筛选的药品中药物筛选检测方案(移液工作站)

AMTKAMTK 背景 自动化方案 随着基因组、合成化学的高通量方法的出现，药物筛选者面临着愈来愈多的新靶标或潜在的有效成分，高通量筛选就是在这样的背景下应运而生的。一个高通量药物筛选体系包括微量和半微量的药理实验模型、样品库管理系统、自动化的实验操作系统、高灵敏度检测系统以及数据采集和处理系统，这些系统的运行保证了筛选体系能够并行操作搜索大量候选化合物。 主机配置 AMTK@ LH1406液体处理工作站 台面布置图 头库 孵育模块 多通道移液头 AMTK AMTKQ为高通量药物筛选体系提供自动化的实验操作系统，为各制药公司生化水平和细胞水平上的筛选模型提供了解决方案。 吸头 试剂板 水槽 可整合模块 酶标仪 吸头 药品稀释板 检测板 垃圾桶 近年来，PD-1/PD--L1免疫检查点抑制剂作为一种新型的癌症免疫治疗方法，在多种癌症治疗中取得了惊人的效果。我们选取的案例正是老用HTRF技术筛选PD-1/PD-L1的抑制剂，其实验原理如图1所示。PD-L1和PD1分别融合标签蛋白TAG1和TAG2，它们被各自的抗体ANTI-TAG1和ANTI-TAG2识别。由于抗体上标记有HTRF的供体荧光染料EU和受体荧光染料XL665，所以当PD-L1和PD1靠近并结合时，EU被激发发出的荧光其振转移到XL665上，使XL665发出荧光从而被检测到。 实验结果 AMTK@LH1406 自动化与手工操作的IC50比较 Pla -O N ON n h ib ito r 1 h ib itor 1 -- h ib itor 1 Inhibitor2 .12 -12 -12 -10 图1利用HTRF技术筛选PD1/PD-L1抑制剂的实验原理 AMTK@ LH1406 自动化操作与手工操作的一致性分析 当PD-1/PD-L1抑制剂存在时，将阻碍TAG1-PD-L1蛋白与TAG2-PD-1蛋白的结合，从而影响到XL665的荧光信号的强度， S/N (ON) Inhibitor 1 Inhibitor2 Avg.CV Avg.R IC50 (nM) IC50(nM) square LH1406-plate 1 11.2 146.2 96 4.26% 0.99 LH1406-plate 2 11.0 119.9 78.26 3.15% 0.99 Manual-plate 9.10 143.9 102.3 4.28% 0.99 实验步骤 结论 图2PD1/PD-L1抑制剂筛选实验步骤 AMTK@ LH1406多功能液体处理工作站实现了操寸过程的完全自动化，并且各项性能指标达 到要求。 10 pL of pre-mixed Anti-tag detection reagenitts White 384-well or HTRF 96-well low volume plate Performance Compatibility Compatible with 384-well plate Intra-plate CV 3.71% Inter-plate CV 4.67% IC50 Consistent with manual Assay Window Consistent with manual Rsquare for IC50 test 0.99 Time consumption ~70 min AMTK液体处理工作站应用于药物筛选领域背景：药物筛选是现代药物开发流程中检验和获取具有特定生理活性化合物的一个步骤，系指通过规范化的实验手段从大量化合物或新化合物中选择对某一特定作用靶点具有较高活性化合物的过程，是临床新药开发的必经过程。近年来，PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂作为一种新型的癌症免疫治疗方法，在多种癌症治疗中取得了惊人的效果。我们选取的案例正是利用HTRF技术筛选PD-1/PD-L1的抑制剂，其实验原理如图1所示。PD-L1和PD1分别融合标签蛋白Tag1和Tag2，它们被各自的抗体识别Anti-Tag1和Anti-Tag2。由于抗体上标记有HTRF的供体荧光染料Eu和受体荧光染料XL665，所以当PD-L1和PD1靠近并结合时，Eu被激发发出的荧光共振转移到XL665上，使XL665发出荧光，从而被检测到。   当PD-1/PD-L1抑制剂存在时，将阻碍Tag1-PD-L1蛋白与Tag2-PD-1的结合，从而影响到XL665的荧光信号的强度。 筛选实验步骤（图2）1. 药品在96孔板中进行梯度稀释；2. 药品从96孔板中吸取2 μL加到384孔板中 ，每个浓度重复2次；3. 加入4 μL Tag1- PD-L1蛋白，混匀；4. 加入4 μL Tag2-PD1蛋白，混匀；5. 室温孵育15min；6. 将Anti-Tag1-Eu（供体荧光染料Donor）和Anti-Tag2-XL665（受体荧光染料Acceptor）等体积混匀，为检测混匀液；7. 加入检测混匀液10 μL，混匀；8. 室温孵育1-3h；1. 多功能酶标仪读板检测。(这个地方可以设计成表格)这个地方可以用表格呈现。奥美泰克自动化解决方案1， 根据实验设计，制定自动化方案，主要功能配置如下设备或附件名称图示数量性能参数LH1406多功能液体处理工作站 112个标准板位温控模块 1温度范围：20~100℃温度精度：正负1℃8通道移液头-250 μL 1移液范围：2 μL~200 μL移液精度：2 μL CV<5%8通道移液头-70 μL 1移液范围：1 μL~50 μL移液精度：2 μL CV<5% 2、 AMTK LH1406多功能液体处理工作站台面布置 3、AMTK LH1406 多功能液体处理工作站操作流程