葵花籽油中邻苯二甲酸酯检测方案(农药 兽药)

葵花籽油中16种邻苯二甲酸酯的分析方法 摘要：本实验重现了GB5009.271-2016食品中邻苯二甲酸酯的国家标准，采用Cleanert PSA/Silica固相萃取柱结合气相色谱串联质谱的方法(GC/MS)对葵花籽油中16种邻苯二甲酸酯进行了测定。样品经乙腈提取，Cleanert PSA/Silica小柱净化，GC/MS进行检测，外标法定量。结果表明，当加标量为0.8 mg/kg时，回收率在70% ~ 115%之间，能够满足检测要求。 关键词：邻苯二甲酸酯；Cleanert PSA/Silica；GC/MS 前言 邻苯二甲酸酯，又称酞酸酯，缩写PAEs，是邻苯二甲酸形成的酯的统称。当被用作塑料增塑剂 (​http:​/​​/​baike.baidu.com​/​item​/​%E5%A2%9E%E5%A1%91%E5%89%82" \t "_blank​)时，一般指的是邻苯二甲酸与4～15个碳的醇形成的酯。邻苯二甲酸酯主要用于聚氯乙烯材料，令聚氯乙烯由硬塑胶变为有弹性的塑胶 (​http:​/​​/​baike.baidu.com​/​item​/​%E5%A1%91%E8%83%B6" \t "_blank​)，起到增塑剂的作用。它被普遍应用于玩具、食品包装材料 (​http:​/​​/​baike.baidu.com​/​item​/​%E9%A3%9F%E5%93%81%E5%8C%85%E8%A3%85%E6%9D%90%E6%96%99" \t "_blank​)、医用血袋和胶管、乙烯 (​http:​/​​/​baike.baidu.com​/​item​/​%E4%B9%99%E7%83%AF" \t "_blank​)地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品（如指甲油 (​http:​/​​/​baike.baidu.com​/​item​/​%E6%8C%87%E7%94%B2%E6%B2%B9" \t "_blank​)、头发喷雾剂、香皂和洗发液）等数百种产品中，但对人体的健康有严重的危害。一般人容易会在塑胶 (​http:​/​​/​baike.baidu.com​/​item​/​%E5%A1%91%E8%83%B6" \t "_blank​)制品包装中接触到邻苯二甲酸酯类，在生活中有很多食物在加工、加热、包装、盛装的过程里可能会造成邻苯二甲酸酯的溶出且渗入食物中。含有邻苯二甲酸酯的软塑料玩具及儿童用品有可能被小孩放进口中，如果放置的时间足够长，就会导致邻苯二甲酸酯的溶出量超过安全水平，会危害儿童的肝脏和肾脏，也可引起儿童性早熟。 本文通过重现国标，建立了Cleanert PSA/Silica固相萃取柱净化葵花籽油中邻苯二甲酸酯的前处理方法。 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 Agilent 7890-5975C气相色谱串联质谱仪 试剂材料 乙腈、丙酮为色谱纯；正己烷、二氯甲烷均为农残级； 16种邻苯二甲酸酯混合标准品（纯度99%）：正己烷溶解； Cleanert PSA/Silica：1 g/6 mL。 样品制备 样品提取 称取均匀的葵花籽油样品0.5 g，加入100 µL正己烷，2 mL乙腈，涡旋1 min，超声提取20 min，4000 r/min离心5 min，转移上清液于另一干净玻璃瓶中，残渣加入2 mL乙腈，涡旋1 min，4000 r/min离心5 min，转移上清液，残渣再加入2 mL乙腈提取一次。合并3次上清液，作为待净化液。 样品净化 将Cleanert PSA/Silica小柱依次用5 mL二氯甲烷，5 mL乙腈活化，弃去流出液。将上述待净化液上样于Cleanert PSA/Silica小柱上，收集流出液，再用5 mL乙腈洗脱小柱，收集流出液。合并两次流出液，加入1 mL丙酮，于40℃氮吹至近干，用正己烷定容至2 mL，涡旋混匀，供气质检测。 基质混合标准工作溶液 取高浓度16种邻苯二甲酸酯混合标准溶液，用空白样品基质溶液稀释成0.2 µg/mL的基质混合标准工作溶液。 注：实验中应避免使用塑料制品。 实验条件 色谱柱：DA-5MS色谱柱，30 m × 0.25 mm × 0.25 µm； 进样口温度：260℃；柱温：初始温度60℃，保持1 min，以20℃/min 升至220℃，保持1 min，再以5℃/ min 升至250℃ 保持1 min；再以20℃/min升温至290℃，保持7.5 min。 载气：氦气，纯度≥99.999％ 流速：1 mL/min； 电离方式：EI源。 离子源温度：230℃； 溶剂延迟：7 min； 进样方式：不分流进样； 样量：1 µL； 监测方式：选择离子扫描（SIM）。 表1. 16种邻苯二甲酸酯监测离子参数 物质名称 定性离子（m/z） 定量离子（m/z） 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 163，77，194，133 163 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 149，177，105，222 149 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 149，223，104，167 149 邻苯二甲酸二正丁酯 DBP 149，223，205，104 149 邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯 DMEP 59，149，104，176 149 邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯 BMPP 149，167，85，251 149 邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯 DEEP 72，149，104，193 149 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 149，237，219，104 149 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 149，251，104，233 149 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 149，91，206，104 149 邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯 DBEP 149，101，85，193 149 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 149，167，249，104 149 邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯 DEHP 149，167，279，113 149 邻苯二甲酸二苯酯 DPhP 225，77，104，153 225 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 149，279，104，261 149 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 149，293，167，275 149 结果与讨论 实验结果 由表2可知，采用固相萃取结合GC/MS的方法检测葵花籽油中的16种邻苯二甲酸酯，加标回收率在70% ~ 115%之间，能够满足标准要求。由图1、图2、图3可知，用DA-5MS色谱柱检测16种邻苯二甲酸酯，峰形良好且保留时间稳定。 表2. 葵花籽油中16种邻苯二甲酸酯加标回收实验结果(添加水平0.8 mg/kg) 物质名称 保留时间/min 平均回收率/% 变异系数/% 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 7.898 80.2 0.5 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 8.765 87.5 1.2 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 10.596 77.4 4.7 邻苯二甲酸二正丁酯 DBP 11.401 78.6 4.3 邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯 DMEP 11.717 81.6 9.0 邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯 BMPP 12.452 88.0 4.0 邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯 DEEP 12.850 86.0 3.4 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 13.298 92.5 3.2 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 15.564 110.7 3.8 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 15.706 85.7 2.4 邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯 DBEP 17.267 90.9 2.6 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 17.889 97.0 1.2 邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯 DEHP 18.019 85.5 7.0 邻苯二甲酸二苯酯 DPhP 18.152 101.8 1.4 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 19.711 83.4 1.9 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 20.171 84.5 3.3 图1. 0.2 µg/mL16种邻苯二甲酸酯标准色谱图 结论 本实验重现GB5009.271-2016食品中邻苯二甲酸酯测定的国家标准，用Cleanert PSA/Silica小柱结合气相色谱串联质谱的方法对葵花籽油中的16种邻苯二甲酸酯进行了测定。对于加标量为0.8 mg/kg的样品，加标回收率在70% ~ 115%之间，符合检测要求，且变异系数小于10%，稳定性良好。 附：相关标准品 1ST1183-1000H 16种邻苯二甲酸酯混标溶液, 1000ppm 16 Phthalate Mix Solution, 1000ppm 　 1ST1111 邻苯二甲酸丁苄酯 （BBP） Benzyl n-butyl phthalate （BBP） 85-68-7 1ST1112 邻苯二甲酸二苯酯 Diphenyl phthalate 84-62-8 1ST1113 邻苯二甲酸二丁氧基乙酯 (DBEP) Bis(2-butoxyethyl) phthalate (DBEP) 117-83-9 1ST1114 邻苯二甲酸二丁酯 (DBP) Dibutyl phthalate (DBP) 84-74-2 1ST1115 邻苯二甲酸二环己酯 (DCHP) Dicyclohexyl phthalate (DCHP) 84-61-7 1ST1116 邻苯二甲酸二甲酯 (DMP) Dimethyl phthalate (DMP) 131-11-3 1ST1117 邻苯二甲酸二戊酯 (DNPP) Dipentyl phthalate (DNPP) 131-18-0 1ST1118 邻苯二甲酸二乙酯 (DEP) Diethyl phthalate (DEP) 84-66-2 1ST1119 邻苯二甲酸二异丁酯 (DIBP) Diisobutyl phthalate (DIBP) 84-69-5 1ST1120 邻苯二甲酸二正己酯 (DNHP) Di-n-hexyl phthalate (DNHP) 84-75-3 1ST1121 邻苯二甲酸二正辛酯 (DNOP) Di-n-octyl phthalate (DNOP) 117-84-0 1ST1122 邻苯二甲酸二甲氧乙酯 (DMEP) Bis(2-methoxyethyl) phthalate (DMEP) 117-82-8 1ST1123 邻苯二甲酸双(2-乙氧基乙)酯 (DEEP) Bis(2-ethoxyethyl) phthalate (DEEP) 605-54-9 1ST1124 邻苯二甲酸双(4-甲基-2-戊)酯 (DMPP) Bis(4-methyl-2-pentyl)phthalate (DMPP) 146-50-9 1ST1125 邻苯二甲酸双(2-乙基己)酯 (DEHP) Bis(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP) 117-81-7 1ST1126 邻苯二甲酸二壬酯 (DNP) Di-n-nonyl phthalate (DNP) 84-76-4 天津阿尔塔科技有限公司 天津经济技术开发区第四大街80号天大科技园C5楼405室 邮编：300457 电话：(0086) 22-6537-8550 QQ: 2850791073 邮箱：sales@altascientific.com 网址：www.altascientific.com.cn 葵花籽油中16种邻苯二甲酸酯的分析方法 摘要：本实验重现了GB5009.271-2016食品中邻苯二甲酸酯的国家标准，采用Cleanert PSA/Silica固相萃取柱结合气相色谱串联质谱的方法(GC/MS)对葵花籽油中16种邻苯二甲酸酯进行了测定。样品经乙腈提取，Cleanert PSA/Silica小柱净化，GC/MS进行检测，外标法定量。结果表明，当加标量为0.8 mg/kg时，回收率在70% ~ 115%之间，能够满足检测要求。关键词：邻苯二甲酸酯；Cleanert PSA/Silica；GC/MS             前言 邻苯二甲酸酯，又称酞酸酯，缩写PAEs，是邻苯二甲酸形成的酯的统称。当被用作塑料增塑剂时，一般指的是邻苯二甲酸与4～15个碳的醇形成的酯。邻苯二甲酸酯主要用于聚氯乙烯材料，令聚氯乙烯由硬塑胶变为有弹性的塑胶，起到增塑剂的作用。它被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品（如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液）等数百种产品中，但对人体的健康有严重的危害。一般人容易会在塑胶制品包装中接触到邻苯二甲酸酯类，在生活中有很多食物在加工、加热、包装、盛装的过程里可能会造成邻苯二甲酸酯的溶出且渗入食物中。含有邻苯二甲酸酯的软塑料玩具及儿童用品有可能被小孩放进口中，如果放置的时间足够长，就会导致邻苯二甲酸酯的溶出量超过安全水平，会危害儿童的肝脏和肾脏，也可引起儿童性早熟。本文通过重现国标，建立了Cleanert PSA/Silica固相萃取柱净化葵花籽油中邻苯二甲酸酯的前处理方法。实验部分仪器、试剂与材料主要仪器设备Agilent 7890-5975C气相色谱串联质谱仪试剂材料乙腈、丙酮为色谱纯；正己烷、二氯甲烷均为农残级；16种邻苯二甲酸酯混合标准品（纯度99%）：正己烷溶解；Cleanert PSA/Silica：1 g/6 mL。样品制备样品提取称取均匀的葵花籽油样品0.5 g，加入100 μL正己烷，2 mL乙腈，涡旋1 min，超声提取20 min，4000 r/min离心5 min，转移上清液于另一干净玻璃瓶中，残渣加入2 mL乙腈，涡旋1 min，4000 r/min离心5 min，转移上清液，残渣再加入2 mL乙腈提取一次。合并3次上清液，作为待净化液。样品净化将Cleanert PSA/Silica小柱依次用5 mL二氯甲烷，5 mL乙腈活化，弃去流出液。将上述待净化液上样于Cleanert PSA/Silica小柱上，收集流出液，再用5 mL乙腈洗脱小柱，收集流出液。合并两次流出液，加入1 mL丙酮，于40℃氮吹至近干，用正己烷定容至2 mL，涡旋混匀，供气质检测。基质混合标准工作溶液取高浓度16种邻苯二甲酸酯混合标准溶液，用空白样品基质溶液稀释成0.2 μg/mL的基质混合标准工作溶液。注：实验中应避免使用塑料制品。实验条件色谱柱：DA-5MS色谱柱，30 m × 0.25 mm × 0.25 μm；进样口温度：260℃；柱温：初始温度60℃，保持1 min，以20℃/min 升至220℃，保持1 min，再以5℃/ min 升至250℃ 保持1 min；再以20℃/min升温至290℃，保持7.5 min。载气：氦气，纯度≥99.999％ 流速：1 mL/min； 电离方式：EI源。 离子源温度：230℃； 溶剂延迟：7 min；进样方式：不分流进样； 样量：1 μL；监测方式：选择离子扫描（SIM）。表1. 16种邻苯二甲酸酯监测离子参数实验结果结果与讨论由表2可知，采用固相萃取结合GC/MS的方法检测葵花籽油中的16种邻苯二甲酸酯，加标回收率在70% ~ 115%之间，能够满足标准要求。由图1、图2、图3可知，用DA-5MS色谱柱检测16种邻苯二甲酸酯，峰形良好且保留时间稳定。表2. 葵花籽油中16种邻苯二甲酸酯加标回收实验结果(添加水平0.8 mg/kg) 图1. 0.2 μg/mL16种邻苯二甲酸酯标准色谱图结论本实验重现GB5009.271-2016食品中邻苯二甲酸酯测定的国家标准，用Cleanert PSA/Silica小柱结合气相色谱串联质谱的方法对葵花籽油中的16种邻苯二甲酸酯进行了测定。对于加标量为0.8 mg/kg的样品，加标回收率在70% ~ 115%之间，符合检测要求，且变异系数小于10%，稳定性良好。 附：相关标准品1ST1183-1000H16种邻苯二甲酸酯混标溶液, 1000ppm16 Phthalate Mix Solution, 1000ppm1ST1111邻苯二甲酸丁苄酯 （BBP）Benzyl n-butyl phthalate （BBP）85-68-71ST1112邻苯二甲酸二苯酯Diphenyl phthalate84-62-81ST1113邻苯二甲酸二丁氧基乙酯 (DBEP)Bis(2-butoxyethyl) phthalate (DBEP)117-83-91ST1114邻苯二甲酸二丁酯 (DBP)Dibutyl phthalate (DBP)84-74-21ST1115邻苯二甲酸二环己酯 (DCHP)Dicyclohexyl phthalate (DCHP)84-61-71ST1116邻苯二甲酸二甲酯 (DMP)Dimethyl phthalate (DMP)131-11-31ST1117邻苯二甲酸二戊酯 (DNPP)Dipentyl phthalate (DNPP)131-18-01ST1118邻苯二甲酸二乙酯 (DEP)Diethyl phthalate (DEP)84-66-21ST1119邻苯二甲酸二异丁酯 (DIBP)Diisobutyl phthalate (DIBP)84-69-51ST1120邻苯二甲酸二正己酯 (DNHP)Di-n-hexyl phthalate (DNHP)84-75-31ST1121邻苯二甲酸二正辛酯 (DNOP)Di-n-octyl phthalate (DNOP)117-84-01ST1122邻苯二甲酸二甲氧乙酯 (DMEP)Bis(2-methoxyethyl) phthalate (DMEP)117-82-81ST1123邻苯二甲酸双(2-乙氧基乙)酯 (DEEP)Bis(2-ethoxyethyl) phthalate (DEEP)605-54-91ST1124邻苯二甲酸双(4-甲基-2-戊)酯 (DMPP)Bis(4-methyl-2-pentyl)phthalate (DMPP)146-50-91ST1125邻苯二甲酸双(2-乙基己)酯 (DEHP)Bis(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP)117-81-71ST1126邻苯二甲酸二壬酯 (DNP)Di-n-nonyl phthalate (DNP)84-76-4