有机酸（己二酸）中主要成分含量检测方案(液相色谱仪)

有机酸分析的柱后缓冲电导法与紫外法、直接电导法的比较 摘要 柱后缓冲电导法采用柱后调节pH值，电导检测器检测的方法检测有机酸，它避免了经常使用的紫外法选择性低，直接电导法灵敏度低的缺点，是可以实现有机酸准确定量的一种新型分析方法。本文比较了这三种方法的分析结果。 关键词 HPLC 柱后缓冲电导法直接电导法紫外去有机酸分析 食品中的有机酸是决定食品风味的重要成分，因此，有机酸的测定越来越受到重视。液相色谱法分析有机酸因操作简便而受到大家的欢迎。常规的液相色谱法使用紫外检测器，在205nm附近检测有机酸。因为很多化合物在此位置都有吸收，所以在检测中，目标组分易受样品本底中杂质的影响。使用选择性强的电导检测器可减少这种影响，但通常的直接电导法检测都是使用酸溶液作流动相，，1背景电导率高，而且酸溶液抑制了样品中有机酸的解离，使检测的灵敏度下降。本次试验采用柱后缓冲，电导检测的方法，同时避免了这两个缺点。 图1为本研究中使用的 HPLC 流程图。经过流速、温度、流动相浓度的变化实验，确定了最佳的实验条件。使用此条件，可在37分钟内完成11成分的分析(见图2)，线性和重现性良好。 图2 11种有机酸标准品(100ppm， 10pL) 的色谱图 1、磷酸；2、柠檬酸；3、丙酮酸；4、苹果酸；5、琥珀酸；6、甲酸；7、乙酸；8、己二酸；9、庚二酸；10、丁酸；11、乳酸 为说明它的特长，本次研究中用紫外检测法和直接检测法作了对比实验。 图3、4是本法与紫外检测法的比较。所有样品都通过 0.45 um 膜过滤器的过滤， 10pL进样。从比较图中可以看出，对这两种样品，使用电导检测器都减少了样品背景中有紫外吸收的杂质干扰，提高了基线分离的程度，增加了定量的可靠性。 图5是本法与直接检测法的比较。从图中可看出，尽管有机酸因缓冲液的加入而被稀释， 图3橙汁的色谱图对比(左：UV检测法：右：柱后缓冲电导导测法) 图4啤酒的色谱图对比(左：UV检测法；右：柱后缓冲电导检测法) 图 5 11种有机酸标准品(100ppm， 10pL)色谱图对比 (左：直接检测法；右：柱后缓冲电导检测法) 表1柱后缓冲电导检测法分离检测条件 分析柱：Shim-pack SCR-102H (8.0mmL.D.×300mmL.)2根 流动相：10mMp-甲基苯磺酸 流速：0.9mL/min 温度：35℃ 检测条件 缓冲液： 40mM Bis-Tris 水溶液，内含10mMp-甲基苯磺酸和100uMEDTA 流速： 0.9mL/min 检测池温度：43℃ 表2紫外检测法的分离检测条件 分析柱：Shim-pack SCR-102H (8.0mmL.D.×300mmL.)2根 流动相：5mMHClO4 流速 ： 0.8mL/min 温度 ：60℃ 表3 直接电导法的分离检测条件 直接电导法的分离检测条件 分析柱： Shim-pack SCR-102H (8.0mmL.D.×300mmL.)2根 流动相：10mMp-甲基苯磺酸 流速：0.9mL/min 温度：35℃