苯甲酸类防腐剂中多种成分分离检测方案(液相色谱仪)

化学性质 www.agilent.com/chem/cn 使用反相 HPLC分离苯甲酸类防腐剂应用 食品、饮料和化妆品 作者 Coral Barbas and Javier Ruperez Facultad de CC Experimentales y de la Salud， Universidad SanPablo-CEU Urbanizacion Monteprincipe Boadilla del Monte， 28668 Madrid Spain Andre Dams* Agilent Technologies， Inc. Amstelveen The Netherlands Ronald E. Majors Agilent Technologies， Inc. 2850 Centerville Road Wilmington， DE 19808-1610 USA 摘要 本文介绍了方便快速的苯甲酸类防腐剂分析方法，它是通过反相HPLC 和 ZORBAX Eclipse XDB-C18 快速分离色谱柱实现的。 引言 防腐剂是一类化学试剂，常用于防止食品、饮料和化妆品中的细菌生长。苯甲酸类防腐剂(对羟基苯甲酸酯类)的应用最为广泛。19世纪30年代人们研发了 这类防腐剂用来保持奶油的稳定。由于能够同时作为化妆品和食品防腐剂，而且价格便宜，由苯甲酸衍生而来的合成的苯甲酸甲酯、乙酯和丙酯被公认为有效和经济的防腐剂。估计99%的化妆品和身体护理类产品中含有某种苯甲酸类防腐剂。苯甲酸甲酯和丙酯被公认为安全物质 (GRAS)。然而，最近由于在肿瘤组织尤其是胸腔组织中发现了这些物质，这一防腐剂体系开始出现了问题。 药物科学杂志(Journal of Pharmaceutical Science)的一项研究揭示，6名婴儿在接受含有苯甲酸防腐剂的多剂量庆大霉素制剂后，尿样中的苯甲酸含量最高可达 82.6%。 英国的布鲁内尔大学 (Brunel University)生物和生物化学系的研究人员发现，对于苯甲酸类，最值得关注的是其对实验动物的类雌激素作用。另外，在一些疫苗中也用作防腐剂的2-苯氧乙醇(2PX)，有时也与苯甲酸类联合使用。苯甲酸类混合物具有广谱抑菌的优点，可以降低库存量水平，节约成本。处理一份足够量的液体比几份少量的粉末或液体更为方便。英国利兹 Horsforth 的 Clariant Ltd公司有一种产品Phenonip， 是苯甲酸混合物的 2PX溶液。该产品可能是最有名的苯甲酸混合物，经常被仿制。 食品和化妆品中存在哪些种类的苯甲酸类防腐剂，以及如何在痕量水平下进行分析，这是很有意义的。HPLC 就是-种分离和分析这类物质的理想方法。 2PX和苯甲酸类化合物的结构见表1。由于苯环的存在，这些化合物在极低的浓度下均能被紫外检出。因为不含离子性的官能团，这些化合物被认为是亲脂性的。因此，可以预见，这类化合物可能在脂肪组织中蓄积。苯甲酸酯类在水中微溶，溶解度随着酯的碳链长度增加而降低。例如，苯甲酸甲酯在20℃时的溶 解度为 0.25%(w/w)， 而苯甲酸丁酯的溶解度仅为0.02%(w/w)。绝大多数苯甲酸酯类易溶于乙醇、丙酮、乙醚和许多其他有机溶剂。由于这一溶解特性，非常适合应用反相色谱法 (RPC) 进行分离。在色谱文献中可以看到许多有关苯甲酸酯类反相分离方法的报道[1-4]。 表1.防腐剂的结构式和浓度 CH，OH CH.2 2PX： 2-苯氧乙醇 C OCH， MEP： 对羟基苯甲酸甲酯 HO C OC，H ETP： 对羟基苯甲酸乙酯 HO 0 CO LCH， CH. CH， PRP： 对羟基苯甲酸丙酯 HO CH， CO .CH CH， CH. IBP： 对羟基苯甲酸异丁酯 HO CO-CHg BTP： 对羟基苯甲酸丁酯 HO 色谱条件 结果与讨论 苯甲酸类混合物中各组分及2PX的分离情况如图1所示。 图1.防腐剂的反相 HPLC分离结果 样品制备只涉及甲醇对样品混合物的溶解。所有组分达到基线分离。在其它色谱柱中， MEP 和 2PX以及IBP和BTP通常很难分离，尤其是在如此短的分析时间内(16分钟)).。本方法可重现，并且具有良好的分离效能。 使用反相 HPLC 和 ZORBAX Eclipse XDB-C18快速分离色谱柱(4.6 mmx150 mm， 3.5um) 能够方便快速地进行苯甲酸类防腐剂的分析。 ( 参考文献 ) 1. Robert Ricker，“High-Speed Separation ofParabens”， Agilent Technologies，publication5988-6356EN www agilent.com/chem. ( 2. M. Borremans， J. van-Loco， P. Roos， and L. Goeyens， (2004) Chromatographia.，59(1-2)，47-53. ) 3. E. Marengo， M.C. Gennaro， and V. Gianotti，(2001)J. Chromatogr. Sci.；39(8)，339-344. 4.JJ.E. Koundourellis， E. T. Malliou， andT.A. Broussali，(2000)J. Pharm. Biomed.Anal.， 23(2-3)， 469-475. 更多信息 有关产品和服务的更多信息，请访问我们的网站www.agilent.com/chem/cn。 安捷伦公司对本材料中可能有的错误或有关装备、性能或使用这一材料而带来的偶然或间接伤害不负任何责任。 本材料中的信息、说明和指标，如有变更，恕不另行通知。 @安捷伦科技公司版权所有，2005 ( 中国印刷 ) 2005年12月16日5989-3635CHCN ：. Agilent Technologies ..Agilent Technologies