氨基酸中氨基酸检测方案(氮吹仪)

恒信仪器Trustworthy Instrument武汉恒信世纪科技有限公司ISO9001质量管理体系认证企业 氨基酸分析方法： 第一法 PITC 衍生氨基酸分析法 本法系根据氨基酸与异硫氰酸苯酯(PITC)反应，生成有紫外响应的氨基酸衍生物苯氨基硫甲酰氨基酸(PTC-氨基酸)， PTC-氨基酸经反相高效液相色谱分离后用紫外检测，在一定的范围内其吸光值与氨基酸浓度成正比。本方法的线性浓度范围为 0.025~1.25umol/ml。 第二法 AQC 衍生氨基酸分析法 本法系根据氨基酸与6一氨基喹啉一N一羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯(AQC)反应，生成有紫外与荧光响应的不对称尿素衍生物(AQC-氨基酸)， AQC-氨基酸经反相高效液相色谱后用紫外或荧光检测，在一定的范围内其吸光值与氨基酸浓度成正比。本方法的线性浓度范围为2.5~200nmol/ml。 第三法 OPA 和 FMOC 衍生氨基酸分析法 本法系根据一级氨基酸，在巯基试剂存在下，首先与邻苯二醛(OPA)反应，生成 OPA-氨基酸；反应完毕后，加入9-芴甲基氯甲酸甲酯(FMOC)，剩余的二级氨基酸与 FMOC继续反应，生成FMOC-氨基酸，两次反应生成的氨基酸衍生物经反相高效液相色谱分离后用紫外或荧光检测，在一定的范围内其吸光值与氨基酸浓度成正比。本方法的线性浓度范围为0.025~2.5umol/ml。 第四法 DNFB衍生氨基酸分析法 本法系根据氨基酸与2，4-二硝基氟苯(DNFB)反应，生成有紫外响应的二硝基苯-氨基酸(DNP-氨基酸)， DNP-氨基酸经反相高效液相色谱分离后采紫紫外检测，在一定的范围内其吸光值与氨基酸浓度成正比。本方法的线性响应范围为30~140 pmol。本法所用的2，4一二硝基氟苯属易爆、剧毒物质，有强致癌性，且该法对色谱柱要求较高，易损坏色谱柱，衍生试剂水解生成的2，4-二硝基苯易干扰丝氨酸的测定。除另有规定外，一般不宜采用本法。 第五法茚三酮衍生氨基酸分析法 本法系根据氨基酸经阳离子交换色谱柱分离后，与茚三酮反应，一级氨基酸生成在570nm 处具有最大吸收的紫色化合物，，二级氨基酸(如脯氨酸)生成在440nm 具有最大吸收的黄色化合物，分别在570nm 和 440nm 下检测上述反应产物，在一定的范围内其吸光值与氨基酸浓度成正比。本方法的线性响应范围为20~500 pmol。 ( 公司地址：武汉市高新区光谷大道62号光谷总部国际1-223，热线电话：4008782170，24小时服务电话13317167327 ) C 武汉恒信时代科技有限公司 CN ywi168.cn.1688co 2/9 公司地址：武河市高新区光谷大道62号光谷总部国际1-223，热线电话：4008782170，24小时服务电话13317167327 如需详细方案请致电! 公司地址：武汉市高新区光谷大道62号光谷总部国际1-223，热线电话：4008782170，24小时服务电话13317167327 1.性能(以蛋白质水解液标准分析为例，共进样5次)  1)净分析时间 约 30 分钟  2)保留时间重现性 CV0.3%(精氨酸)  3)峰面积重现性 CV1.0% (甘氨酸，组氨酸)  4)检出限 3pmol (信噪比为2，天冬氨酸)  2.氨基酸分析仪主机  1) 色谱柱 尺寸: 4.6mm ID × 60mm ；粒度：3μm ；树脂：日立专用离子交换树脂  2)输液泵 方式：微量型串联式双柱塞往复泵 ；压力： 0-29.9Mpa ；流量： 0.000-0.999ml/min(增量：0.001ml/min)  3) 自动进样器 进样方式：直接进样 ；样品瓶容积：1500μl ；样品瓶数量 ：200 (选配：带制冷装置，200) ；进样量：0.1-100μl  4) 柱温箱 方式：半导体制冷加热 ；温度设定：20-85℃(增量:1℃）；有断电和散热器过热保护装置  5)反应单元 方式：反应柱尺寸：4.6mm ID x 40mm；填充材料：金刚砂惰性材料；温度范围：50-140℃（增量：1℃）；有过热断电保护装置 6)可见光度计: 单色器：消相差凹面衍射光栅；波长：570nm,440nm(700nm参比）  3.自动支持功能1)N2自动鼓入, 2)N2压力控制, 3)茚三酮回流保护装置