绿茶中儿茶素和咖啡因检测方案(液相色谱仪)

緒論    多酚類化合物可降低罹患心臟疾病的風險、預防癌症，並對抗其他疾病，而新鮮茶葉與綠茶是常見的多酚來源，兒茶素的含量很高。兒茶素會影響茶的顏色與味道，茶的特殊苦味即是兒茶素所致[1]。茶中的兒茶素，以表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechingallate) 最值得注意，因為是茶的萃取物中，含量最高的多酚類化合物[2]。雖然各種類別的茶，均來自相同品種的茶樹Camellia sinensis，但不同的加工處理方式，就會產生不同類別的茶。茶的類別，是由茶葉採收後的發酵（氧化）時間所決定。茶葉採收後，若未儘快乾燥，很快就會枯萎及氧化。此時茶葉的葉綠素會分解，釋出鞣質，導致茶葉變黑。而加熱茶葉會停止氧化，並將分解葉綠素的酵素去除活性，此過程會持續特定一段時間。紅茶為完全發酵茶，烏龍茶為半發酵茶，而綠茶為不發酵茶[3,4]。由於發酵會降低兒茶素的含量，因此每份綠茶的兒茶素抗氧化劑含量最多，而紅茶最少。    本應用範圍備註中，Yoshida 等人[5] 利用安捷倫ZORBAX SBC18管柱開發用於檢測茶中兒茶素的HPLC 分析法，移轉至相同尺寸的安捷倫Poroshell 120 SB-C18 管柱後，選擇性幾乎不變。本分析法經過了改善，確能適用於LC/MS，並製作校正曲線，分析罐裝茶及沖泡茶的樣品，以進行比較。另外並實施使用壽命研究，以未稀釋、未過濾的沖泡綠茶樣品，證實裝有大型2 μm濾片的Poroshell 管柱具備優勢，能直接注入不乾淨樣品。以HPLC 分析茶飲並非創舉，但此分析法足以證實Poroshell120 管柱分析其他天然產品樣品的效用。本分析證實Poroshell120 管柱可分析一組10 種結構非常相似的化合物，包含4 對差向異構物。這4 對差向異構物採用價格平庸，又容易取得的樣品做為代表。結論    分析綠茶中兒茶素的現有HPLC 分析法，已自全多孔性顆粒充填的1.8 μm 安捷倫ZORBAX SB-C18 管柱，成功移轉至表面多孔性顆粒充填的2.7 μm 安捷倫Poroshell 120 SB-C18 管柱。兩種管柱的選擇性幾乎相同，不需調整分析法，分離10 種化合物的結果便能相同。所有成分的校正曲線，線性程度均相當高，因此各種罐裝茶與現泡茶，均能測定其兒茶素含量，並加以比較。本分析亦使用Poroshell 120 管柱中較大型的2 μm 濾片，進行使用壽命試驗，結果顯示，高壓注入不乾淨的樣品1500 次以上後，不影響層析結果。