大鼠血浆中内源性糖类物质检测方案(气相色谱仪)

科捷仪器KEJIEINSTRUMENT电话：139-5161-2855网址： www.kj17.com 基于亲水色谱质谱联用技术的大鼠血浆中内源性糖类物质方法学研究 糖类化合物广泛存在于动植物及其它生物体内它包括多羟基醛、酮、醇及其衍生物以及糖苷键连接的多聚体。糖是生命活动中三大基本生命物质之一，在生命活动中，糖类化合物作为能量物质被人们所熟悉。在随后的的几十年中，随着科学技术的高速发展，糖的诸多生物学功能不断被揭示和认识；有研究表明糖类化合物能够提高弧菌病的抗性和增强人体免疫力；流行病学研究中，动物和临床试验表明持续饮食过量的糖，尤其果糖，是导致非酒精性脂肪肝形成的重要因素；特定碳水化合物饮食法和其他一些简单碳水化合物饮食法可用于治疗小儿克罗恩病；一些不易吸收的寡聚糖可降低传染病和腹泻的风险。另外，自1990年以来，代谢组学技术被广泛用于疾病研究中，在这些研究中，糖类化合物常被提及，且经常出现在各种生物基质血浆、血清、尿液等的研究中。目前不少公司的新药研发过程中也需对各种糖类物质进行定量研究，因此，建立一个简单、快速、灵敏、准确、适用于复杂基质分析且包含众多碳水化合物的定量分析方法成为当务之急。 血浆中碳水化合物分析存在诸多挑战，，除了因为这些物质在生物基质如血浆、组织中含量较低，不易被检测，它们还具有以下特点：1)化合物极性大，在常规反相色谱柱上不宜保留；2)结构、性质十分相近，存在大量的同分异构体，单糖中有开环和不开欢之分、有五元环和六元环之分，寡糖或者多聚糖分枝多且复杂，这些物质通常难以实现分离；3)一般糖类化合物没有紫外和荧光吸收官能团。 在过去，人们利用各种分析技术对糖类物质进行检测，有研究者通过衍生化引入其他基团，增强其保留和紫外吸收或者通过衍生化使其适合 GC/GC-MS检测，也有研究者通过衍生化使其在反相色谱柱上有保留然后用于LV-MS/MS 检测，尽管衍生化能够是的碳水化合物被检测，但衍生化耗时且过程中容易产生副产物。毛细管电色谱分离度高，能够对糖类进行保留和分离，但毛细管色谱重现性比较差。离子色谱法作为分离碳水化合物的传统方法，常与 AD检测器联用，该技术具有灵敏度高等特点，但该方法需要在高 pH 条件下进行，这可能造成一些化合物的降解，另外样品中的干扰物质易影响检测结果需先除去，以免影响检测。氨基键合相硅胶色谱柱在分离糖类化合物时可以有效的避免糖类的α、β结构转换而产生2个色谱峰，但该色谱柱本身具有自溶解现象，与还原糖容易形成 Schiff 碱而影响方法的稳定性与准确性。 仪器准备 GC 6891N实验室高端气相色谱仪，基于国际先进的技术平台，拥有国际采购的可靠元器件硬件集成和特殊设计稳定的软件。高品质的硬件和智能化操作及数据处理软件满足其长期工作的测量重复性和便捷性。制造精度、技术性能、应用灵活性等方面处于行业的领先地位。 科捷仪器KEJIE INSTRUMENT 传真：025-83738955 南京科捷分析仪器有限公司 QQ：2326515893 样品处理： 从-80℃冰箱中取出冻存样品，于室温解冻，移取100L血浆样品至EP管中，加入500uL含有2uM甲硫氨酸同位素的遇冷沉淀剂 ACN/MeOH，涡旋 lmin 至混匀，于-20℃冷冻静置 20min， 13000r/min， 4℃离心15min， 转移300uL上清液至96孔板中用于质谱分析。 谱图分析： 图216种碳水化合物母离子 UHPLC-MS 扫描图 传真：025-837389555南京科捷分析仪器有限公司(QQ：2326515893 糖类化合物广泛存在于动植物及其它生物体内它包括多羟基醛、酮、醇及其衍生物以及糖苷键连接的多聚体。糖是生命活动中三大基本生命物质之一，在生命活动中，糖类化合物作为能量物质被人们所熟悉。在随后的的几十年中，随着科学技术的高速发展，糖的诸多生物学功能不断被揭示和认识；有研究表明糖类化合物能够提高弧菌病的抗性和增强人体免疫力；流行病学研究中，动物和临床试验表明持续饮食过量的糖，尤其果糖，是导致非酒精性脂肪肝形成的重要因素；特定碳水化合物饮食法和其他一些简单碳水化合物饮食法可用于治疗小儿克罗恩病；一些不易吸收的寡聚糖可降低传染病和腹泻的风险。另外，自1990年以来，代谢组学技术被广泛用于疾病研究中，在这些研究中，糖类化合物常被提及，且经常出现在各种生物基质血浆、血清、尿液等的研究中。目前不少公司的新药研发过程中也需对各种糖类物质进行定量研究，因此，建立一个简单、快速、灵敏、准确、适用于复杂基质分析且包含众多碳水化合物的定量分析方法成为当务之急。