婴幼儿配方乳粉中高氯酸盐和氯酸盐检测方案(液相色谱仪)

「应用纪要]WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 「应用纪要1 Waters Torus DEA色谱柱用于婴幼儿配方乳粉中高氯酸盐和氯酸盐的UPLC-MS/MS测定的解决方案 仇雯荔，袁汉成，田雪飞，贺章静 沃特世(上海)科技有限公司 简介本实验采用Torus DEA色谱柱来分析婴配儿配方乳粉中高氯酸盐和氯酸盐的含量，方法中用乙腈作为提取液后，过PRIMEHLB固相萃取柱后，得到了更好的净化效果，同时灵敏度，准确度及重现性的也得到到较满意的结果。 项目背景 用户反映检测奶粉中的高氯酸盐和氯酸盐时，出现保留时间漂移，基质干扰严重以至于氯酸盐无法检测等问题。 实验方案 提取 准确称取1g(精确至0.001g)试样置于50mL具塞离心管中，加入混合同位素内标液，准确加入5.0mL0.1%甲酸水溶液，迅速混匀，置于水浴超声20 min， 涡旋振荡5 min， 再准确加入10.0mL乙腈，混匀，于水浴超声10 min， 10000r/min常温离心10 min， 静置30 min后取上清液待净化。 净化 吸取约3.0mL上述离心上清液，过PRIME HLB(P/N：186008057)固相萃取柱，收集滤液后，过0.2 umGHP滤膜(WAT097962)，装入2mL样品瓶，供液相色谱-串联质谱仪测定用 仪器条件 色谱条件 仪器系统： ACQUITY UPLCI-Classsystem 色谱柱： Torus DEA Column，130A1.7 um， 2.1×100 mm(P/N：186007616) 流动相A： 乙腈 流动相B： 20mM甲酸铵缓冲液(pH=3.0) 流 速： 0.45 mL/min 柱 温： 35°C 进样量： 1pL 质谱条件质谱系统：Xevo TQ-S Micro 质谱仪电离模式：ESI-电离电压：0.75 KV脱溶剂气：流量1000 L/hour温度：500°C MRM 检测参数见右表： Compound Name Parent (m/z) Daughter (m/z) Auto D Dwell(s) Cone (V) Collision (V) 1 CI03- 82.9681 66.9031 回 0.130 56 16 2 CI03- 85.0000 69.0000 回 0.130 56 16 3 CI03-IS 89.0000 71.0000 回 0.130 56 16 Compound Name Parent(m/z) Daughter(m/z) Auto D Dwell (s) Cone (V) Collision(V) 1 CI04- 98.9681 82.9183 回 0.130 62 20 2 CIO4- 101.0000 85.0000 回 0.130 62 20 3 CIO4-IS 107.0000 89.0000 0.130 62 20 表中： CIO定量离子对为：82.9681>66.9031 CIO定量离子对为：98.9681>82.9183 实验结果与讨论 标准品谱图及线性 图1.1ng/mL标样CIO色谱图。 图2.1ng/mL标样CIO色谱图。 CIO， 在0.5-50 ng/mL浓度之间，相关系数R2>0.997. 图3.CIO标准曲线(同位素内标法)。 CIO在0.5-50 ng/mL浓度之间，相关系数R²>0.999。 图4.CIO-标样结果：标准曲线(同位素内标法)。 净化效果比较 比较了甲醇和乙腈两种提取液，，过PRIMEHLB小柱后的效果。乙腈结果显示经乙腈提取的溶液放置几天仍保持澄清，未出现沉淀物，如下图： 方法回收率 本方法在空白样品中加标75、150 pg/kg添加浓度时，回收率在80%~110%之间。 重现性 样本连续6针进样重现性结果如下图所示，含量重现性CIO。：RSD为5.8%， CIO：RSD为2.1%；RT重现性：CIO，：和CIORSD均<0.1%，未出现保留时间漂移的现象。 Sample ID Sample Name 1 20190228_115 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_1 QC 82.968>66.903 3.720 18：18：28 28-Feb-19 0 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_1 20190228_115 2 20190228_116 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_2 QC 82.968>66.903 3.727 18：25：03 28-Feb-19 D Sample_D1127_1_PHLB+GHPIS_2 20190228_116 3 20190228_117 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_3 QC 82.968>66.903 3.733 18：31：39 28-Feb-19 BsSample_D1127_1_PHLB+GHPIS_3 20190228_117 4 20190228_118 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_4 QC 82.968>66.903 3.727 18：38：14 28-Feb-19 D Sample_D1127_1_PHLB+GHPIS_4 20190228118 5 20190228_119 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_S QC 82.968>66.903 3.727 18：44：50 28-Feb-19 5 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_5 20190228_119 6 20190228_120 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_6 QC 82.968>66.903 3.727 18：51：25 28-Feb-19 0 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_6 20190228_120 CIO4- Sample Text Type Quan Trace RTI Acq.Time Acq.Date 1 12 20190228_115 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_1 QC 98.968>82.918 1.776 18：18：28 28-Feb-19 2 2： 20190228_116 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_2 QC 98.968>82.918 1.776 18：25：03 28-Feb-19 3 3 20190228_117 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_3 QC 98.968>82.918 1.776 18：31：39 28-Feb-19 4 4 20190228_118 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_4 QC 98.968>82.918 1.776 18：38：14 28-Feb-19 5 5 20190228_119 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_5 QC 98.968>82.918 1.776 18：44：50 28-Feb-19 6 62 20190228_120 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_6 QC 98.968>82.918 1.776 18：51：25 28-Feb-19 ( 讨论 ) ■PRIME HLB小柱(PN：186008057，6cc/200 mg)具有很好的去磷脂，脂肪的作用，过柱后的供试品溶液减少了污染色谱柱的风险，同时也大大降低基质效应。 Torus DEA色谱柱作为HILIC机理色谱柱使用，安按HILIC柱的方法测柱效，而且须用50mM以上浓度的缓冲盐作为水相流动相测试，用后保存在95：5(V：V)=乙腈：水中。 此色谱柱原为UPC²色谱柱，故初次用作高氯酸盐，氯酸盐测试时，应使用适当的流动相将其转换为HILIC模式。详见沃特世发布的(2018年1月720006156ZHLM-PDF)。 扫一扫，关注沃特世微信 Waters 沃特斯中国有限公司 沃特世科技(上海)有限公司 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 北京：010-52093866 上海：021-6156 2666 广州：020-28296555 香港：852-29641800 免费售后服务热线：800(400) 820 2676www.waters.com 婴幼儿配方乳粉中高氯酸盐，氯酸盐检测的应用纪要 婴幼儿配方乳粉中高氯酸盐，氯酸盐检测的应用纪要 简介 本实验采用Torus DEA色谱柱来分析婴幼儿配方乳粉中高氯酸盐和氯酸盐的含量，方法中用乙腈作为提取液后，过PRIME HLB固相萃取柱后，得到了更好的净化效果，同时灵敏度，准确度及重现性的也得到比较满意的结果。项目背景用户反映检测奶粉中的高氯酸盐和氯酸盐时，出现保留时间漂移，基质干扰严重以至于氯酸盐无法检测等问题。讨论 1）PRIME HLB小柱(PN:186008057,6cc/200 mg)具有很好的去磷脂，脂肪的作用，过柱后的供试品溶液减少了污染色谱柱的风险,同时也大大降低基质效应。2）Torus DEA色谱柱作为HILIC机理色谱柱使用,须按HILIC柱的方法测柱效,而且须用50mM以上浓度的缓冲盐作为水相流动相测试,用后保存在95:5(V:V)=乙腈:水中。 3）此色谱柱原为UPC2色谱柱，故初次用作高氯酸盐，氯酸盐测试时，应使用适当的流动相将其转换为HILIC模式。详见沃特世发布的<Torus DEA色谱柱极性农药分离入门指南>(2018年1月720006156ZH LM-PDF)。