魔芋多糖中乙酰取代度检测方案(紫外分光光度)

科捷仪器KEJIEINSTRUMENT电话：139-5161-2855网址： www.kj17.com QQ：2326515893 紫外分光光度法测定魔芋多糖中乙酰取代度 在一些天然多糖和改性多糖(如魔芋多糖、芦荟多糖，，E以及乙酰化的淀粉、纤维素等)中常存在不同程度的乙酰化修饰，乙酰基的取代位置和取代度是其结构和性能表征的重要参数，对多糖的理化性质和生物活性具有重大影响。例如，天然的魔芋葡甘露聚糖(KGM) 中每19个多糖单元中约含有1个乙酰基取代，乙酰化改性对其溶解度、吸水性、水溶胶的形成等性质和功能有着显著作用。 测定多糖乙酰取代度的常用方法是皂化法和羟胺比色法。皂化法是在过量的碱性条件下(pH8.5以上)将样品(约0.5-1g)中乙酸酯完全水解(约72h)，然后用标准酸来滴定剩余的碱即可测定出乙酰基的含量；该法较为简便，但所需样品量大，耗时长，对低取代度多糖的测定值相对误差较大。羟胺比色法最初用于医学检验上血液中乙酰胆碱等的测定，是利用强碱条件下游离出来的乙酰基与羟胺反应生成乙酰肟羟酸，再与Fe+生成可溶性红色络合物羟肟酸铁，即可利用分光光度计进行乙酰基取代度测定；该法较为简便快捷，灵敏度高，适用范围较广。 仪器准备 UV1700系列紫外可见分光光度计 UV1700PC UV Visible Spectrophotometer 简介：本产品采用全新设计的比例监测双光束学系统，具有优良的光学性能，使用方便，是实验室分析必备的基本仪器之一。 应用领域：各种涉及水和废水分析领域的通用仪器，应用范围包括市政和工业废水、饮用水、加工过程用水、地表水、冷却水和锅炉补给水等。 传真：025-83738955 南京科捷分析仪器有限公司 样品处理： 精确吸取一定量的多糖溶液于 50mL 棕色量瓶中，准确加入0.1mol L-1新配盐酸羟胺溶液 5mL， 加入1.5mol L-1氢氧化钠溶液5ml，混匀，静置20min后，加入2mol L-1盐酸3.5ml以中和过量的碱，混匀后静置20min，滴加显色剂 0.37mol L-1三氯化铁溶液10mL，混匀，用去离子水定容，静置10min 后，取2.5mL，置1cm石英池中，于500nm波长处测定吸光度；另以相同量的去离子水代替多糖溶液同法操作，作为空白对照 测定结果： 图1紫外吸收图谱 Fig1 UV spectrum 1.对照品溶液(reference substance solution) 2空白溶液(blanksolution) ( 传真：0 2 5-8373895 5 南京科捷分析仪器有限公司 司QQ：2326515893 ) 在一些天然多糖和改性多糖（如魔芋多糖、芦荟多糖，以及乙酰化的淀粉、纤维素等）中常存在不同程度的乙酰化修饰，乙酰基的取代位置和取代度是其结构和性能表征的重要参数，对多糖的理化性质和生物活性具有重大影响。例如，天然的魔芋葡甘露聚糖（KGM）中每19个多糖单元中约含有1个乙酰基取代，乙酰化改性对其溶解度、吸水性、水溶胶的形成等性质和功能有着显著作用。