头孢米诺钠中含量及有关物质检测方案(制备液相色谱)

博纳艾杰尔产品应用案例 Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 头孢米诺钠分析报告 AP10065 应用及技术服务部 摘要：本实验按照头孢米诺钠2015版药典标准，以该方法中的分离度溶液为探针，进行色谱柱筛选。在选定的色谱柱上，进一步考察了该色谱柱用于头孢米诺钠系统适用性、含量、有关物质等项测试的结果，并初步考察了色谱柱的使用寿命，结果表明 Innoval AQ C18 适用于头孢米诺钠的分析：(1)在分离度溶液中，Innoval AQ C18对其前主要杂质峰的分离度为15.04，符合标准要求；(2)对照品平行进样6针 RSD 为 0.03%，保留时间12.9分钟，柱效13415，拖尾因子 0.989，均符合标准要求；(3)含量测定中，头孢米诺钠保留时间12.9，柱效12998，拖尾因子0.995，符合标准要求；(4)有关物质测定中共检出5个杂质，分离度均符合标准要求；(5)用于头孢米诺钠含量测试时，连续进样350针，保留时间、柱效和拖尾因子均无显著变化，表明 Innoval AQ C18 对该样品和流动相有较好耐受性。 关键词：头孢米诺钠； Innoval AQ C18；液相色谱法 前言 本实验按照2015版药典二部标准，初步考察了本公司生产的不同 C18色谱柱用于该品种分析的适用性，最终选择 Innoval AQ C18 用于头孢米诺钠测试，结果令人满意。 表1.头孢米诺钠样品信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS编号 头孢米诺钠 Cefminox HN 1 H0. C16H20N7NaO7S ，7HO 667.66 CH 3，7H2O HCO H 75498-96-3 Sodium 实验部分 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 仪器、试剂与材料 试剂材料 超纯水、甲醇、四氢呋喃、冰醋酸； 高效液相色谱柱：Innoval AQ C18； 5 um，100 A，4.6×250 mm 样品制备 分离度溶液的制备：取头孢米诺钠样品适量，加水溶解并稀释制成每 1ml中约含1mg的溶液，置70℃水浴加热 10分钟，放冷，即得。 色谱条件 色谱柱： Innoval AQ C18；；5 um，1100A，，4.6×250mm： 流动相：冰醋酸溶液(1→100)-甲醇-四氢呋喃(990：5：5)(990：5：5，v/v/v))，，等等度洗脱； 检测波长：254nm； 流 速：1.0mL/min： 柱 温：30℃； 进样量：10uL 结果与讨论 系统适用性测定 系统适应性测定图谱 图1.空白(流动相)测定图谱 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 保留时间 k' 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 lmin1 [mAU*s] [mAU1 因子 [minj -| -----1 -1- 8.161 - 190.49210 24.30719 0.69 0.1117 29588 - 13.004 - 6842.55078 386.17026 1.16 0.2667 1317415.04 1.59 图2.分离度溶液测定图谱 保留时间 k' 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 minl [mU*s1 maU 因子 [minl -1---- ---1--- --|-----1-------|------- -----12.958 3481.17871 198.86107 1.03 0.2633 13415 图3.Std1图谱 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 保留时间 k 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 lmin1 「mU*81 [maUl 因子 lminl 12.947 3474.25293 198.71062 1.03 0.2633 13391 图4.Std2图谱 保留时间 k' 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 [min] 「mAU*s1 maU1 因子 min----1---- ----1---- ----1-----1-------1-------1-----|-12.948 3472.68408 198.62177 1.03 0.2633 13393 图5.Std3图谱 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 保留时间 k 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 [min] 「mU*s1 [mU] 因子 [min-1 1 -112.944 3468.34131 198.39201 1.03 0.2633 13386 - 图6.Std4图谱 保留时间 k' 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性minl 「mU*s1 [maU] 因子 [min]---1------l---· ---1--- ---1-----|-------1-------1-----|-12.934 3463.71045 198.50143 1.03 0.2633 13365 图7.Std5图谱 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) minl 「mU*s1 maU1 因子 「minl 12.939 - 3458.82739 198.07982 1.03 0.2633 13375 一 一 图 8. Std6图谱 系统适用性测定结果 表2. Innoval AQ C18用于头孢米诺钠分离度溶液测定结果 名称 保留时间/min 相对保留时间 RRT 分离度 未知杂质 8.161 0.628 头孢米诺 13.004 1.000 15.04 表 3. Innoval AQ C18用于头孢米诺钠对照品溶液测定结果 进样针数 保留时间/min 峰面积 峰面积平均值 RSD/% 理论塔板数 拖尾因子 1 12.958 3481.17871 2 12.947 3474.25293 3 12.948 3472.68408 3469.83248 0.03 13415 0.989 4 12.944 3468.34131 5 12.934 3463.71045 6 12.939 3458.82739 含量测定 含量测定图谱 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 图 9. Innoval AQ C18 用于头孢米诺钠含量测定图谱 含量测定结果 表4. Innoval AQ C18 用于头孢米诺钠含量测定结果 主峰名称 保留时间/min 理论塔板数 拖尾因子 头孢米诺 12.917 12998 0.995 有关物质测定 有关物质测定图谱 ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 保留时间 k' 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 lmin1 「mU*s1 「mU1 因子 「minl - - 一 ---- 8.128 - 7.042668.41670e-1 0.56 0.1156 27411 - - 10.864 - 2.766491.59068e-1 1.11 0.2850 8050 8.02 1.34 12.966 - 7500.35938 423.33267 1.17 0.2667 13097 4.48 1.19 15.594 - 6.815832.16377e-1 0.46 0.5100 5179 3.98 1.20 28.606 - 9.947682.96747e-1 0.97 0.5100 17429： 14.99 1.83 34.880 - 11.907602.64705e-1 0.97 0.6667 15165 6.27 1.22 图10. Innoval AQ C18 用于头孢米诺钠有关物质测定图谱 有关物质测定结果 表 5.Innoval AQ C18 用于头孢米诺钠有关物质测定结果 名称 保留时间/min 相对保留时间 RRT 分离度 未知杂质1 8.128 0.627 未知杂质2 10.864 0.838 8.02 头孢米诺 12.966 1.000 4.48 未知杂质3 15.594 1.203 3.98 未知杂质4 28.606 2.206 14.99 未知杂质5 34.880 2.690 6.27 色谱柱寿命测定结果 色谱柱寿命测试图谱 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 保留时间 k 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 lminl 「mU*s1 mAU1 因子 [minl - 12.407 - 3412.67432 202.27902 1.05 0.2567 12946 一 - 图11.第1针测定图谱 [min] 「m凸U*s1 mU1 因子 [min].1 ------1 --12.447 - 3404.15479 201.89024 1.05 0.2550 13200 - - 图12.第50针测定图谱 保留时间 k 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性[min] 「mAU*s1 [mU] 因子 [min] ---1---一- 一- ---1-- --l-----1------- -1-----1·12.444 3387.61841 200.79283 1.05 0.2567 13022 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ( Email：s er v ice@a g e l a. com .c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 图13.第100针测定图谱 保留时间 k1 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 [min1 「mU*s1 「mU1 因子 [minl 12.436 一 3387.06982 200.61169 1.05 0.2567 13005 一 图14.第150针测定图谱 保留时间 k 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 minl 「mU*s1 mUl 因子 [min]--|------ ---1--- --1-----1-------1-------1-----|12.439 3372.09985 200.55551 1.05 0.2550 13183 图15.第200针测定图谱 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) Iminl -1 -112.450 3352.57202 198.90285 1.06 0.2567 13034 图16.第300针测定图谱 因子 [min] 「mU*s1 [mU] minl- 一12.452 3349.07275 198.03035 1.06 0.2567 13039 一 图17.第350针测定图谱 色谱柱寿命测试结果 表6.Innoval AQ C18 用于头孢米诺钠寿命测试结果 进样针数 主峰保留时间/min 理论塔板数 拖尾因子 1 12.407 12946 0.983 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 50 12.447 13200 0.981 100 12.444 13022 0.978 150 12.436 13005 1.051 200 12.439 13183 0.977 300 12.450 13034 0.976 350 12.452 13039 0.973 结论 本实验按照2015版药典二部标准，考察了 Innoval AQ C18 用于头孢米诺钠检测的适用性，结果表明 Innoval AQ C18色谱柱用于头孢米诺钠分析，效果良好，能够满足检测要求。 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 Innoval AQ C18 5 um，100 A， 4.6×250 mm 1支 IA952505-0 保护柱套 适用于4.6×10mm 和2.1×10mm 1支 SH-100 Innoval AQ C18 直联式保护柱芯 5 um， 100A； 4.6x10mm 4 /pk IA950105-0S 分析型色谱柱温箱 室温+5-50℃，箱内一对夹套 1个 CC-100 1.5 mL 样品瓶 短螺纹透明带书写处32×11.6mm 100/PK 1109-0519 1.5mL样品瓶盖 9mm 中心孔蓝盖，红色象胶/米色 PTFE 隔垫45°Shore A； 1.0 mm 100/PK 0915-1819 微孔滤膜 单膜， 13 mm， 0.45 um 100个/包 AS021345-T 一次性注射器 2 mL 无针头 100支/包 LZSQ-2ML 甲醇 4L/瓶，色谱纯 4x4L/箱 AH230-4 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：