粮食、谷物中肾毒素桔青霉素检测方案(生化耗材)

中检维康 「肾毒素桔青霉素检测解决方案1 [依据食品安全国家标准食品添加剂红曲红 GB1886.181-2016 的要求汇编] [北京中检维康生物技术有限公司] [北京·海淀] [400-6677-6581 2018年6月4日 北京中检维康生物技术有限公司简介 北京中检维康生物技术有限公司位于北京海淀区中关村高科技产业园区，研发生产基地位于顺义，是国家级高新技术企业(证书号 GR201211000880)，注册资金1000万元(营业执照注册号：110108003734457)，具有中华人民共和国医疗器械经营企业许可证(证号：京081476)，通过了 GB/T19001-2008/ISO 9001：2008标准质量管理体系认证(证书编号：01611Q22412R0S)，是科技部科技型中小企业技术创新基金资助单位(国科发计[2011]242号)，用于食品安全检测的免疫亲和柱已获国家重点新产品证书(编号2012GRA0074).o 中检维康的技术平台 已经建立了包括生物毒素、兽药残留、农药残留、激素残留、有机物残留的半抗原、完全抗原的合成、单克隆抗体、多克隆抗体的制备，免疫亲和柱、酶联免疫试剂盒、定量金标试纸条产品、iElia 酶标仪、iCheck快检仪和分析方法的开发和产业化。中检维康已申请和获得中国专利7项，发表论文70余篇，参编食品安全检测等方面书籍7本， iElisa(注册号分别为8976105) 和iCheck (注册号分别为8976116)已获中国注册商标登记。中检维康已为1000多家质检、粮油、农业、卫生等政府实验室和各种企业提供了食品安全检测分析设备与技术解决方案。 技术实力7参与制订的中国国标和行业标准 ( (1)GB/T 23503-2009 《食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》 ) ( (2) GB/T 23504-2009 《食品中玉米赤霉烯酮的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》 ) ( (3)GB/T 5009.209-2008 《谷物中玉米赤霉烯酮的测定》 ) ( (4) GB/T23501-2009《食品中T-2毒素的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》 ) ( (5) GB/T23502-2009 《食品中赭曲霉毒素A的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》 ) ( (6) S/NT1745-2006《进出口大豆、油菜籽和食用植物油中玉米赤霉烯酮的检验方法》 ) ( (7) S/NT1746-2006《进出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素A的检验方法》 ) ( (8) GB/T 28716-2012《饲料中玉米赤霉烯酮的测定免疫亲和柱净化高效液相色谱法》 ) ( (9)GB/T30955-2014《饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定免疫亲和柱净化高效液相色谱法》 ) ( (10) GB/T30957-2014《饲料中赭曲霉毒素A的测定免疫亲和柱净化高效液相色谱法》 ) ( (11) GB/T30956-2014《饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和柱净化高效液相色谱法》 ) ( (12)GB/T 5009.118-2008 《谷物中T-2毒素的测定》 ) ( (13)GB/T 25228-2010《粮油检验米及其制品中伏马毒素含量测定免疫亲和柱净化高效液相色谱法和荧光光度法》 ) ( (14) GB/T 25220-2010《粮油检验粮食中赭曲霉毒素A的 测 定高效液相色谱法和荧光光度法》 ) ( (15) SN/T1102-2002《进出口油籽及粮谷中黄曲霉毒素的检验方法》 ) ( (16) S/NT1571-2005《进出口粮谷中呕吐毒素的检验方法-液相色谱法》 ) ( (17) S/NT1572-2005《进出口粮谷、饲料中伏马菌素的检验方法-液相色谱法》 ) ( (18) S/NT1959-2007《动物源性食品中醋酸甲羟孕酮留留量的检验方法-酶联免疫法》 ) ( (19) SN/T 1940-2007《进出口食品中赭曲霉毒素A的测定方法》 ) 关于桔青霉素 什么是桔青霉素? 桔青霉素是青霉属和曲霉属的某些菌株产生的真菌毒素，于1931年首次被分离纯化。1979年 Carlton将其作为抗菌素进行检测时，发现它对实验动物具有显著的肾脏毒性。 后来，又发现它能引起许多动物的肾脏毒害，并有致癌性。调查发现一些桔青霉素的产生菌在自然界分布广泛，经常引起纤维的降解以及玉米、大米等农作物的霉变。近年来，桔青霉素在食品中的污染问题越来越引起人们的关注。在1991年法国里昂召开的真菌毒素和地方肾病与泌尿道肿瘤研讨会上，讨论了桔青霉素在 Balcan 地方肾病发生中的作用，引起了国际癌症研究会的高度重视。当年，桔青霉素被国际生命科学院自然毒素素测委员会欧洲分会列为必须检测的毒素之一。 桔青霉素的产生及其自然分布 有多种青霉属真菌和曲霉属真菌能在自然或人工条件下产生桔青霉素。如青霉中的纠缠青霉、瘿青霉、黄青霉、点青霉、扩展青霉、詹森青霉等，曲霉有土曲霉、白曲霉和红曲霉等。其中桔青霉是自然界中最重要的桔青霉素产生菌。桔青霉在自然界中分布广泛，在温暖的气候条件下生长繁殖迅速。它经常和纤维的降解，玉米、大米、面包等农产品或食品的霉变有关。在大米中及大米的产地该菌是普遍存在的。近年的调查研究发现：在许多农产品如玉米、大米、奶酪、苹果、梨和果汁等食品和农产品中都有可能检测到桔青霉素，和分离到产桔青霉素的菌株，不同的菌株之间产毒能力和产毒条件差异很大，为预防和控制带来了困难。因此，桔青霉素引起的污染问题越来越受到人们的关注。 红曲霉产桔青霉素问题及控制措施 1995年法国学者 Blanc 证实某些红曲霉菌株也能产生桔青霉素。这一发现在食品界引起了不小的震动。在我国，利用红曲霉发酵生产食品和药品已有上千年的历史，许多传统食品如：红曲米、红曲酒、粉蒸食品和腐乳等深受人们的喜爱。红曲霉的代谢产物中有许多在食品、医药和化工中很有价值的发酵产物。如品质优异、着色性好、色调丰富的天然红曲色素；能显著抑制胆固醇合成、降低血脂含量的莫那可林(MonacolinK)和洛伐它丁(Lovastain)；还有含量非常丰富的麦角固醇、长链脂肪酸及多种抗菌活物质。20世纪90年代初，欧美、日本等国对我国的食用红曲、药用红曲及其相关产品需求猛增，给我国的红曲生产厂家带来了可观的经济效益。桔青霉素的存在不仅使我国的红曲产品出口受到损失，还严重地威胁到人们的健康。日本厚生省在1999年版“食品添加剂标准”中规定红曲色素中的桔青霉素的含量须低于 0.2ug/g，德国等西方国家也都制定了针对我国出口的红曲相关产品的新标准，规定桔青霉素的含量必须低于规定值，否则严禁进口销售。 我国对桔青霉素的要求 我国国家卫生和计划生育委员会发布的《食品安全国家标准食品添加剂红曲红》(标准号：GB1886.181.2016)中也对桔青霉素提出了明确的要求。我们根据此要求汇编了完整的检测解决方案，以供大家参考。 红曲红的要求指标 ---引自《GB1886.181.2016食品安全国家标准食品添加剂红曲红》 感官要求 项目 要求 检验方法 色泽 浅红色至黑紫色 将适量固体试样盒液体(糊状)试样分别置于清洁，干燥的白瓷盘或烧杯内，于自然光线下观察其色泽和状态。 状态 粉末，糊状或液体 理化指标 项目 指标 检验方法 所需设备 色价Elcm (495+10)nm 符合声称 分光光度计法 分光光度计 干燥减量，w/% ≤6.0 GB5009.3直接干燥法 恒温干燥箱 铅(Pb) (mg/kg) ≤5.0 GB5009.75或5009.12 分光光度计 砷(As)(mg/kg) ≤1.0 GB5009.76 分光光度计 桔青霉素(以单位色价计)(mg/kg) ≤0.04 GB5009.222-2016 高效液相色谱 a仅针对粉末产品 注：商品化的红曲红产品应以符合本标准的红曲红为原料，可添加糊精等食品辅料制成。 ZJ-S100型分光光度计 --适用指标：：色价，铅，砷 ZJ-S10型分光光度计可快速定量检测粮食、食品、蔬菜中的色价，重金属铅、汞、铬、砷、镉的含量等指标。它可以广泛应用于产品质量监督检验、环境保护、粮油制品管理、蔬菜批发市场、食品生产基地、超市、商场、各大食品安全监测系统等部门。 技术参数 1..1可检测多个项目，项目名称可根据实际需求自行调整或升级。 ★2.检测通道：10通道，可快速检测10个样品，既可同时检测，节约时间；又可独立操作，独立计时，避免批内操作时间过长导致的误差，实时显示测量结果。 3.波长：340-670nm， 必须包括但不限于3个检测波长。 4.吸光度值范围：0.000-3.000 A以上 ★5.重复性：±1%(A) (经省级以上质量监管部门论证，并取得检测证书) ★6.吸光度稳定性：光电漂移(A)±0.002(3分钟))((经省级以上质量监管部门论证，并取得检测证书)7.吸光度准确度：±1.0%。 (经省级以上质量监管部门论证，并取得检测证书) 8.外设：内置嵌入式微型热敏打印机。 9.产品需有自主知识产权(专利、著作权) ★10.具有中华人民共和国颁发的制造计量器具生产许可证证书 ★11.仪器通过《食品安全检测仪通用技术》认证。 仪器特点 1、采用5寸以上中文大屏幕。 2、内置大容量锂电池，可以待机工作4个小时。 3、检测过程自动计时，可以更精准的掌控检测时间，以达到最准确的检查结果。 4、提供1个USB 接口， 内置 SD可。可存储1000组以上程序，5000条以上测试数据报告，方便数据的存贮和移动，实现数据查询、浏览、分析、统计、打印和发布信息。 5、仪器可以自动诊断系统故障。 6、提供日期和检测项目两种历史纪录查询方式，方便数据的查询和筛选。 7、操作简单快速，无需复杂的前处理过程，1分钟内可出检测结果。 8.用户接口：1个USB口，可以连接鼠标键盘， USB 等存储者备，也可以连接 PC 通讯。 9.内置不同项目的检测标准和参考限值。测试结果根据参考限值自动进行判断。 ZJ-DHGG型恒温干燥箱 --适用指标：干燥减量(水分) 仪器简介： 采用先进的激光、数控加工设备生产的产品；供工矿企业、化验室、科研单位等作干燥、烘焙熔蜡、灭菌用。 产品特点： ·箱体内均采用镜面不锈钢氩弧焊制作而成，箱体外采用优质钢板，造型美观、新颖。 ·采用具有超温偏差保护、数字显示的微电脑 P.I.D温度控制器，带有定时功能，控温精确可靠。 ·热风循环系统由能在高温下连续运转的风机和合适风道组成，提高工作室内温度均匀度。 ·采用新型的合成硅密封条，能长期高温运行，使用寿命长，便于更换。 9000系列鼓风干燥箱 ●可以从控温面板上调节箱内进风和排气量大小。 独立限温报警系统，超过限制温度即自动中断，保证实验安全运行不发生意外。 (选配) ·可配打印机或 RS485 接口，用于连接打印机或计算机，能记录温度参数的变化状况。 (选配)技术参数：9000系列 型号 ZJ-DHG9140(A) (101-2) 电源电压 AC220V 50HZ 控温范围 RT+10~200℃/RT+10~250℃(需订货说明) 恒温波动度 ±1.0℃ 温度分辨率 0.1℃ 温度均匀度 ±3%(测试点为100℃) 工作环境温度 +5~40℃ 输入功率 2050W 容积 136L 内胆尺寸(mm) WXDXH 550×450×550 外形尺寸(mm)WXD×H 840×670×730 载物托架(标配) 2块 定时范围 1~5999min CitriTest 桔青霉素亲和柱 --适用指标：桔青霉素 使用对象 CitriTestTM 免疫亲和柱是美国 VICAM 公司研发生产的检测桔青霉素专用亲和柱，适用于检测红曲粉和玉米中桔青霉素的定量方法。由于采用了先进的生物技术，该方法可以检测出桔青霉素的含量，而不使用有毒的溶剂如氯仿和二氯甲烷。CitriTestTM HPLC 试验方法速度快、操作简单、准确性高，对提高食品的质量和安全性起到十分重要的作用。 检测原理： 桔青霉素是一种由青霉菌属和曲霉菌属中多种真菌产生的天然代谢产物，可导致肾脏及肝脏损害。桔青霉素已被证实为肝脏的致突变原并且研究显示其可能同时还是地方性巴尔干肾病和猪肾病的致病原。将样品与提取液混合、匀浆、过滤，然后将滤液过CitriTestTM HPLC柱，柱内含桔青霉素的特异性抗体。随即，桔青霉素将键合在分离柱中的抗体上。然后通过淋洗，去除免疫亲合柱上的杂质。随后使用洗脱液过柱，将桔青霉素从抗体上分离下来。从柱中流出的洗脱液随即注入 HPLC 系统进行检测分析。 主要优点： 专属-专门用于HPLC， UPLC或MS-HPLC 稳定-保质期长，不需冷藏运输和保存 快速-处理一个样品约20分钟 范围-10-500ppb 应用-红曲红，玉米，大米等。 配套清单： C/N编号 物品 G1070 CitriTestTM HPLC柱(25/盒) 31240 VICAM横纹滤纸，24cm (100) 31955 微纤维滤纸，1.5um， 11cm(100) 34000 Disposable Cuvettes 一次性测试管 (250/包) 桔青霉素标准品(1MG) 22022 6位泵流操作架，包括以下部件： 1、一个6位操作架。2、一个空气泵。3、6个10ml玻璃注射器。4、连接头和塑料软管各6个。) 20202 带1.1升不锈钢均质杯的均质器(转速：22000转/分钟) 20656 1ml微量移液器 Tip (100) G1112 10倍浓度 PBS/0.1%吐温洗液(150mL/瓶) G1113 10倍浓度 PBS 缓冲液 (150mL/瓶) FAPAS@V有证标准样品 QC编号 基质 分析项目 有效期 规格 备注 T07242QC Edible Oil 食用油 Arsenic (total)， Copper，Lead 砷，铜，铅 10-Jul-2018 100g TET034RM Powdered BrownRice 褐米粉 arsenic (total)， arsenic (inorganic)， cadmium，lead& mercury (total) (all natural/low levels)砷(总)，无机砷，镉，铅，汞(总) 28-Oct-2018 50 g T05116QC Animal Fat (Pork)动物油脂 Pesticides & PCBs农药残留 31-Oct-2018 50g T17168QC Animal Feed动物饲料 Ochratoxin A赭曲霉毒素A 19-Oct-2020 55g T04272QC Animal Feed (cerealbased)动物饲料 Mycotoxin Contamination多种真菌毒素 06-Aug-2019 200g T04288QC Animal Feed (cerealbased)动物饲料 Aflatoxins B & G &/or total黄曲霉毒素B和G或总量 04-Feb-2020 55g T04299QC Animal Feed (cerealbased)动物饲料 Aflatoxins B & G &/or total黄曲霉毒素B和G或总量 14-Sep-2020 55g T10146QC Poultry Ration 家禽饲料 Moisture， Ash， Total Oil，Protein， Crude Fibre， Calcium， Phosphorus 水分，灰分，总油、蛋白质、粗纤维、钙、磷 17-Nov-2020 200g T17181QC Flour面粉 ochratoxin A & citrinin赭曲霉毒素和桔青霉素 27-2-2018 50 ml 若需更多样品，请来电咨或邮件 leifh@clovertek.com 咨询。 实验室常规仪器 移液产品 电动移液器 手动移液器 真空吸液器 连续分配器 稀释分配仪 电子瓶口分液器 温控产品 PCR 热循环仪 恒温金属浴 恒温振荡器 蒸馏与混合 旋转混匀仪 磁力搅拌器 均值分散机 摇床系列 离心机 掌上离心机 高速微量离心机 多用途临床离心机 若需了解更多，请来电或邮件咨询。 联系方式：400-6677-658 全国办事处：河北：18001023651 山西：：115234034295 江苏：18602041682四川：18628913557 吉林：13810420007 甘肃：13619353292河南：：15638276916 湖北：：118674001328 湖南：15886540207广西：18677187917 山东：13869828755技术支持：雷丰华(leifh@clovertek.com， 18001023656) 吴子豪(wuzh@clovertek.com 18910223635) 公司网址： www.clovertek.com.cn 邮箱： info@clovertek.com 服务总机： 什么是桔青霉素？桔青霉素是青霉属和曲霉属的某些菌株产生的真菌毒素，于1931年首次被分离纯化。1979年Carlton将其作为抗菌素进行检测时，发现它对实验动物具有显著的肾脏毒性。 后来，又发现它能引起许多动物的肾脏毒害 ，并有致癌性 。调查发现一些桔青霉素的产生菌在自然界分布广泛 ，经常引起纤维的降解以及玉米 、大米等农作物的霉变 。近年来 ，桔青霉素在食品中的污染问题越来越引起人们的关注 。在1991年法国里昂召开的真菌毒素和地方肾病与泌尿道肿瘤研讨会上，讨论了桔青霉素在 Balcan地方肾病发生中的作用 ，引起了国际癌症研究会的高度重视 。当年，桔青霉素被国际生命科学院自然毒素检测委员会欧洲分会列为必须检测的毒素之一。桔青霉素的产生及其自然分布 有多种青霉属真菌和曲霉属真菌能在自然或人工条件下产生桔青霉素。如青霉中的纠缠青霉、瘿青霉、黄青霉、点青霉、扩展青霉 、詹森青霉等，曲霉有土曲霉、白曲霉和红曲霉等。其中桔青霉是自然界中最重要的桔青霉素产生菌。桔青霉在自然界中分布广泛，在温暖的气候条件下生长繁殖迅速。它经常和纤维的降解，玉米、大米、面包等农产品或食品的霉变有关。在大米中及大米的产地该菌是普遍存在的。近年的调查研究发现：在许多农产品如玉米、大米、奶酪、苹果、梨和果汁等食品和农产品中都有可能检测到桔青霉素，和分离到产桔青霉素的菌株，不同的菌株之间产毒能力和产毒条件差异很大，为预防和控制 带来了困难。因此，桔青霉素引起的污染问题越来越受到人们的关注。 红曲霉产桔青霉素问题及控制措施 1995年法国学者Blanc证实某些红曲霉菌株也能产生桔青霉素。这一发现在食品界引起了不小的震动。 在我国，利用红曲霉发酵生产食品和药品已有上千年的历史，许多传统食品如：红曲米、红曲酒、粉蒸食品和腐乳等深受人们的喜爱。红曲霉的代谢产物中有许多在食品、医药和化工中很有价值的发酵产物。如品质优异、着 色性好、色调丰富的天然红曲色素；能显著抑制胆固醇合成、降低血脂含量的莫那可林 (MonacolinK)和洛伐它丁(Lovastain)；还有含量非常丰富的麦角固醇、长链脂肪酸及多种抗菌活物质。 20世纪90年代初，欧美、日本等国对我国的食用红曲 、药用红曲及其相关产品需求猛增，给我国的红曲生产厂家带来了可观的经济效益。桔青霉素的存在不仅使我国的红曲产品出口受到损失，还严重地威胁到人们的健康。日本厚生省在1999年版“食品添加剂标准”中规定红曲色素中的桔青霉素的含量须低于0.2ug/g，德国等西方国家也都制定了针对我国出口的红曲相关产品的新标准，规定桔青霉素的含量必须低于规定值，否则严禁进口销售 。 我国对桔青霉素的要求 我国国家卫生和计划生育委员会发布的《食品安全国家标准 食品添加剂 红曲红》（标准号：GB1886.181.2016）中也对桔青霉素提出了明确的要求。我们根据此要求汇编了完整的检测解决方案，以供大家参考。