猪肉中麻保沙星检测方案(固相萃取)

青岛心成发展商贸有限公司 猪肉中兽药多残留检测的固相萃取方法 WGLabs HLB 一、实验目的 本研究针对猪肉中多种兽药残留同时检测的目的，开发了经过优化的固相萃取前处理方法和HPLC分析方法。待测物质为主要的抗生素兽药种类中具有代表性的化合物，包括磺胺类、四环素类、喹诺酮类、氯霉素类。 二、实验目标物 麻保沙星 (CAS：115550-35-1)，双氟沙星 ( CAS：98106-17-3)，土霉素(CAS：79-57-2)，氟苯尼考(CAS：73231-34-2)，磺胺多辛(CAS：2447-57-6)，磺胺间二甲氧嘧啶(CAS：155-91-9)，氯霉素(CAS：56-75-7)。 三、应用范围 本方法适用于猪肉中多种兽药残留的检测的HPLC检测及确证。 四、实验材料 WGLabs HLB 固相萃取柱60mg/3ml 五、实验步骤 1、样品提取 准确称取猪肉3 g于50 mL离心管中，加入0.1 mol/L的EDTA-Mcllvaine溶液15 mL， 漩涡摇匀1 min， 冰水浴超声10 min， 控制样品温度<15℃；5000 r/min离心8 min。取上清液，重复提取一次，合并清液、快速滤纸过滤，备用。 2、SPE柱净化 (1)活化：HLB固相萃取柱使用前用3mL甲醇、3mL水活化。 (2)上样和洗脱：在HLB固相萃取柱上加入10 mL备用样液，弃去流出液，，用用3mL5%甲醇水溶液(v/v)淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；用8mL甲醇-乙酸乙酯溶液(1：9，v/v)洗脱，收集洗脱液(整个上样、洗脱过程保持流速2mL/min)。 (3)重新溶解：先脱液40℃氮吹吹干，1mL甲醇定容，过0.45 pm滤膜，上机测试。 3、HPLC条件 设备： Waters Alliance 2690 色谱柱： Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5 pm) 检测测： Waters 2487 紫外检测器 流动相：A：乙腈B：0.1%甲酸水溶液(v/v) 洗脱方式：梯度洗脱 表1梯度洗脱条件 时间/min A(%) B(%) 0 10 90 6 10 90 29 30 70 30 100 0 36 100 0 37 10 90 42 10 90 流速：1.0mL/min 检测波长：270nm 进样体积：20 uL 六、实验结果 1、4 mg/kg猪肉中多种兽药的添加回收结果 表24mg/kg猪肉中多种兽药的添加回收结果 名称 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 氟苯尼考 98.67 104.30 104.15 102.37 3.13 土霉素 113.40 110.75 108.75 110.97 2.10 氯霉素 100.56 101.20 97.73 99.83 1.85 磺胺多辛 85.56 82.86 83.18 83.87 1.76 磺胺间二甲氧嘧啶 88.60 86.20 85.00 86.60 2.12 麻保沙星 87.88 90.23 84.20 87.44 3.48 双氟沙星 84.88 92.13 93.60 90.20 5.18 2、添加水平为4 mg/kg猪肉中多种兽药检测的液相色谱图 图1添加水平为4mg/kg猪肉中多种兽药检测的液相色谱图 本研究针对猪肉中多种兽药残留同时检测的目的，开发了经过优化 固相萃取前处理方法和HPLC分析方法。待测物质为主要的抗生素兽药种类中具有代表性的化合物，包括磺胺类、四环素类、喹诺酮类、氯霉素类。具体操作步骤详见附件！！！