环境水体中痕量毒死蜱检测方案(液相色谱仪)

样品前处理2Thermo Fisher Scientific，San Jose， CA USA is ISO Certified.SCIENTIFICPart of Thermo Fisher Scientific 图2.在线固相萃取-双梯度液相色普分析原理图 (A：上样，清洗，萃取；B：洗脱，分离，分析) 仪器： U3000双梯度高效液相色谱仪，配置三元双梯度高压泵，自动进样器(2.5mL半制备进样组件)，柱温箱， DAD检测器。 分析柱：Acclaim 120A， C18 (5um， 4.6×250mm)： 萃取柱： C18， 4.3mmx10mm， 5pm； 流动相及阀位置： 流速：右泵：0.8mL/min； 左泵：0.8mL/min柱温：30℃ 检测波长：229nm 进样量：2.5mL 表1.流动相条件，阀位置及切换时间 时间 阀位置 分析(左泵) 萃取(右泵) 乙腈(%) 0.1%磷酸(%) 乙腈(%) 0.1%磷酸(%) 0-3min 6-1 85 15 40 60 3-8min 1-2 85 15 40 60 8-20min 6-1 85 15 40 60 样品的采集和保存 用清洗干净的磨口玻璃瓶装取湖水，立即置于冰水混合容器中，防止样品变质。在实验室中，样品可置于冰箱中4℃以下保存。 样品预处理 取自来水及黄花岗公园湖水，离心；过0.45um微孔滤膜，取滤后水液与甲醇按照体积比(80：20)的比例混匀，即得。 结果与讨论 1.流动相的选择 毒死蜱结构中有一环状N，理论上具有一定碱性。因此可能会和硅醇基作用使峰形拖尾。本实验试验了乙腈-水，乙乙-0.1%磷酸试验，前者毒死蜱峰形1.14，后者为1.10。后者比前者略好。鉴于峰形可能对于低ppb检测有影响，本实验选择乙腈-0.1%磷酸作为流动相。 2.前处理条件的选择 初始实验过程中，自来水、湖水的加标回收率都只有70%左右，怀疑是毒死蜱亲脂性太强，在过滤过程吸附损失，需要在样品中加入一定比例的有机溶剂进行解吸附。按照安水：甲醇(体积比)90：10，80：20，70：30，60：40，50：50混匀后加标试验，结果发现，当加入甲醇后，在毒死蜱峰附近出现一个杂峰不能完全分离，但回收率有所提高，且在60：40达到100%回收率，而在50：50回收率甚至达到120%，判断是甲醇导致水体中悬浮物中杂质解吸附，与毒死蜱峰重叠所致。为解决此问题，将湖水取回后，静置并过微孔滤膜，除去悬浮物后，再与甲醇混合进行加标试验。结果在80：20获得85%以上回收率。 3.线性关系 取毒死蜱标准品，分别制成浓度分别为0.01 ug/mL，0.02 pg/mL， 0.05pg/mL， 0.1pg/mL和0.2pg/mL的标准溶液，取各标准溶液2.5mL注入液相色谱仪，依次测定。以测定的峰面积纵坐标，对应浓度为横坐标，做线性回归。线性关系： y=0.0299x， 相关系数r=0.9980； 4.方法检测限与定量限 GB/T 5479方法是取水样200mL，萃取后浓缩成2mL， 进样1pL，检测限2pg/L。本方法取水样与甲醇按照80：20混匀后进样2.5mL，相当于水样进样2mL，以3倍噪音为检测限，10噪音为定量限，以10ppb毒死蜱标准溶液为参照，本方法的检出限为1.1ppb，定量限为3.7ppb， 符合标准要求。 5.加标回收率试验 表2.加标回收率结果 毒死蜱 样品 样品中测得 加标量 回收率 值(ppb) (ppb) (%) 自来水 10 89.7 - 50 87.4 黄花岗湖水 10 87.7 - 50 87.1 实际样品分析 按实验方法测定，结果如图3图4所示。 图3.自来水样品图谱 (黑色为空白，蓝色为样品，粉色为50ppb加标样品) 图4.湖水样品图谱 (黑色为空白，蓝色为样品，粉色为50ppb加标样品) 结论 本方法采用Dionex公司独特的双梯度液相色谱仪，实现了水体中毒死蜱的在线固相萃取，完全消除标准方法中接触二氯甲烷的危险，降低试验难度，获得了精密的结果。 ( [1]中华人民共和国卫生部 GB/T 5750-2006生活饮 用水标准检验方法[S].中国标准出版社，2006 ) thermoscientific.com C 2012 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific Inc. and itssubsidiaries. Specifications， terms and pricing are subject to change. Not all products are available in all countries. Please consult yourlocal sales representative for details. 上海 北京 免费服务热线：上海浦东新金桥路27号6号楼 北京东城区安定门东大街28号 8008105118邮编：201206 雍和大厦西楼F座7层702-715室 4006505118电话：021-68654588 由编：100007传真：021-64457830 电话：010-84193588传真：010-88370548   毒死蜱是一种硫代磷酸酯类杀虫剂，具有触杀、胃毒和熏蒸作用。在叶片上的残留期不长，但在土壤中的残留期则较长。综述研究表明，毒死蜱对神经系统发育有多方面的毒性作用，对皮肤、眼睛有刺激性。GB/T 5479-2006 《生活饮用水卫生标准》规定饮用水中毒死蜱的含量不得高于0.03mg/L；EPA 《饮用水标准》2006版虽然没有规定饮用水中毒死蜱含量限度，但在健康指南中建议儿童每天饮用一升水中不得高于30ppb，成人每天每千克不得高于0.3 μg。  毒死蜱的检验方法，GB/T 5479-2006采用气相色谱法，样品经二氯甲烷萃取后，经无水硫酸钠脱水，再旋转蒸发蒸干，二氯甲烷反溶后并定容至2mL，操作过程过于繁琐，且使用毒性较大的氯代烷烃作为提取溶剂，存在一定的安全隐患。  为解决上述难题，本文建立了常规紫外检测器下测定水体中毒死蜱的在线固相萃取-高效液相色谱方法。本方法的原理如图2，首先通过自动进样器将大体积样品直接注入到在线固相萃取柱上，利用双梯度液相色谱仪的左泵按照设定的清洗溶剂程序将溶剂输入到固相萃取柱上清洗掉杂质，同时待分析物被富集在固相萃取柱上，待清洗过程完成后通过阀切换将在线固相萃取柱切换至分析流路，利用双梯度液相的右泵按照设定的分析色谱条件将待分析物从固相萃取柱上洗脱至分析柱上进行分离和分析。