细胞中单细胞铺板检测方案(流式细胞仪)

单细胞铺板新选择 传统的细胞铺板一般采用手动的有限稀释法来进行，这种方法在需要的操作简单，只需要普通的排枪就能实现，但是效果却很不理想。主要体现在：：一致性差，有效孔比例低下，耗费时间等。 近年来，单抗药物的开发领域又被推上了一个新的高度，越来越多的公司都纷纷投入到这个热潮当中，随之而来的相关法规的要求也是越来越严格。在众多的要求当中， FDA 对药物来源的单克隆源性的要求非常严格，这就要求生产和研发的企业在细胞株开发阶段做到严格的单克隆验证。目前市面上已经有几款孔板扫描设备能够得到 FDA 的认可，他们的数据可以用来作为单克隆源性的证明。在这里我们要讨论的是在验证前的分离阶段，如何快快、准确、高效的获得单细胞。除了上面提到的有限稀释法之外，昂贵的流式细胞分选仪也可以用来作为单细胞铺板工具之一，当然流式除了操作复杂，需要专人维护之外，分选得到的细胞常常复苏比例比较低。在流式分选中，细胞的损伤比较大。 Namocell1 自单细胞分离仪为细胞铺板提供了全新解决方案。该设备采用最新的微流体专利技术能够实现快速，高效，准确的细胞铺板工作。并且分离过程轻柔，不会影响细胞的后续生长。能广泛应用于单抗开发中的 CLD 环节，以及单细胞测序等。 Namocell 细胞分离的基本工作原理 Namocell单细胞分离用于细胞铺板的原理如下： 将细胞通过一次性的芯片上端加样孔，注入到芯片腔体中。单细胞流在微流控通道中流过激光检测区域，机器能对细胞进行识别，去除掉细胞碎片，死细胞以及状态较差的细胞，使得最终落到孔板中的细胞都具有很好的活性。高速电子阀门能够精确捕获每一个活性细胞，最终形成1ul 体积的液滴，轻柔地落进孔板中。整个过程对细胞的损伤可以忽略不计，所以分选得到的细胞绝大多数的细胞都能再次分裂生长。 整个过程非常快速，一般一块9孔板分选需要 1min 左右，单个细胞一个孔的比例在85%~90%， 一般细胞复苏的比例在 40%~65%(复苏比例跟细胞本身有很大关系)。 该方式的特点 轻柔分选：鞘液压力2psi，提高分选细胞活性 灵活分选：可以根据荧光条件筛选，也可以不染色直接铺板 无菌分选：一次性芯片，保证样本之间完全隔离；仪器体积小巧，可置于超净台中 高效分选：96孔板分选不到 1min， 384 孔板 4min 以内，单克隆率超过95% 轻松分选：仪器操作简单，无需专人操作维护 单细胞铺板新选择传统的细胞铺板一般采用手动的有限稀释法来进行，这种方法在需要的操作简单，只需要普通的排枪就能实现，但是效果却很不理想。主要体现在：一致性差，有效孔比例低下，耗费时间等。近年来，单抗药物的开发领域又被推上了一个新的高度，越来越多的公司都纷纷投入到这个热潮当中，随之而来的相关法规的要求也是越来越严格。在众多的要求当中，FDA对药物来源的单克隆源性的要求非常严格，这就要求生产和研发的企业在细胞株开发阶段做到严格的单克隆验证。目前市面上已经有几款孔板扫描设备能够得到FDA的认可，他们的数据可以用来作为单克隆源性的证明。在这里我们要讨论的是在验证前的分离阶段，如何快速、准确、高效的获得单细胞。除了上面提到的有限稀释法之外，昂贵的流式细胞分选仪也可以用来作为单细胞铺板工具之一，当然流式除了操作复杂，需要专人维护之外，分选得到的细胞常常复苏比例比较低。在流式分选中，细胞的损伤比较大。Namocell单细胞分离仪为细胞铺板提供了全新解决方案。该设备采用最新的微流体专利技术能够实现快速，高效，准确的细胞铺板工作。并且分离过程轻柔，不会影响细胞的后续生长。能广泛应用于单抗开发中的CLD环节，以及单细胞测序等。Namocell单细胞分离用于细胞铺板的原理如下：将细胞通过一次性的芯片上端加样孔，注入到芯片腔体中。单细胞流在微流控通道中流过激光检测区域，机器能对细胞进行识别，去除掉细胞碎片，死细胞以及状态较差的细胞，使得最终落到孔板中的细胞都具有很好的活性。高速电子阀门能够精确捕获每一个活性细胞，最终形成1ul体积的液滴，轻柔地落进孔板中。整个过程对细胞的损伤可以忽略不计，所以分选得到的细胞绝大多数的细胞都能再次分裂生长。整个过程非常快速，一般一块9孔板分选需要1min左右，单个细胞一个孔的比例在85%~90%，一般细胞复苏的比例在40%~65%（复苏比例跟细胞本身有很大关系）。轻柔分选：鞘液压力2psi，提高分选细胞活性灵活分选：可以根据荧光条件筛选，也可以不染色直接铺板无菌分选：一次性芯片，保证样本之间完全隔离；仪器体积小巧，可置于超净台中高效分选：96孔板分选不到1min，384孔板4min以内，单克隆率超过95%轻松分选：仪器操作简单，无需专人操作维护