咖啡中丙烯酰胺检测方案(液质联用仪)

结论欲了解更多信息，请扫描二维码关注我们的微信公众账号◎2018， PerkinElmer， Inc. 版权所有。保留所有权利。 PerkinElmer是 PerkinElmer， Inc. 的注册商标。所有其他商标均为其各自所有者的财产。所有解释权归PerkinElmer.200015_CHN_01 PKI 咖啡中丙烯酰胺含量的测定 背景 近日媒体新闻报道，在美国洛杉矶一家法院裁决，星巴克和其他几家咖啡公司，在加州销售的咖啡必须贴上癌症警告标签。理由是，市面上出售的烘焙咖啡中，被发现含有的高浓度丙烯酰胺，为一种有毒的致癌化学物质。丙烯酰胺是食物发生“美拉德反应"时的副产物。丙烯酰胺的确是一种潜在致癌物质。大量动物实验表明，丙烯酰胺具有一定致癌性；并且能够造成神经系统损伤，影响婴儿早期发育，危害男性生殖健康。2017年11月20日，欧盟发布指令(EU) 2017/2158(将于2018年4月11日实施) ，制定了食品中的丙烯酰胺的基准水平和缓解措施，以减少食品中的丙烯酰胺的含量。在该指令中，规定了丙烯酰胺的基准水平：焙烤咖啡：400pg/kg，速溶咖啡： 850ug/kg，咖啡替代产品：500-4000 pg/kg2。在国内， GB3838-2002《地表水环境质量标准》和 GB5749-2006《生活饮用水卫生标准》中均有丙烯酰胺的限量规定为 0.0005mg/L34。国家标准中 GB5009.204-2014《食品中丙烯酰胺的测定》，规定了食品中丙烯酰胺的测定方法，该方法适用于热加工(如煎、炙烤、焙烤等)食品中丙烯酰胺的测定。PerkinElmer 一直致力于为用户提供全方位的解决方案，在咖啡 丙烯酰胺”事件爆发的第一时间，建立高效液相串联质谱法测定咖啡中丙烯酰胺的检测整体解决方案。 准确称取取样1g(精确精0.001g)，加入10mg/L℃丙烯酰胺内标工作溶液10uL， 相当于100 ng的C丙烯酰胺内标，再加入超纯水10 mL，振摇30 min后，于 4000 r/m 离心 10 min， 取上清液待净化。 在试样提取的上清液中加入5mL正己烷，振荡萃取10min， 于10000 r/m 离心5 min， 除去有机相，再用5mL正己烷重复萃取一次，迅速取水相6mL经0.45 um水相滤膜过滤，待进行HLB 固相萃取柱净化处理。HLB固相萃取柱使用前依次用3mL甲醇、3mL水活化。取上述滤液5mL上 HLB固相萃取柱，收集流出液，并用4mL 80%的甲醇水溶液洗脱，收集全部洗脱液，并与流出液合并待进行 Bond Elut-Accucat 固相萃取柱净化；Bond Elut-Accucat 固相萃取柱依次用3mL甲醇、3mL 水活化后，将HLB固相萃取柱净化的全部洗脱液上样， 在重力作用下流出，收集全部流出液，在氮气流下将流 出液浓缩至近干，用0.1%甲酸溶液定容至1.0mL，待 LC-MS/MS 测定。 LC-MS/MS 仪器方法 1.液相色谱参数： 液相色谱仪： PerkinElmer UHPLC系统，具体参数见表1。 表1.液相色谱仪参数表 液相色谱流动相 A：0.1%甲酸水溶液B：乙腈； 时间(min) 流速(mL/min) %A %B 1 0 0.4 90 10 2 2.0 0.4 90 10 色谱柱 Brownlee Validated AQ C18， 2.1x100 mm， 3.0 um 分析时间 2 min 柱温 30℃ 2.质谱参数： 以下参数以 PerkinElmer QSight 220M三重四极杆质谱仪为例，目标化合物质谱参数见表2和表3。 表1.液相色谱仪参数表 化合物 Q1/m/z Q3/m/z CE/eV 丙烯酰胺 72.0 55.1 -16 72.0 44.1 -40 72.0 27.3 -30 C丙烯酰胺 75.0 58.1 -16 离子源 大气压电喷雾离子源，正离子模式 喷雾电压 5500V 反吹气 100 雾化气 150 离子源温度 500C 采用 PerkinElmer AQ C18色谱柱，使丙烯酰胺获得了良好的色谱保留，图1中展示了浓度为5.0 ug/L的提取离子色谱图。 4/3/2018： Std-5ppb_122947 EIC +MRM 72.0/55.1 (4 pairs) EV： 15 V CC： -16V Exp "Experiment 1" Acr 1 图1.浓度为 5.0 ug/L 下丙烯酰胺的提取离子色谱图 图2.丙烯酰胺标准曲线，浓度范围：0.2ug/L-100.0 ug/L 本文建立了快速，高灵敏度和可靠的 LC-MS/MS 实验方法测定食品中丙烯酰胺的含量。QSight220TM LC-MS/MS系统具有灵敏度高、重现性好、抗污染能力强等优点，轻松满足食品中丙烯酰胺的日常检测要求。 ( 参考文 献 ) ( [1]http：//news.sina.com.cn/o/2018-04-01/doc-ifysuwer2737735.shtml ) ( [2] http：//eur-lex.europa.eu/eli/reg/2017/2158/oj ) ( [3]GB3838-2002 《地表水环境质量标准》 ) ( [4]GB5749-2006 《生活饮用水卫生标准》 ) ( [5] GB5009.204-2014 《食品中丙烯酰胺的测定》 ) 珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司地址：上海张江高科技园区张衡路1670号邮编：201203电话：021-60645888传真：021-60645999 www.perkinelmer.com.cn PerkinElmer° 要获取我们全球办公室的完整列表，请访问 www.perkinelmer.com/ContactUs 本文建立了快速，高灵敏度和可靠的 LC-MS/MS 实验方法测定食品中丙烯酰胺的含量。QSight220TM LC-MS/MS系统具有灵敏度高、重现性好、抗污染能力强等优点，轻松满足食品中丙烯酰胺的日常检测要求。