短肽型肠中蛋白质检测方案(定氮仪)

SINEO新仪K-305-201711 K-305-201711 凯氏定氮法测定短肽型肠内营养剂中蛋白质含量 1前言 短肽型肠内营养剂，适应症为本品适用于胃肠道功能有损失，而不能或不愿进食足够数量的常规食物以满足机体营养需求的应进行肠内营养治疗的病人。作为营养物质，短肽型肠内营养剂含有丰富的蛋白质。常规的蛋白质测定方法有凯氏定氮法，分光光度法以及燃烧法，其中以凯氏定氮法应用最为广泛。但传统的玻璃仪器具有操作繁琐，耗时长，危险性高等缺点。本文采用《中国药典》2015年版中氮定定法第三法以全自动凯氏定氮仪进行实验，操作简单，测得结果平行性良好。 2仪器与试剂 2.1仪器 K1100F 全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪 2.2试剂 硫酸(分析纯)、硼酸(分析纯)、氢氧化钠(分析纯)、溴甲酚绿-甲基红混合指示剂、催化剂片(3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片)、0.1mol/L硫酸标准滴定液等。 3实验部分 3.1取样 称取样品0.3g(精确至0.1mg))，，加催化剂一片(或硫酸钾3g与硫酸铜0.2g)，再加硫酸10mL。同时做空白实验。 3.2消解 利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消解过程设定消解温度参数如下表： 温度(℃) 时间(min) 1 200 15 2 420 60 3.3上机测试 待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下： 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蒸汽流量 25mL 30mL 35mL 5min 100% 4结果与讨论 4.1实验结果：仪器自动滴定并计算，计算公式如下： 蛋白质含量P%=N%×6.25 式中：C-标准酸摩尔浓度(mol/L) W-样品质量(g) Vo-空白样滴定标准酸消耗量(mL) V-样品滴定标准酸消耗量(mL) 6.25-样品蛋白系数 编号 取样量(g) 氮含量(%) 蛋白质含量(%) 平均值(%) RSD(%) 1 0.3009 2.4274 15.1712 15.100 0.49 2 0.3001 2.4039 15.0244 3 0.3014 2.4167 15.1044 4.2实验结论 通过以上测得数据可知，利用全自动凯氏定氮仪测定短肽型肠内营养剂中的粗蛋白质含量平行性良好，且具有操作简单，安全性高，节省人力等优点。 ( 参考文献 ) ( [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].三部.北京：中国医药科技出版社，2015：通则 49. ) -- -- 1前言短肽型肠内营养剂，适应症为本品适用于胃肠道功能有损失，而不能或不愿进食足够数量的常规食物以满足机体营养需求的应进行肠内营养治疗的病人。作为营养物质，短肽型肠内营养剂含有丰富的蛋白质。常规的蛋白质测定方法有凯氏定氮法，分光光度法以及燃烧法，其中以凯氏定氮法应用最为广泛。但传统的玻璃仪器具有操作繁琐，耗时长，危险性高等缺点。本文采用《中国药典》2015年版中氮测定法第三法以全自动凯氏定氮仪进行实验，操作简单，测得结果平行性良好。2 仪器与试剂2.1仪器K1100F全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪2.2试剂硫酸（分析纯）、硼酸（分析纯）、氢氧化钠（分析纯）、溴甲酚绿-甲基红混合指示剂、催化剂片（3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片）、0.1mol/L硫酸标准滴定液等。