鱼肉中喹乙醇检测方案(固相萃取)

水产品中喹乙醇检测的固相萃取方法 实验目的 本研究利用固相萃取取为样品前处理方法， HPLC作为分析方法，检测水产品样品中的喹乙醇的残留水平。该方法操作简便，可简化样品前处理过程，减少有机溶剂的使用。 二、 实验目标物 喹乙醇(CAS：23696-28-8)。 三、 应用范围 本方法适用于水产品中喹乙醇的检测的 HPLC 检测及确证。 四、 参考标准 《GB/T8381.7-2009饲料中喹乙醇的测定高效液相色谱法》。 五、 实验材料 RONCHON HLB 固相萃取柱 60mg/3mL(20301 HB00603)。 六、 实验方法 1、 样品提取 准确称取5g匀浆鱼肉试样(精确到0.001 g)于50mL 具塞塑料离心管中，加入35mL甲醇-水溶液(5：95， v/v)，离心管置入摇床中，室温下恒温振荡器振荡速度 110 r/min， 避光振荡 45 min。提取液在 3500 r/min 下离心 10 min， 上清液经滤纸过滤，滤液加入10mL正己烷，充分混匀后，以5000 r/min 离心 10 min， 弃取上层溶液，下层溶液待净化。 2、 SPE 柱净化 (1)活化：HLB固相萃取柱使用前依次使用3mL甲醇和3mL水活化。 (2)).上样和洗脱：将待净化液的样品清液加入已活化好的固相萃取柱中，以1mL/min的流速过柱，弃去滤液。依次用3 mL 0.02 mol/L 盐酸溶液、0.1 mol/L 盐酸溶液、甲醇-水溶液(5：95，v/v)淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液， 用吸耳球吹出小柱中残留液。用5mL甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。 (3)重新溶解：洗脱液于40℃氮吹吹干，用2mL甲醇定容， 0.22 um 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。 3、 HPLC条件 设备： Waters Alliance 2695 色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm) 检测器： Waters 2487 紫外检测器 检测波长：380nm 流动相： A：甲醇 B： 0.1mol/L甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱 表1梯度洗脱条件 时间/min A/% B/% 0 15 85 3 15 85 7 70 30 12 70 30 16 15 85 20 15 85 流速：1mL/min 进样体积：20pL 七、实验结果 1、鱼肉基质中喹乙醇的2mg/kg添加回收结果 表2 鱼肉基质中喹乙醇的2mg/kg添加回收结果 目标物 回收率(%) 平均 回收率(%) RSD(%) 1 2 3 喹乙醇 90.3 88.7 85.5 88.1 2.77 2、添加水平为2mg/kg鱼肉中喹乙醇检测色普图 图1添加水平为2mg/kg鱼肉中喹乙醇检测色谱图 1 喹乙醇 1 本研究利用固相萃取作为样品前处理方法，HPLC作为分析方法，检测水产品样品中的喹乙醇的残留水平。该 方法操作简便，可简化样品前处理过程，减少有机溶剂的使用。