牛奶中大环内酯类抗生素检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163牛奶中大环内酯类抗生素残留分析271 样品制备 1.取5mL牛奶样品放入50mL离心管中，加入15mL乙腈，摇晃，3200rpm离心处理15min 2.将上清液转移到另一个50 mL离心管中，加入20mL正己烷，摇晃15 min， 3200rpm离心处理15分钟。 3.弃去正己烷层，将乙腈/牛奶的上清液蒸发至体积为3mL，加入15mL0.1M的磷酸盐缓冲溶液(pH8.0)。 固相萃取过程 Oasis HLB 6 cc/150mq 在线SPE方法： 1.取1mL牛奶样品放入50mL离心管中，加入20uL浓氨水，再加入2mL乙腈。 2.15 min， 3500rpm离心处理15分钟。 3.取2mL上清液放入20mL样品瓶中，加入18mL水，取5mL进样分析。 仪器条件 仪器： 沃特世Aqua-Analysis在线SPE-LC/MS/MS水分析系统 在线SPE柱： Oasis@ HLB 2.1 x 20 mm， 25 pm 色谱柱： XBridge@Cg，2.1x50 mm， 3.5 pm 在线SPE和色谱分离条件： 上样泵A路： 100%水 上样泵B路： 100%甲醇 上样流速： 4 mL/min 清洗： 20%甲醇/乙腈(30/70，v/v)+0.5%甲酸 再平衡泵A： 50/50甲享/丙酮 再平衡泵B： 80/20乙酸乙酯/丙酮 再平衡泵C： 80/20正己烷/丙酮 流速： 4mL/min 流动相A： 0.1%甲酸/水 流动相B： 0.1%甲酸/甲醇，剃度分析 电离模式： 电喷雾正离子(ESI*)， 多反应监测(MRM) 六种大环内酯类抗生素的MRM参数如下： 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 红霉素 734.4 158.2 克拉霉素 748.5 158.2 罗红霉素 837.5 679.4 阿奇霉素 749.6 591.3 乙酰螺旋霉素 843.6 174.2 替考米星 869.6 174.2 0.5ppb添加水平的牛奶样品LC/MS/MS图谱(MRM)。 订购信息 描述 部件号 Oasis HLB， 6 cc/ 150 mg 186003365 XBridge Cig， 2.1 x 50 mm， 3.5 pm 186002352 Oasis HLB， 2.1x20 mm， 25 pm 186002036 LC/MS 认证样品瓶 600000751CV Oasis HLB 6 cc/150 mg活化A.10 mL甲醇 B.10 mL水C.10 mL 2 % 氯化钠溶液D.2 mL 0.1 M磷酸盐缓冲溶液(pH 8.0)上样5 mL经均质处理的牛奶清洗15 mL水清洗25 mL 40 %甲醇水溶液抽干小柱 5 min洗脱5 mL 95% 甲醇水溶液氮气吹至近干，用1 mL流动相A溶解色谱柱： XBridge C18, 2.1 x 50 mm, 3.5 μm流动相A： 0.1% 甲酸/水流动相B： 0.1% 甲酸/甲醇，梯度分析