茶叶中啶虫脒检测方案(液相色谱仪)

超高效液相色谱法快速测定茶叶中的啶虫脒 黄雄风刘绿叶 金燕赛默飞世尔科技(中国)有限公司 关键词 QuEChERS 前处理 UHPLC 目标 基于啶虫脒在茶叶中的使用、对人体健康的危害和欧盟出台的新标准，本文拟通过高效液相色谱法法合QuEChERS前处理技术建立一种简便、准确、快速测定茶叶中啶虫脒的方法。 引言 啶虫脒 (Acetamipdd)，化学名称：[E]-N-[(6-氯吡啶)-3-基]-N-腈基-N-甲基乙酰胺，别名吡虫清、乙虫脒、莫比朗，是一种新型杀虫剂，属硝基亚甲基杂环类化合物，其结构式见图1。啶虫脒作用于昆虫神经系统突触部位的烟碱乙酰胆碱受体，干扰昆虫神经系统的刺激传导，引起神经系统通路阻塞，导致昆虫麻痹、最终死亡。作为一种新烟碱类杀虫剂，啶虫脒具有内吸性强、杀虫谱广、作用速度快等特点，广泛用于蔬菜、果树、茶叶的蚜虫、鳞翅目等害虫的防治，防效在90%以上。欧盟国家对茶叶中啶虫脒的限量要求越来越严格，2013年啶虫脒的检测限量为 0.1mg/kg ， 而在2014年EU87法规中规定啶虫脒的检测限量为0.05mg/kg。 图1.啶虫脒结构式 测定茶叶中啶虫脒的方法主要有：气相色谱法和高效液相色谱法，以高效液相色谱法为主。对于农残的的定，前处理是关键，尤其是样品的净化。对于茶叶中啶虫脒的测定，常用的净化法主要有：基质固相分散、层析法和固相萃取等。QuEChERS 是国内外近年来测己农残较为简便、有效的净化技术。QuEChERS 是 Quick、Easy Cheap、Effective、Rugged、Salty 的缩写，即为：“快速、简易、廉价、有效、稳定、安全"的萃取方法。该方法是 Anastassiades等于2002年首先在 EPRW 会议提出，并于2003年正式发表的一个用于农产品中多农药残留分析的前处理方法。该方法是利用乙腈萃取样品中的农药残留，氯化钠和无水硫酸镁盐析分层，萃取液经无水硫酸镁和 PSA(N-丙基乙二胺)分散固相萃取净化后，用GC、GC/MS 等进行多残留分析。 基于 QuEChERS 方法的优势、啶虫脒的特点以及样品基质的考虑，本文拟采用高效液相色谱法，结合QuEChERS 前处理技术，对茶叶中啶虫脒进行快速、准确、灵敏的测定，以满足欧盟对茶叶中啶虫脒提出的限量要求。 ( Thermo ScientificM DionexM UltiM a te M 3000RS 四元梯度系统， 包括： ) -LGP-3400RS 四元分析泵(具备溶剂脱气功能) -WPS-3000TRS RS 自动进样器(配置100uL定量环)-TCC-3000RS 柱温箱(具备控温功能) -DAD-3000RS 二极管阵列检测器(检测池体积2.5uL) Thermo Scientific Dionex Chromeleon色谱系统控制软件，版本6.80或以上 试剂与标准品 试剂 去离子水，18.2 MQ-cm (Thermo Scientific GenPure Pro UV-TOC，P/N 50131948) 乙腈(CH3CN)， HPLC 级 (Fisher Chemical， P/N AC610010040) 标准品 啶虫脒标准品购买于上海安谱科学仪器有限公司。 标准溶液的制备 分别称取0.01g啶虫脒标准品，用乙腈定容至10mL，得到浓度均为1000 mg/L的标准储备液，用乙腈逐级稀释成标准曲线所需的浓度。 样品 分别称取1g四种不同的茶叶于离心管中，加入5mL含1%乙酸的乙腈溶液，浸泡30 min 后， 以4500 r/min 速率离心5 min， 取 2mL上清液于放有0.5 g QuEChERS 粉末的离心管中，涡旋 2 min， 以12000 r/min 离心2 min， 过滤后进样。 样品加标 ( 称取其中的一份茶叶1g，加入0.5 mL 浓度为 20 mg/L 啶虫脒标准溶液和4.5mL含1%乙酸的乙腈溶液，与样品进行同步前处理，得到的理论加标浓度为2 mg/L。 ) 色谱条件 色谱柱： Acclaim 120， C18，2.2 pm Analyitcal (2.1×100 mm)(P/N 068982) 流动相：乙腈/水(v：v，30：70等度) 进样体积：1pL 流速：0.3mL/min 柱温：30℃ 检测：紫外吸收，入246nm 结果与讨论 样品前处理的优化 基于 QuEChERS 方法具有简单、方便，且在农残中广泛应用的特点，本文将该方法应用于茶叶中啶虫脒的提取和净化。。一般采用乙腈作为萃取溶剂，但是由于啶虫脒偏碱性，因此采用含1%乙酸的乙腈溶液作为提取试剂。 重现性、线性和检出限 为考察方法的重现性，本文采用八次连续进样浓度为5 mg/L的啶虫脒标准溶液，得到的保留时间和峰面积的相对标准偏差(RSD) 都分别小于0.11%和0.33%，说明该方法具有良好的重现性，见图2。目标化合物在0.025-500 mg/L 内都具有良好的线性，以浓度为横坐标，，以峰面积为纵坐标，得到的标准曲线方程为Y=0.301X+0.2055 (r=0.9996)；以三倍信噪比计算得到的方法检出限为0.007mg/L。 图2.连续八次重复进样5mg/L啶虫脒标准品的叠加色谱图 样品的测定 为考察啶虫脒在茶叶中的残留情况，本文选用了四种不同茶叶进行测试。结果表明，啶虫脒在所选的四种茶叶中均无检出。另外，为考察方法的回收率，本文进行了加标实验，加标的理论浓度为2 mg/L， 实际测得的浓度为1.48 mg/L，回收率为74%，说明该方法适用于茶叶中啶虫脒的测定。 图3.1-标准品(2mg/L)、2-空白、3-样品、4-样品加标的叠加色谱图 结论 本文采用高效液相色谱法，结合简便的 QuEChERS 前处理技术，以乙和和水作为流动相在等度条件下，5 min 内即可完成茶叶中啶虫脒的测定，是一种快速、灵敏、准确测定茶叶中啶虫脒的有效方法，能满足2014年欧盟新标准 EU87 的相关要求。 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 免费服务热线：800810 5118400 6505118(支持手机用户) ThermoFisherSCIENTIFIC AN_C_LC-