脱氢乙酸中含量分析检测方案(液相色谱柱)

《GB/T 23377-2009食品中脱氢乙酸的测定高效液色色谱法》的分析 脱氢乙酸无嗅、无味，作为一种广谱防腐剂，在酸、碱条件下，均有一定的抗菌作用，特别是对霉菌和酵母菌的抑菌能力强，被广泛应用于果汁、腐乳、酱菜、人造奶油、乳酸菌饮料、果酱、糕点、复合调味料等食物中。 脱氢乙酸 本次实验选用中等极性通用型 CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6 mm i.d. × 250 mm色谱柱，按照国标方法《GB/T 23377-2009 食品中脱氢乙酸的测定高效液相色谱法》对脱氢乙酸标准品进行分析，得到结果如图1所示，脱氢乙酸保留时间为 11 min 左右，理论塔板数为12400，色谱峰形略前延，不对称因子0.81。 Minutes 图1 脱氢乙酸标准品分析图 注：峰上标数字从下至上依次为理论塔板数和不对称因子。 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6 mm i.d. ×250 mm 流动相： 甲醇+0.02mol/L乙酸铵(10+90，体积比) 流速： 1.0 mL/ min 柱温： 30°C 进样量： 10 pL 浓50 mg/L 检PDA293nm (资料性附录) 脱氢乙酸液相色谱图 图A.1 脱氢乙酸标准样品的液相色谱图 附图：国标方法所附标准色谱图 与国标方法所附标准色谱图对比可知， MG 色谱柱分析所得结果分析时间更短，且峰形更佳。 进一步，按照国标要求配制脱氢乙酸标准工作液，浓度分别为 1.0 mg/L、10.0 mg/L、50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L， 进行线性考察实验。对各标准工作液按照国标方法进行分析，以浓度为横坐示，以峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线，如图2所示， R2=0.9992，得到良好线性结果。 250 图2脱氢乙酸标准曲线图 为解决峰形前延的问题，在原方法基础上对液相方法进行调整，尝试将流动相中的0.02 mol/L 乙酸铵溶液更换为0.1%磷酸水溶液，同时调整有机相比例。经过调整，最终结果如图3，脱氢乙酸峰形良好，不对称因子为1.00，理论塔板数为19428，峰形较原方法所得结果有明显改善。 图3脱氢乙酸标准品分析图(0.1%磷酸水：甲醇=45：55) 注：峰上标数字从下至上依次为理论塔板数和不对称因子。 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6 mm i.d. ×250 mm 流动相： 0.1%磷酸水溶液/甲醇=45/55 流速 1.0 mL/min柱 温： 30°C ( 进样量： 10pL ) 浓度 50 mg/L检PDA293nm 继续按此方法对脱氢乙酸标准工作液进行线性考察，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线，如图4所示， R2=0.9944，得到良好线性结果。 脱氢乙酸标准曲线 250 图4脱氢乙酸标准曲线图(0.1%磷酸水/甲醇=45/55) 综上，使用CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6 mm i.d.x250mm色主柱，按照《GB/T 23377-2009食品中脱氢乙酸的测定高效液相色谱法》对脱氢乙酸标准品进行分析，所得峰形略有前延，但线性良好，能够进行定量检测；同时，将流动相调整为磷酸水-甲醇体系后，峰形得到明显改善，最终得到良好分析结果。 LC Application Lab， Sanyofine China No.22， HLS Business Park，14 kechuang Street，Economic Technological Development Zone，Beijing， China 100176 Phone 400 801 3103 脱氢乙酸无嗅、无味，作为一种广谱防腐剂，在酸、碱条件下，均有一定的抗菌作用，特别是对霉菌和酵母菌的抑菌能力强，被广泛应用于果汁、腐乳、酱菜、人造奶油、乳酸菌饮料、果酱、糕点、复合调味料等食物中。本次实验选用中等极性通用型CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm色谱柱，按照国标方法《GB/T 23377-2009 食品中脱氢乙酸的测定 高效液相色谱法》对脱氢乙酸标准品进行分析，脱氢乙酸保留时间为11 min左右，理论塔板数为12400，色谱峰形略前延，不对称因子0.81。为解决峰形前延的问题，在原方法基础上对液相方法进行调整，经过调整，最终脱氢乙酸峰形良好，不对称因子为1.00，理论塔板数为19428，峰形较原方法所得结果有明显改善。