动物源食品中氯霉素检测方案(固相萃取)

动物源食品中氯霉素残留检测的固相萃取方法 实验目的 本法为以 RONCHON HLB(60mg/3mL)柱开发的针对动物源食品(禽肉、畜肉和水产品)中氯霉素样本前处理净化方法， HPLC 法作为检测手段。CopureTM HLB(60mg/3mL)柱净化效果良好，回收率满足测试要求，重现性好，与知名厂商同型号柱性能相当。 二、 实验目标物 氯霉素(CAS：56-75-7) 三、 应用范围 本方法适用于动物源性食品(禽肉、畜肉和水产品)中残留药物的的测。 四、 参考标准 《农业部1025号公告-21-2008动物源食品中氯霉素残留检测气相色谱法》。 五、 实验材料 RONCHON HLB(PEP)聚苯乙烯/二乙烯苯固相萃取柱，货号20301HB00603；W品牌 HLB 固相萃取柱 60mg/3mL。 六、 实验方法 1、 样品提取 取5±0.05g猪肉样品，于50mL离心管中，加入20mL乙酸乙酯混合2 min， 4000 r/min离心15min， 取上清液于另一离心管中，再用20 mL乙酸乙酯重复提取残渣1次，合并两次提取液，并加入500 uL氨水，于45℃旋转蒸发近干，加入500 uL甲醇混合1min， 加入10 mL4%NaCI 涡旋混匀 10s， 加入10 mL正己烷摇匀20次，4000 r/min 离心5 min，弃去上层，再用10mL 正己烷脱脂一次，最后加入500 uL 氨水混匀供上柱净化用。 2、 SPE 柱净化 (1)活化：依次用2mL甲醇、2mL水活化。 (2)上样和洗脱：取上述备用液重力作用下过柱依次用 2 mL水、1mL甲醇/乙腈/水/氨水(15：15：65：5，v/v)淋洗上样柱并抽干，最后用2mL5%氨化甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。 (3)重新溶解：收集洗脱液，于45℃氮气吹干，准确加入1.0 mL 甲醇/水(4：6，v/v)溶液溶解残余物混匀，0.22 um 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 3、HPLC条件 设备 ： Waters Alliance 2695 检测器： Waters 2487 双波长检测器；检测波长：278nm 色谱柱： Welch Ultimate XB-C18 (250×4.6mm， 5 um) 流动相：A：水B：甲醇 洗脱方式：等度洗脱，甲醇：水=40：60(v/v) 流速：1.0mL/min 柱温：30℃ 进样量：20uL 七、 实验结果 1、 添加水平为 0.5mg/kg 猪肉基质中氯霉素(CAP)的添加回收结果 表1添加水平为0.5mg/kg猪肉基质中氯霉素(CAP)的添加回收结果 名称 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 氯霉素(CAP)| 92.6 89.0 87.0 89.5 3.2 表2 W品牌同型号柱，添加水平为0.5mg/kg猪肉基质中氯毒素(CAP)的添加回收结果 名称 回收率(%) 平均 回收率(%) 1 2 氯霉素(CAP) 90.8 91.4 91.1 2、添加水平为0.5mg/kg猪肉基质中氯霉素(CAP)检测色谱图 图1添加水平为0.5mg/kg猪肉基质中氯霉素(CAP)检测色谱图 分钟 本法为以RONCHON HLB(60mg/3mL)柱开发的针对动物源食品(禽肉、畜肉和水产品)中氯霉素样本前处理净化 方法，HPLC法作为检测手段。Copure™ HLB(60mg/3mL)柱净化效果良好，回收率满足测试要求，重现性好，与知名厂商同型号柱性能相当。