细胞中细胞代谢检测方案(流式细胞仪)

对调节细胞命运和功能的代谢通路进行调控，进而指导免疫系统 安捷伦 Seahorse XF 分析揭示免疫反应上游驱动因素的早期窗口 免疫细胞高度依靠一系列信号转导、网络和检查点来调节细胞过程。免疫细胞定向执行特定功能时，可采用免疫表型分析、细胞因子分析和通路分析等常规分析方法了解免疫细胞命运和功能的全面概况。然而，对通路进行干预和调控以控制免疫细胞功能，需要了解免疫细胞过程的上游驱动因素。代谢程序是免疫细胞结果的上游决定因素。 安捷伦 Seahorse XF 技术提供了动态的功能性代谢测量，可以更直接地实时测量免疫细胞过程。为了充分理解和控制免疫细胞生物学的动态性质，需要进行实时活化分析，，7了解早期窗汇并提供干预机会。代谢分析不仅提供了实时活化动态，还提供一组丰富的通路靶标来调控免疫细胞生物学。 用于免疫学研究的安捷伦 Seahorse XF 细胞分析解决方案 生成时间分辨实时功能数据 安捷伦 Seahorse XF 平台提供了能量代谢的实时监测，，以深刻理解免疫细胞的早期功能，更全面地了解免疫细胞生物学。 安捷伦XF 细胞分析特点： -活细胞 -实时动力学 -免标记 -动态加药口 -同时测量耗氧量和糖酵解速率 -活化的早期窗口 -定量糖酵解和 ATP生成速率 免疫细胞功能的任何变化都需要能量产生的改变 代谢表型分析为免疫细胞功能的研究提供了重要的分析工具 活化、扩增、效应器功能的参与以及恢复稳态都是免疫细胞生命周期的关键方面一谱系和免疫细胞类型限制了免疫细胞在这些作用中发挥功能的能力。安捷伦细胞分析可提供实时功能测量，用于全面了解免疫细胞功能，并深入了解调节免疫细胞反应的通路和靶标。 免疫细胞活化的实时分析提供了了解代谢需求、信号、通路和检查点的早期窗口 图1.安捷伦 Seahorse XF 实时免疫细胞活化测定揭示了对T细胞活化至关重要的代谢和信号转导需求。摘自 Gubser， P. M.， et al.(2013). Nat Immunol. 14(10)：1064-72 将代谢测量作为免疫细胞类型、功能和谱系定向的指标 图2.XF同步测量显示不同的免疫细胞具有不同的代谢表型。 摘自 Kramar et al.(2014). Redox Biol.2：206-10 图3.安捷伦 Seahorse XF 细胞线粒体压力测试表明能量需求随着谱系定向而变化。摘自 Price et al. (2018). Cell Rep. 23(11)：3152-9 了解干扰通路和控制免疫细胞反应的策略，带来治疗机会 免疫细胞疗法的目标是通过修饰和扰乱免疫细胞生物学行为以及相关的信号转导和反馈，来增强天然免疫细胞的性能。 XF分析实时提供活细胞的关键测量值，揭示了调控策略的功能结果。了解如何通过信号转导、检查点阻断或通路干扰调节免疫细胞反应，通过代谢编程的改变实现“功能化”。 XF 分析可以揭示 CAR-T 共同受体和效应记忆细胞反应之间的关键代谢联系，从而推进过继免疫治疗研究 图4.通过 CAR-T 细胞中不同的信号转导共受体 (CD28与4-1BB)影响细胞代谢，以驱动效应细胞和记忆细胞功能的分析，更好地理解 CAR-T 细胞疗法的有效性。摘自 Kawalekar 2016 Immunity 使用时间分辨的实时功能数据监控免疫细胞反应，以利用检查点进行阻断 l对照 IgG 抗PD-L1 图5.联合免疫治疗策略，苯扎贝特通过激活杀伤性T细胞的线粒体呼吸来促进生存和增殖并改善效应功能，从而增强PD-1阻断抗肿瘤免疫的有效性。摘自 Chowdhury 2018 Cancer Immun Res. DOI： 10.1158/2326-6066 实时定量测定能够提供免疫细胞功能的全面信息 功能性 XF 测量提供了影响免疫细胞反应、命运和功能关键因素的窗口 代谢测量为免疫细胞在各种条件下如何响应，以满足与免疫反应相关的综合和多方面的需求提供了灵敏的指标。研究人员正在应用 XF 技术研究与炎症、自身免疫和免疫抑制有关的问题，以及底物依赖性和免疫抑制性肿瘤微环境。 通过代谢表型分析研究肥胖和代谢综合征相关炎症反应 图 6.安捷伦 Seahorse XF 技术显示，巨噬细胞中 NRP1 缺失导致对糖酵解的依赖性增加(6A)，同时也影响脂质摄取(6B)， 支持 NRP1 在防止肥胖和炎症糖酵解代谢中的作用。摘自 Wilson et al.， 2018 Sci Immunol.2018.3(21) XF 分析提供了对肿瘤微环境相关抗肿瘤免疫反应的基本通路、信号转导和营养需求的深入了解 图7.安捷伦 Seahorse XF 显示了谷氨酰胺戒断但不抑制谷氨酰胺酶(通过BPTES) 导致IL-2/IL-12细胞因子刺激的 NK 细胞反应受损，解决了 cMyc 在自然杀伤反应中表达的机制。摘自 Loftus 2018 Immunity. Loftus， R. M.， et al. 2018. Nat Commun. 2018.9 (1)：2341 安捷伦 Seahorse XF 实时免疫细胞活化分析可提供快速稳定的活化指标 注入抗 CD3和 通过快速转向细胞增殖所需的生长促进通路驱动免疫细胞活化。研究人员正在利用XF技术在几分钟内测定免疫细胞活化，代替使用典型标志物耗费几小时或几天的测定。 免疫细胞特异性： 安捷伦 Seahorse XF 实时T细胞活化分析 安捷伦 Seahorse XF 实时巨噬细胞活化分析 安捷伦 Seahorse XF 实时中性粒细胞活化分析 安捷伦 Seahorse XF 糖酵解速率测定试剂盒货号103344-100 (XF/XFe) 与 103346-100 (XFp) 安捷伦 Seahorse XF 细胞膜通透剂货号102504-100 无需真正的分离线粒体即可进行分离线粒体检测实验。 安捷伦细胞分析产品组合 安捷伦行业领先的实时活细胞分析技术帮助研究人员突破 了多个研究领域的界限。如需了解完整的解决方案组合， 请访问网站 www.agilent.com/chem/discoverxf www.agilent.com/chem/immunology 出版物数据库 www.agilent.com/publications-database/ 细胞参考数据库 www.agilent.com/cell-reference-database/ 网络研讨会 www.agilent.com/en-us/training-events/eseminars/ seahorse-xf-technology-webinars 查找当地的安捷伦客户中心 cellanalysis.support@agilent.com 全球技术支持 cellanalysis.support@agilent.com 免费专线 800-820-3278，400-820-3278(手机用户) 仅限研究使用。不可用于诊断目的。 ( 本文中的信息、说明和指标如有变更，恕不另行通知。 ) ◎安捷伦科技(中国)有限公司，2019 ( 2019年5月13日，中国出版 ) ( 5994-0931ZHCN ) Buck Cell doi：j.cell. 经 Elsevier 授权，转载自： Cell，， Buck et al， Metabolic instruction of immunity， p. ◎ 免疫细胞高度依靠一系列信号转导、网络和检查点来调节细胞过程。免疫细胞定向执行特定功能时，可采用免疫表型分 析、细胞因子分析和通路分析等常规分析方法了解免疫细胞命运和功能的全面概况。然而，对通路进行干预和调控以控制 免疫细胞功能，需要了解免疫细胞过程的上游驱动因素。代谢程序是免疫细胞结果的上游决定因素。 安捷伦 Seahorse XF 技术提供了动态的功能性代谢测量，可以更直接地实时测量免疫细胞过程。为了充分理解和控制免疫细 胞生物学的动态性质，需要进行实时活化分析，了解早期窗口并提供干预机会。代谢分析不仅提供了实时活化动态，还提 供一组丰富的通路靶标来调控免疫细胞生物学。