奶和奶制品中四环素检测方案(固相萃取)

DIKMA@Areliable partner for your lab 30 四环素类抗生素是由链霉菌产生或经半合成制得的一类碱性广谱抗生素。兽医临床上常用的有：四环素、金霉素、、土霉素和强力霉素等。许多国家对四环素类药物残留实施例行监控。我国限量规定牛奶中最高残留量为100 pg/kg. 迪马优势 参考GB/T 22990-2008牛奶和奶粉中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定液相色谱-紫外检测法， Mcllvaine 缓冲液提取四环素抗生素残留，亲水亲酯平衡固相萃取小柱ProElut PLS净化，可有效去除奶和奶制品中蛋白质干扰，回收率达80%以上，保证实验结果的准确性、重现性。 1、适用范围 适用于液态奶、固态奶制品中土霉素、四环素、金霉素和强力霉素的检测。 2、提取 液态奶取20mL， 固态奶制品类称取2g，加入20mL水稀释。加入20 mL Mcllvaine缓冲液*，涡旋混合2 min， 4，000 rpm 以上离心10 min。取20 mL上清液，作为上样液待净化。 *Mcllvaine 缓冲液(pH4.0)：称取磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)27.6 g、柠檬酸(C6H：O7H2O) 12.9 g、乙二胺四乙酸二钠盐37.2g，用水溶解后稀释并定容至1，000 mL。 3、净化争ProElut PLS 150 mg/6 mL(Cat.#68004) a活 化： 依次加入6mL甲醇和6mL水，流出液弃去； b上 将待净化液加入小柱，流出液弃去； 样c淋 洗依次用6mL水和6 mL 10%的甲醇水溶液淋洗，流出液弃去，将小柱抽干；d洗 脱： 6mL甲醇洗脱，流出液收集；e重新溶解： 40℃将洗脱液减压浓缩至近干，用流动相溶解并定容至1mL后HPLC分 析。 *由于样品量超过柱容量，应分次上样或在SPE 柱上安装20 mL 储液管 (Cat.#4811)， 适配器 (Cat.#4803) 4、色谱条件 色谱柱：Spursil C18 150x4.6 mm， 5 pm(Cat.#82001)流 速：1.0 mL/min检测器：UV 365 nm柱主温：30℃进样量：20 pL流动相：A：0.01mol/L草酸水溶液，B：乙乙/甲醇=1/1， 梯度设置 时间/Min. 0 10 10.5 20 A% 70 50 70 70 B% 30 50 30 30 5、添加回收结果 分析物 添加水平 回收率 RSD (mg/L) (%) (n*=3)/% 土霉素 0.1 88.17 4.01 0.5 83.95 2.35 四环素 0.1 89.46 0.69 0.5 90.06 3.68 金霉素 0.1 96.54 2.92 0.5 100.86 0.69 强力霉素 0.1 90.48 0.99 0.5 88.26 0.81 ^n：-平行样品的数量 牛奶中四环素类(添加水平0.5 mg/L)的液相色谱图 北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520成都：028-86612625沈阳：024-22943513济南：0531-83681355青岛：0532-83725230重庆：023-62568657石家庄：0311-66686220 相关产品信息 货号 名称 规格 样品前处理 68004 亲水亲酯平衡固相萃取小柱ProElut PLS 150 mg/6 mL， 30/pkg 244358 12管防交叉污染真空SPE萃取装置 12 位 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米，2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 4811 储液管(用于大体积上样) 20 mL， 100/PK 4803 适配器(用于连接 SPE 小柱) 1，3&6 mL， 15/PK 37180 针头式过滤器Nylon 13 mm，0.45 um 100/pk 色谱柱及保护柱 82001 极性改性反相高效液相色谱柱 Spursil C18 150×4.6 mm ID， 5 pm 6220 EasyGuard 保护柱卡套 1/pk 6803 Spursil C18保护柱芯 5 pm， 10× 4.0 mm， 2/pkg 标准品 46359 土霉素盐酸盐[2058-46-0] 100 mg 55-31741-250MG 四环素盐酸盐[64-75-5] 250 mg 56-46133-250MG 金霉素盐酸盐[64-72-2] 250 mg 55-33429-100MG 盐酸强力霉素/盐酸多西环素[24390-14-5] 100 mg HPLC 溶剂•缓冲盐•离子对试剂 50102 甲醇 HPLC级 4L 50101 乙腈 HPLC 级 4L 50132 乙酸 HPLC及 50 mL 50158 磷酸氢二钠 HPLC 级 100g 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色 50孔 52401A 瓶架/白色 50孔 5323 样品瓶(棕色/螺纹) 2mL， 100/pk 5325 样品瓶盖/含垫(已组装) 100/pk H80465 HPLC 进样针 25pL 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520