食品中花青素检测方案(液相色谱柱)

花青素是水溶性植物色素，它使水果、花朵和植物呈现红色、蓝色和紫色。花青素的HPLC 和HPLC-MS 分析可用于不同种类水果的指纹鉴定，并可辅助鉴别果汁的真伪。由于花青素作为食品抗氧化剂可能具有保健作用，因此人们对其研究的兴趣越来越浓。自然界中已发现300 多种不同结构的花青素。花青素是一类黄酮类化合物，属于广泛分布的植物多酚类物质。黄酮醇类、黄烷-3-醇类、黄酮类、黄烷酮类和黄烷酮醇类是另外的黄酮类化合物，它们与花青素的氧化态形态不同。花青素的定性和定量分析，可用于鉴别不同的蓝莓品种，并鉴定它们的质量。因此农业和酿酒业对花青素色谱分析分离的重视日益增加。最近对花青素作为抗氧化剂/抗癌剂医用价值的研究，也已引起了人们对其色谱分离的兴趣 [1]。传统上，在这些分离中使用的低pH流动相（含甲酸）会引起色谱柱的降解和分离中的变化 [2]。Agilent ZORBAX StableBond SBC18色谱柱能够给色谱工作者提供在反相色谱分析中极低pH 条件下的长期稳定性。许多报道的方法都采用了50 mL/L (5%) 甲酸或30 mL/L (3%) 磷酸做流动相。在文中，使用Agilent Poroshell 120SB-C18 色谱柱，并按比例调整甲酸和磷酸的用量。应用这种新方法对一些水果和果汁样品进行了分析，包括蓝莓、黑莓、小红莓、草莓和石榴汁等。与常规的全多孔填料色谱柱相比，表面多孔填料HPLC 色谱柱具有众多优势。表面多孔的Agilent Poroshell 120 SB-C18，粒径2.7 μm 色谱柱拥有与Agilent ZORBAX StableBond SB-C18 色谱柱相似的选择性。使用Poroshell 120 SB-C18 色谱柱对花青素进行分析，结果表明在减少每个样品溶剂消耗的同时可进行更快速分析。将这一分析应用到区分植物品种 [4]或分析成百个每个样品需要超过1 小时运行时间的各种食物样品 [10, 12] 时，我们可以很容易地感受到分析更快速及更少溶剂消耗的重要性。这样可以节省大量时间或允许同等时间内鉴别更多植物品种。用甲酸作为流动相添加剂将可以联用质谱进行组分的进一步鉴定。