食品中Ｎ－亚硝胺检测方案(原子吸收光谱)

食品中Ｎ－亚硝胺的测定－比色法  概述：食物中的亚硝胺的来源 主要有： （１）由于腌制时盐中亚硝酸盐的作用，如咸鱼、咸肉（２）加热干燥时，空气中氮气氧化成氮氧化物的作用，如啤酒、奶粉、豆制品。所以，亚硝胺检出率最高的食品是咸鱼（尤为海产品）、啤酒、腌肉制品、奶粉及豆制品等。而新鲜蔬菜、水果及新鲜肉类检出率很低。  性质： Ｎ—亚硝酸胺的化学性质较活泼，在酸性条件下可分解为相应的酰胺和亚硝酸，在碱性条件下可快速分解为重氮烷。Ｎ－亚硝胺在紫外光照射下可发生光分解反应。 测定意义： 亚硝胺对人体有害，是一种有强致癌作用的物质。所以常常需要对食品进行亚硝胺类化合物的检验。  测定方法： 食品中挥发性Ｎ－亚硝胺类化合物的测定，可采用气相色谱－质谱联用法、气相色谱－热能分析仪法及分光光度比色法。 这里介绍分光光度比色测定法分光光度比色法测定食品中Ｎ－亚硝胺的原理：食品中挥发性亚硝胺可采用夹层保温水蒸气蒸馏加以纯化，在紫外光的照射下，亚硝胺分解释放亚硝酸 根。通过强碱性离子交换树脂浓缩，在酸性条件下，与对位氨基苯磺酸形成重氮盐，再与Ｎ－萘乙烯二胺二盐酸盐形成红色偶氮染料来测定。颜色的深浅与亚硝胺的含量成正比，此法可用于测定挥发性Ｎ－亚硝胺总量。 操作方法： （１）亚硝胺标准曲线的绘制 （２）样品制备：液体样品：根据样品中亚硝胺的含量称取样品１０．０～２０．０ｇ，移人１００ｍＬ容量瓶中，加入氢氧化钠溶液使其浓度为１ｍＬ／Ｌ，摇匀后过滤，收集滤液待测定。 固体样品，取经捣碎或研磨均匀的样品２０．０ｇ，加入正丁醇饱和的ｌｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液，移人１００ｍＬ容量瓶中，并加至刻度，摇匀，浸泡过夜，离心分离，取 清滤液待测定。 测定方法： 吸取样品的清液５０ｍＬ移入蒸馏瓶内进行夹层保温水蒸气蒸馏，收集２５ｍＬ馏出液，用３００ｇ／Ｌ乙酸调节至ｐＨ３～４。再移入蒸馏瓶内进行夹层保温水蒸气蒸馏，收集２０ｍＬ馏出液，用０．５ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠调至ｐＨ７～８。将馏出液在紫外光下照１５ｍｉｎ，通过强碱性离子（氯离子型）交换柱（１ｃｍ×０．５ｃｍ）浓缩，以少量水洗后，用１ｍｏｌ／Ｌ氯化钠溶液洗脱亚硝酸根，分管收集洗脱液（每管１ｍＬ），至所收集的洗脱液加入显色剂不显色为止。各管中加入１．０ｍＬ，ｐＨ７有磷酸缓冲溶液，０．５ｍＬ显色剂Ａ，摇匀后再加入０．５ｍＬ显色剂Ｂ，以下操作同标准曲线的绘制。根据测得的吸光值，从标准曲线中查得每管亚硝胺的含量，汇总总含量。 食品中Ｎ－亚硝胺的测定－比色法Ø概述：食物中的亚硝胺的来源主要有：（１）由于腌制时盐中亚硝酸盐的作用，如咸鱼、咸肉（２）加热干燥时，空气中氮气氧化成氮氧化物的作用，如啤酒、奶粉、豆制品。所以，亚硝胺检出率最高的食品是咸鱼（尤为海产品）、啤酒、腌肉制品、奶粉及豆制品等。而新鲜蔬菜、水果及新鲜肉类检出率很低。Ø性质：Ｎ—亚硝酸胺的化学性质较活泼，在酸性条件下可分解为相应的酰胺和亚硝酸，在碱性条件下可快速分解为重氮烷。Ｎ－亚硝胺在紫外光照射下可发生光分解反应。Ø测定意义：亚硝胺对人体有害，是一种有强致癌作用的物质。所以常常需要对食品进行亚硝胺类化合物的检验。Ø测定方法：食品中挥发性Ｎ－亚硝胺类化合物的测定，可采用气相色谱－质谱联用法、气相色谱－热能分析仪法及分光光度比色法。 这里介绍分光光度比色测定法分光光度比色法测定食品中Ｎ－亚硝胺的原理：食品中挥发性亚硝胺可采用夹层保温水蒸气蒸馏加以纯化，在紫外光的照射下，亚硝胺分解释放亚硝酸根。通过强碱性离子交换树脂浓缩，在酸性条件下，与对位氨基苯磺酸形成重氮盐，再与Ｎ－萘乙烯二胺二盐酸盐形成红色偶氮染料来测定。颜色的深浅与亚硝胺的含量成正比，此法可用于测定挥发性Ｎ－亚硝胺总量。Ø操作方法：（１）亚硝胺标准曲线的绘制（２）样品制备：液体样品：根据样品中亚硝胺的含量称取样品１０．０～２０．０ｇ，移人１００ｍＬ容量瓶中，加入氢氧化钠溶液使其浓度为１ｍＬ／Ｌ，摇匀后过滤，收集滤液待测定。固体样品，取经捣碎或研磨均匀的样品２０．０ｇ，加入正丁醇饱和的ｌｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液，移人１００ｍＬ容量瓶中，并加至刻度，摇匀，浸泡过夜，离心分离，取清滤液待测定。测定方法：吸取样品的清液５０ｍＬ移入蒸馏瓶内进行夹层保温水蒸气蒸馏，收集２５ｍＬ馏出液，用３００ｇ／Ｌ乙酸调节至ｐＨ３～４。再移入蒸馏瓶内进行夹层保温水蒸气蒸馏，收集２０ｍＬ馏出液，用０．５ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠调至ｐＨ７～８。将馏出液在紫外光下照１５ｍｉｎ，通过强碱性离子（氯离子型）交换柱（１ｃｍ×０．５ｃｍ）浓缩，以少量水洗后，用１ｍｏｌ／Ｌ氯化钠溶液洗脱亚硝酸根，分管收集洗脱液（每管１ｍＬ），至所收集的洗脱液加入显色剂不显色为止。各管中加入１．０ｍＬ，ｐＨ７有磷酸缓冲溶液，０．５ｍＬ显色剂Ａ，摇匀后再加入０．５ｍＬ显色剂Ｂ，以下操作同标准曲线的绘制。根据测得的吸光值，从标准曲线中查得每管亚硝胺的含量，汇总总含量。