豆芽中吲哚乙酸检测方案(固相萃取)

welch welch 月旭“豆芽中植物生长调节剂残留检测标准操作程序”解决方案(适用于国家食品污染和有害因素风险监测工作手册) 1、适用范围 适用于豆芽中 2，4-D-乙酯， 2，4-D-丁酯，4-氯苯氧乙酸(CPA)，2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)，β-萘乙酸，吲哚乙酸，吲哚丁酸，多效唑，激动素，6-苄基腺嘌呤(6-BA)等10种植物生长调节剂的检测。 2、原理 豆芽中10种植物生长调节剂先用酸性乙腈提取，浓缩后用甲醇复溶，部分经QuECHERS 试剂盒净化后用 GC/ MS 分析 2，4-D-乙酯2，4-D-丁酯。另一部分经MCS 固相萃取柱净化，先用5mL甲醇洗脱得组分1，再用5%氨化甲醇洗脱得组分2；：组分1浓缩后用10%三氟化硼甲醇溶液甲酯化，提取后GC/MS测定4-氯苯氧乙酸、α-萘乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸，组分2浓缩后用 GC/ MS 测定多效唑、激动素、6-苄基腺嘌呤。 3、提取步骤 (1)称取捣碎的均质豆芽10.0g于50mL离心管中，加入20 mL乙、40uL甲酸，涡旋混匀1 min， 超声提取30 min， 8000 r/min 离心5 min。 (2)上清液转移至另一支 50 mL 离心管，加入3.0g氯化钠，涡旋混匀，8000r/min 离心5 min。 Web： www.welchmat.com. welch (3)吸出乙腈层，用1g无水硫酸钠脱水后收集到圆底烧瓶，50℃水浴真空浓缩至溶液量少于0.5mL，圆底烧瓶加入2 mL甲醇超声溶解。 4、SPE 净化步骤 QuEChERS净化管：货号：00537-20020，规格300 mg/管 SPE柱：：月旭 WelchromMCS 固相萃取柱(规格：500 mg/6mL) 具体前处理净化步骤 (1)取1mL提取好的样品溶液，加入到 QuEChERS 试净化管中，混匀，静置5 min， 混匀，10000 r/min 离心 2 min， 上清液直接进 GC/MS 测定2，4-D-乙酯和2.4-D-丁酯。 (2)另取1 mL提取好的样品溶液，加入9mL 40 mmol/L HCl溶液，超声混匀，转移至离心管中，8000 r/min 离心 5 min，1，上清液待净化。 (3)先用 5 mL甲醇、5mL水、5 mL 40 mmol/L HCl 活化 MCS柱，活化结束后上清液转移到 MCS 柱内，待样液过柱后，用5mL水淋洗除杂，真空抽干柱内液体；随后加入5mL甲醇洗脱，收集于 10 mL 具塞试管内，得组分1. 组分1加入1 mL 10%三氟化硼甲衍衍生溶液，涡旋混匀，70℃加热衍生30 min，取出冷却后再加入 1.0 mL 20%乙酸乙酯-正己烷混合液和2mL纯水，涡旋混匀，4000 r/min 离心 5 min， 取出上层有机相进行 GC/MS分析，以测定4-氯苯氧乙酸(CPA)，2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)，β-萘乙酸，吲哚乙酸，吲哚丁酸。 ( F a x： 86 -21- 5 02 76769 We b： w w w .w el c h m a t.com . ) welch (4)用5 mL 5%氨化甲醇继续洗脱 MCS 固相萃取小柱，收集洗脱液，得组分2，洗脱液分别50℃下用氮气吹干。组分2用0.5 mL 甲醇溶解后进行 GC/MS分析，测定多效唑、激动素、6-BA。 5、色谱和质谱条件 (1)气质联用 DB-5MS 毛细管色谱柱(30 m*0.25mm*0.25 p.m)；进样口温度260；；柱温：：衣初温80，保持 1min， 10/min 升至300后运行2min；载气是氦气，纯度99.999%，流速1mL/min； 进样量1，电离方式：EI源，70eV；离子源温度：230；7不分流；扫描范围： m/Z 35-450 (2)液相色谱 色谱柱：：月旭Ultimate"XB C18， 4.6x250 mm，5 um； 流动相：甲醇-水(55：45 V/V'，，甲酸调pH=3.0)； 流速：1.0mL/min： 柱温35℃； 检测波长：：272nm 进样量：20uL 6.液相色谱图或加标回收率结果 ( T el： 86 - 21 - 51320 401 F ax： 86 - 21 - 50276769 W eb：ww w.wel chmat.com. ) welch 图1：三种标准品色谱图(从左到右分别为：吲哚乙酸、吲哚丁酸、β-萘乙酸， 进样浓度为： 1ug/mL) 图2：： 豆芽实际样品色谱图 Fax： 86-21-50276769 Web： www.welchmat.com. 图3：豆芽加标色谱图进样(浓度为： 1ug/g) 表1：加标回收率测定结果 样品名称 加标含量 吲哚乙酸回收 吲哚丁酸回收 β-萘乙酸回收 (mg/kg) 率(%) 率(%) 率(%) 豆芽 1 87.28% 94.49% 75.36% Fax： 86-21-50276769 Web： www.welchmat.com. 月旭色谱柱—超“月”极限 “旭”写辉煌Add： Edison Road， Building A，Zhangjiang Hi-Tech Park， Pudong Shanghai ChinaTel： ax： 近几年来，网络、报纸上不时有关于查处“毒豆芽”事件的报道，引起民众对此类豆芽食用安全问题的担忧。此类被媒体称作“毒豆芽”的豆芽里究竟都含了什么物质？这些物质有没有毒性？为什么要在发制豆芽时使用？含有这类物质的豆芽能不能吃，这些问题都是民众所关注的。 根据近几年全国各地监测机构的检测结果，查处的“毒豆芽”中通常含有植物生长调节剂的成分，俗称“无根豆芽素”、“AB粉”的物质，主要成分为赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸等。对于植物生长调节剂，国内外大多按农药来管理，与以杀灭作物虫害为目的的农药不同，用于豆芽发制的植物生长调节剂属于生长促进剂，以促进植物生长为目的，对豆芽的作用是促进豆芽茎部生长，而使芽和根部的生长受抑制，使豆芽外观鲜嫩、粗壮而无根，产量大大增加。月旭科技致力于生物医药、食品安全检测、环境监测、精细化工等关系民生并处于快速发展的行业。月旭科技的液相色谱类产品对“豆芽中植物生长调节剂”进行检测。解决方案适用于豆芽中2,4-D-乙酯，2-4-D-丁酯，4-氯苯氧乙酸（CPA），2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D），β-萘乙酸，吲哚乙酸，吲哚丁酸，多效唑，激动素，6-苄基腺嘌呤（6-BA）等10种植物生长调节剂的检测。