动物源性食品中莱克多巴胺检测方案(固相萃取)

青岛心成发展商贸有限公司 动物源性食品中克伦特罗等3种β-受体激动剂残留测的固相萃取 WGLabs MCX 一、实验目的 本研究利用固相萃取法作为动物源性食品(动物肌肉和肝脏)中克伦特罗(clenbuterol)、沙丁胺醇(salbutamol)、莱克多巴胺(ractompamine)等3种 受体激动剂的样本前处理净化方法， HPLC法作为检测手段。WGLabs MCX(60mg/3ml)柱净化效果良好，回收率满足测试要求，重现性好，与知名厂商同型号柱性能相当。 二、实验目标物 克伦特罗(CAS：37148-27-9)、沙丁胺醇(CAS：18559-94-9)、莱克多巴胺(CAS：97825-25-7)。 三、应用范围 本方法适用于动物源性食品(动物肌肉和肝脏)中克伦特罗(Clen)、沙丁胺醇(Sal)、莱克多巴胺(Rac)等3种β-受体激动剂残留药物的检测。 四、参考标准 《GB/T 22286-2008 动物性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法》。 五、实验材料 WGLabs MCX 固相萃取柱 60mg/3ml 六、实验方法 1、样品提取 称取2±0.01g经捣碎的猪肉样品，于50mL离心管中，加8 mL乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L， pH5.2)， 振荡提取15min，4000 r/min离心10 min， 取上清液4 mL于50mL离心管中，并加入0.1 mol/L高氯酸溶液5 mL，混合均匀，用高氯酸调节pH到1±0.3。4000 r/min离心10 min后将全部上清液转移到50mL离心管中，用10 mol/L氢氧化钠溶液调节pH到11。加入10 mL饱和氯化钠和10mL异丙醇-乙酸乙酯(6：4，v/v)混合溶液，充分提取5 min， 在4000r/min离心10 min。 转移全部有机相，在40℃水浴下氮吹干。加入5 mL乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L， pH5.2)，超声混匀，使残渣充分溶解后备用。 2、SPE柱净化 (1)活化：MCX柱依次用3mL甲醇和3mL水活化。 (2)上样和洗脱：取上述残渣溶液上柱，控制流速0.5 mL/min。后依次用2 mL水、2 mL 2%甲酸水、2mL甲醇淋洗柱子并抽干，最后用2 mL5%氨化甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。 (3)重新溶解：收集洗脱液，于40℃氮气吹干，准确加入1.0 mL 0.1%甲酸/水-甲醇(95：5，v/v)溶液溶解残余物，0.22 um滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 2、HPLC条件 设备： Waters Alliance 2690 色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (250×4.6mm ld， 5 um) 检测器：紫外249nm，荧光激发波长226nm， 发射波长306nm 流动相：A：甲醇 B：0.1%甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱 表1梯度洗脱条件 时间/min A/% B/% 0.0 10 90 8.0 48 52 15.0 48 52 15.1 10 90 22.0 10 90 流速：1.0 mL/min 柱温：30℃ 进样量：20uL 七、实验结果 1、添加水平为1.0mg/kg猪肉基质中克伦特罗(Clen)、沙丁胺醇(Sal)、莱克多巴胺(Rac)等3种β-受体激动剂的添加回收结果 表2添加水平为1.0mg/kg猪肉基质中3种β-受体激动剂的添加回收结果 名称 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 克伦特罗(Clen) 85.0 88.4 89.4 87.6 2.6 沙丁胺醇(Sal) 84.4 85.4 88.2 86.0 2.3 莱克多巴胺(Rac) 85.0 86.6 88.4 86.7 2.0 表3W品牌同型号柱，添加水平为1.0mg/kg猪肉基质中3种β-受体激动剂的添加回收结果 名称 回收率(%) 平均回收率(%) 1 2 克伦特罗(Clen) 79.9 78.4 79.2 沙丁胺醇(Sal) 86.4 84.6 85.5 莱克多巴巴(Rac) 86.9 81.8 84.4 2、添加水平为1.0mg/kg猪肉基质中三种β受受体激动剂检测色谱图 图1沙丁胺醇和莱克多巴胺的荧光色谱图 图2克伦特罗的紫外色谱图 本研究利用固相萃取法作为动物源性食品（动物肌肉和肝脏）中克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺等3种β-受体激动剂的样本前处理净化方法，HPLC法作为检测手段。WGLabs MCX(60mg/3ml)柱净化效果良好，回收率满足测试要求，重现性好。具体操作步骤详见附件！！！