食物中溴螨酯除害剂残留检测方案(气质联用仪)

邓武剑朱曼洁吴凤琪其吴卫东² 1.赛默飞世尔科技2深圳出入境检验检疫局 TSQ 8000 Evo 三重四极杆气质联用 1.前言 早在2012年6月，香港立法会就已完成审议《食物内除害剂残余规例》(第132CM章)(《规例》)的程序。有关规例于2014年8月1日起正式实施。 《食物内除害剂残余规例》列明容许某些食物含有除害剂残余的最高限量以及一些释义条文，是供港蔬菜项目必须遵循的法规以及政策。香港《食物内除害剂残余》规例(Hong Kong Pesticide Residues in FoodRegulation) 包含360种除害剂以及超过7000个“除害剂-食物”组合的最高残留限量/最高再残留限量标准。香港规例中所包含的除害剂，用 GC/MS/MS 和 LC/MS/MS 可以检测其中95%以上的化合物。 本实验用 Thermo ScientificM TSQ 8000 Evo 结合赛默飞世尔科技农残分析色谱柱(TR-Pesticide II 30 m*0.25 mm*0.25 um)分析香港规例中的101种农药残留，得到了非常出色的结果。各种农药的最低检测限在0.07-2.69 pg/L 之间，在5-200 pg/L的范围有良好的线性，且用10 pg/L 样品连续6针进样，得到RSD 在1.51-9.3%之间，表明此方法具有良好的重现性。 2.1仪器和试剂 质谱仪器： Thermo ScientificM TSQ 8000 Evo 质谱仪(赛默飞世尔科技，美国)； 气相色谱仪： Thermo Scientific M Trace 1310 GC 配 Al I310自动进样器(赛默飞世尔科技，美国)； 色谱柱： TR-Pesticide II 30m*0.25mm*0.25 um 毛细管色谱柱； 试剂：丙酮、乙腈：色谱纯； 2.2仪器方法 气相方法： 柱温箱：40℃保持1.5 min，以25C/min升至90℃，保持1.5 min， 再以 25C/min 升至 180℃， 以 5C/min升至280℃，最后以10℃ /min 升温到300℃，保持5min。进样口：不分流进样，不分流时间：1.5 min；进样口温度：270℃；载气：恒流，1.2 mL/min；传输线：300℃质谱方法：离子源温度为300℃，采用 Acquisition-Timed方法， SRM 扫描，具体检测离子对如表1所示： 表1：检测化合物列表及 SRM 离子对信息 中文名 英文名 保留时间 母离子 子离子 碰撞能量(eV) 三氟甲吡醚 Pyridalyl 29.11 163.8 146.1 12 148.1 18 29.11 29.11 204 176.1 10 Flumioxazin 29.89 354.1 176.1 16 29.89 354.1 312 8 29.89 354.1 326.1 8 Fenvalerate 30 125 89 18 30 167 89 32 敌虫菊酯 30 167 125 10 氟胺氰菊酯 Fluvalinate peak 1 30.23 180.8 152.1 22 30.23 250 55.1 16 30.23 250 18 杀灭阿菊酯 Esfenvalerate 30.33 125 89.3 20 30.33 167 10 30.33 225.1 119.1 18 氟胺氰菊酯 Fluvalinate peak 2 30.35 20 30.35 250 55.1 16 30.35 250 200 16 152.1 22 溴氰菊酯 Deltamethrin 30.5 181 16 30.5 252.8 92.9 30.5 8 氟烯草酸 Flumiclorac-pentyl 31 308.09 15 318.09 10 2.3样品前处理 1)样品制备：取适量的蔬菜样品于均质器中，将蔬菜样品打碎，均质混匀。 2)样品提取：称取 10g 样品样 50mL QuEChERS 萃取管中，加入 10 mL 乙腈震荡混匀，加入4 g MgSO4、 1gNaCl、1g无水柠檬酸三钠和0.5 g 柠檬酸二钠，在涡旋振荡器上振荡2分钟，放置于平行摇床上摇30分钟，然后在5000rpm 转速下离心5 min。 ( 3)样品净化：取上清液，转移到15 mL QuEChERS 净化管， 净化管中包括1200 mg MgSO4 4 400 mg PSA 和 400 mg C18。旋涡震荡样品1 min， 然后在5000 rpm 转速下离心5 min。取上清液1mL于进样瓶中，直接 GC-MS/MS分析。 ) 2.4样品基质溶液 按照2.3的程序处理白菜样品，得到空白样品的基质溶液。 2.5标准溶液的配置 1)标准储备液：在十万分之一分析天平上称取每种农药单标化合物 10mg， 加入 10 mL相应的溶剂(根据不同的化合物加入丙酮、甲苯或者乙腈)溶解，配制成浓度为约1000mg/L 的溶液。每种单个标准储备液的浓度根据称样量和加入溶剂的体积计算得到。所有单标储备液在-20℃冰箱中冷冻保存。单标储备液的有效期为6个月。 2)混合标准中间液：移取适量的单标储备液，用乙腈稀释。中间标准储备液的浓度为10.0 mg/mL。中间标准储备液在-20℃冰箱中冷冻保存。中间储备液的有效期为3个月。 3)工作标准溶液：取适量的混合标准中间液，以空白样品基质液(2.4)依次稀释成浓度为5.0、10.0、20.0、50.0、100.0和200.0pg/L 工作标准溶液。 3.结果分析 3.1色谱分离结果 每个化合物 SRM 质谱条件(母离子-子离子-碰撞能量)从 TraceFinder 的 CDB 中导出(见表1)，在该条件下运行样品可得到目标物的 SRM 色谱质谱图见图1。 图1：标准溶液色谱图(200pg/L) 3.2方法的最低检测限 以 S/N=3 为计算最低检测限，结果见表2。图2列出来部分1 pg/L 的除害剂的色谱图。可以看出，农残的检出限基本上低于 1.0 pg/L，足以满足现行国标以及国际上除害剂检测方法的要求，可保证样品中除害剂的定性与定量检测。 图2： 1 pg/L部分农残的色谱图 3.3标准曲线线性、检出限及精密度 配置混合标准溶液，各浓度分别为：5.0、10.0、20.0、50.0、100.0和200.0 pg/L采用上述方法分别进样分析，考察各组分的线性。实验结果表明101种农药组分在 5.0-200.0 pg/L 线性关系良好，线性相关系数均大于0.99(见表2)，对同一样品连续进样6针，RSD在1.51-9.3%之间，重复性良好。按照 IUPAC 方法规定计算各组分检出限，各组分检出限在0.07-2.69 pg/L 之间(见表2)，基本上满足现行方法对于农于分析(检出限10pg/L) 的要求。 表2：保留时间、线性及 RSD%数据统计 序号 英文名 中文名 线性范围 线性方程 相关系数 (R3) 检出限 (ug/L) RSD(%) (n=6) 1 2-phenylphenol 2-邻苯基苯酚 5.0~200.0 Y=1.361e4X-5.994e4 0.9976 0.32 2.76 2 Acephate 乙酰甲胺磷 5.0~200.0 Y=7.063e4X-8.141e4 0.9987 0.35 2.23 3 Acibenzolar-S-methyl 甲噻活素 5.0~200.0 Y=9.513e3X-2.861e4 0.9991 0.90 4.75 4 Amitraz 双甲眯 5.0~200.0 Y=1.946e4X-8.476e4 0.9968 0.31 4.99 5 Benfluralin 氟草胺 5.0~200.0 Y=2.551e3X-8.951e3 0.9981 0.11 6.17 6 BHC， Alpha α-六六六 5.0~200.0 Y=3.841e4X-1.468e4 0.9991 0.11 3.22 7 BHC， Beta β-六六六 5.0~200.0 Y=7.36e3X-1.994e4 0.9978 0.81 4.83 8 BHC， delta 8-六六六 5.0~200.0 Y=1.86e4X-5.324e4 0.9989 0.09 3.61 9 BHC，gama(Lindan) y-六六六 5.0~200.0 Y=6.818e3X-1.529e4 0.9987 0.67 3.46 10 Bifenthrin 毕芬宁 5.0~200.0 Y=3.841e4X-1.468e4 0.9984 0.11 4.6 11 Boscalid (Nicobifen) 啶酰菌胺 5.0~200.0 Y=3.883e4X-3.087e5 0.9982 0.24 5.19 12 Bromopropylate 溴螨酯 5.0~200.0 Y=1.181e4X-3.97e4 0.9983 1.01 5.44 13 Bromoxynil 辛酰溴苯腈 5.0~200.0 Y=5.539e4X-2.705e4 0.9975 0.15 8.95 14 Butylate (Sutan) 丁草特 5.0~200.0 Y=1.56e4X-4.965e4 0.9951 0.95 2.85 15 Captan 克菌丹 5.0~200.0 Y=1.282e3X-1.678e4 0.9906 2.39 9.3 16 Chlorfenapyr 虫螨腈 5.0~200.0 Y=1.6e3X-2.543e3 0.997 0.48 4.09 17 Chlorothalonil 百菌清 5.0~200.0 Y=2.098e3X-1.641e4 0.9938 2.35 5.21 18 Chlorpropham 氯苯胺灵 5.0~200.0 Y=5.898e3X-3.514e4 0.9952 1.79 3.82 19 Chlorpyrifos-ethyl 毒死蜱 5.0~200.0 Y=4.783e3X-1.116e4 0.9992 0.70 2.91 20 Chlorpyrifos-methyl 甲基毒死蜱 5.0~200.0 Y=6.302e3X-1.517e4 0.9977 0.72 5.76 21 Cyfluthrin 氟氯氰菊酯 5.0~200.0 Y=8.081e3X-7.253e4 0.9954 2.69 5.32 22 Cyhalothrin 氟氯氰菊酯 5.0~200.0 Y=1.672e4X-1.166e5 0.9912 2.09 3.86 23 Cypermethrin 氯氰菊酯 5.0~200.0 Y=8.325e3X-6.421e4 0.9923 2.31 5.64 24 Deltamethrin 溴氰菊酯 5.0~200.0 Y=2.676e3X-1.523e4 0.9901 1.71 5.1 25 Diazinon 二嗪农 5.0~200.0 Y=7.443e3X-1.31e4 0.9992 0.53 4.61 26 Dichlobenil 2，6-二氯苄腈 5.0~200.0 Y=1.368e4X-3.814e4 0.9981 0.84 1.51 27 Dichlorvos 敌敌畏 5.0~200.0 Y=8.522e3X-1.567e4 0.9991 0.55 3.19 28 Dicloran 2，6-二氯-4-硝基苯胺 5.0~200.0 Y=2.129e3X-1.177e4 0.9975 1.66 4.98 序号 英文名 中文名 线性范围 线性方程 相关系数 (R) 检出限 (ug/L) RSD(%) (n=6) 97 Triazophos 三唑磷 5.0~200.0 Y=5.498e3X-3.227e4 0.997 1.76 6.2 98 Tribuphos 脱叶磷 5.0~200.0 Y=4.331e3X-2.273e4 0.9976 1.57 3.86 99 Triflumizole 氟菌唑 5.0~200.0 Y=2.915e3X-6.498e3 0.9994 0.67 8.19 100 Trifluralin 氟乐灵 5.0~200.0 Y=2.991e3X-1.174e4 0.9967 1.18 4.69 101 Uniconazole 烯效唑 5.0~200.0 Y=2.212e3X-8.379e3 0.9992 1.14 7.81 4.结论 本文采用 QuEChERS 前处理-气相串联质谱法(QuEChERS-GC-MS/MS)测定蔬菜基质中的101项农残，样品前处理只需要60 min即可完成，无须经过繁琐的人工前处理过程。以快速的 QuEChERS 前处理结合 Thermo Fisher 的 TSQ 8000 Evo三重四极杆仪器，为农残分析带来灵敏度高、准确性好、方便易用的解决方案。总而言之，由赛默飞世尔科技提供的完整工作流程解决方案连同最新开发的 TSQ 8000 GC-MS/MS 系统为多农残的分析和准确定量带来了良好的系统性能。 致谢 特别感谢深圳市出入境检验检疫局提供检测样品及化合物混标，共同完成此篇应用文章。 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 全国服务热线：800810 5118 Thermo 早在 2012 年 6 月，香港立法会就已完成审议《食物内除害剂残余规例》（第 132CM 章）（《规例》）的程序。有关规例于 2014 年 8 月 1 日起正式实施。《食物内除害剂残余规例》列明容许某些食物含有除害剂残余的最高限量以及一些释义条文，是供港蔬菜项目必须遵循的法规以及政策。香港《食物内除害剂残余》规例（Hong Kong Pesticide Residues in Food Regulation）包含 360 种除害剂以及超过 7000 个“除害剂-食物”组合的最高残留限量/最高再残留限量标准。香港规例中所包含的除害剂，用GC/MS/MS和LC/MS/MS可以检测其中 95% 以上的化合物。本实验用 Thermo ScientificTM TSQ 8000 Evo 结合赛默飞世尔科技农残分析色谱柱（TR-Pesticide II 30 m*0.25 mm*0.25 μm）分析香港规例中的 101 种农药残留，得到了非常出色的结果。各种农药的最低检测限在 0.07-2.69 μg/L 之间，在 5-200 μg/L 的范围有良好的线性，且用 10 μg/L 样品连续 6 针进样，得到 RSD 在 1.51-9.3% 之间，表明此方法具有良好的重现性。