2-n-butoxyethyl) phthalate 366.4 117-83-9 C20H3006 邻苯二甲酸二环己酯 Dicyclohexyl phthalate 330.4 84-61-7 C20H2604 邻苯二甲酸二庚酯 Di-n-heptyl phthalate 362.5 3648-21-3 C22H3404 邻苯二甲酸二(2-乙基) 己酯 Bis(2-ethylhexyl) phthalate 390.6 275818-89-8 C24H3804 邻苯二甲酸二苯酯 Diphenyl phthalate 318.3 84-62-8 C20H1404 邻苯二甲酸二正辛酯 Di-n-octyl phthalate 390.6 117-84-0 C24H3804 邻苯二甲酸二异壬酯 Diisononyl ortho-phthalate 418.6 28553-12-0 C26H4zO4 邻苯二甲酸二异癸酯 Diisodecyl ortho-phthalate 446.7 26761-40-0 C28Ha6O4 三、前处理方法 (GB/T 21311-2007) 准确称取1.0g混均后的试样(精确到0.01g)于20mL 容量瓶中，加入甲醇约15mL，经超声波震荡萃取30min后，冷却至室温，以甲醇定容至20mL。静置后，取上层溶液5mL置于离心管中，以3，500rpm离心10min， 取上层清液供LC-MS/MS分析。 注：前处理整个实验过程(包括标准溶液的配制)应尽可能使用玻璃容器，避免接触塑料容器。 四、实验方法 4.1液相条件 色谱柱： Dionex Acclaim C18 120A 3.0×150 mm， 3um； 柱温：45℃； 流动相：A：水(含有0.1%甲酸水溶液)，B：甲醇； 梯度洗脱，洗脱条件见表2： 表2.液相色谱条件 时间 (min) 流速 (mL/min) A(%) B(%) 0 0.4 20 80 1.5 0.4 20 80 5.0 0.4 2 98 8.6 1.0 2 98 12.0 0.4 20 80 17.0 0.4 20 80 4.2质谱条件 离子源： Turbo VTM 离子源； 扫描模式：正离子； 采集模式：多反应监测MRM； 表3.硝基呋喃类药物代谢物MRM离子对 化合物名称 母离子 定量离子对 定性离子对 扫描模式 邻苯二甲酸酯二甲酯 195 135 133 正离子 邻苯二甲酸二乙酯 223 177 121 正离子 邻苯二甲酸二丙酯 251 191 149 正离子 邻苯二甲酸二异丙酯 251 209 121 正离子 邻苯二甲酸二烯丙酯 247 189 149 正离子 邻苯二甲酸二异丁酯 279 223 167 正离子 邻苯二甲酸二丁酯 279 205 149 正离子 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 283 59 207 正离子 邻苯二甲酸二异戊酯 307 219 71 正离子 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 335 251 167 正离子 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 311 221 73 正离子 邻苯二甲酸二戊酸 307 167 149 正离子 邻苯二甲酸丁基苄基酯 313 205 149 正离子 邻苯二甲酸二己酯 335 233 149 正离子 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)酯 367 101 249 正离子 邻苯二甲酸二环己酯 331 249 149 正离子 邻苯二甲酸二庚酯 363 247 149 正离子 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 391 167 279 正离子 邻苯二甲酸二苯酯 319 225 77 正离子 邻苯二甲酸二正辛酯 391 261 149 正离子 邻苯二甲酸二异壬酯 419 275 149 正离子 邻苯二甲酸二异癸酯 447 289 141 正离子 注：1.因为此类化合物在容器、流动相及色谱中广泛存在，应尽可能避免使用peak管。在液相部分尽可能用金属管路代替peak管。 2.此类化合物信号和基线均很高，表中所列DP和CE值并不是化合物灵敏度最高时的值。在此表中所列条件下，22种塑化剂均可在50~1000ng/mL获得良好的线性拟合(溶液中标准品浓度，不考虑前处理的稀释倍数) 五、定量质谱数据 通过基质加标得到50ppb浓度的22种塑化剂的色谱图(图1)，图中可以看到22种塑化剂分离效果较好，基本实现基线分离，适合化合物定量检测。但是由于塑化剂广泛存在，所以建议用户在检测过程中务必使用空白样品用于校正来自试剂、实验用品带来的基质干扰。 图1.22种塑化剂色谱峰 图2.22种塑化剂校正曲线图 图2中展示22种塑化剂的校正曲线图，图中展示出在非常宽泛的线性范围内呈现良好线性，说明该方法检测结果准确，线性范围宽，非常适合浓度范围不确定的日常检测。 六、结论 6.11采用AB SCIEX API 4000TM灵敏度完全可满足塑化剂法规要求； 6.2 AB SCIEXAPI 4000TM可精确定量分析，特别是在分析复杂基质样品中塑化剂； 国内已出台相应气相质谱仪标准用于分析塑化剂《GB/T21911-2008 食品中邻苯二甲酸酯的测定》，但是由于随着人们研究的深入，由原有的22种塑化剂扩大到800多种，单单依靠气相质谱法难以满足日渐扩大的塑化剂范围，所以国家各相关部门正在酝酿新液相色谱法来覆盖更多的塑化剂检测。本文中将详细介绍采用ABSCIEX API 4000 LC-MS/MS检测22种塑化剂，并且经实验证实AB SCIEX API 4000+、4000 QTRAP、API 5000、API 5500以及QTRAP 5500同样适用与该方法。采用AB SCIEX API 4000灵敏度完全可满足塑化剂法规要求；AB SCIEX API 4000可精确定量分析，特别是在分析复杂基质样品中塑化剂；