三磷酸腺苷中含量检测方案(液相色谱仪)

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 三磷酸腺苷类样品制备案例 PP10110应用及技术服务部 摘要：本实验采用 Agela LC-100F高压制备色谱仪器，选择 Innoval ODS-2 柱(7 um， 100A， 21.2x250mm) 某三磷酸腺苷类样品进行了制备。结果表明：流动相为20mM 碳酸氢铵水溶液和乙腈，进行梯度洗脱，能够有效分离，峰形良好。 关键词： Agela LC-100F 高压制备系统；三三磷酸腺苷类样品； Innoval ODS-2 制备柱 前言 样品在 HPLC 填料下使用了大量的磷酸缓冲盐，且样品在制备时峰形较差。需要建立一个合适的使用挥发性缓冲盐制备方法，并改善主成分峰形。 表1三磷酸腺苷类样品信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS编号 R HO OH 4Na 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 Agela LC-100F 高压制备仪器 试剂材料 去离子水；乙腈为色谱纯； 制备色谱柱： Innoval ODS-2， 7um， 100A， 21.2×250 mm； 三磷酸腺苷类样品：客户提供。 样品前处理 样品是灰白色固体，取10 mg样品加入1 mL 超声溶解，使用10%甲酸水溶液调pH至5-6，用 0.22 u.m 滤膜过滤后上样。 制备条件 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s s e e r v ice@ag el a . com . cn 网址： w w w. ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 色谱柱： Innoval ODS-2， 7 um， 100A， 21.2x250 mm； 流动相： A： 20mM 碳酸氢铵水溶液；B：乙腈； 流速：18mL/min； 波 长：240nm； 梯 度： 表2.液相制备色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(mL/min) A/% B/% 0.0 18.0 90.0 10.0 30.0 18.0 60.0 40.0 检测条件 色谱柱： Innoval ODS-2， 10 um， 100A， 4.6x250 mm； 流动相： A： 20mM碳酸氢铵水溶液；B：乙腈； 流速：1.0mL/min； 检测器： UV 240 nm； 柱温：30℃； 梯 度： 表3.液相分析色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(mL/min) A/% B/% 0.0 1.0 90.0 10.0 30.0 1.0 60.0 40.0 结果与讨论 本实验采用 Innoval ODS-2 (7 um， 100A， 21.2x250mm)三磷酸腺苷样品进行了制备测试，由表2及图1可知，流动相为20mM碳酸氢铵水溶液与乙腈，进行梯度洗脱时，样品通过制备测试，峰形良好。 ( 地址： 天 津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s s e e r v ice@ag el a . com . cn 网址： w w w.ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 图1.制备色谱图(收集20 min 处接收液) 图2.空白检测图谱 图3.制备后接收液检测图谱 结论 结果表明 Innoval ODS-2 (7 um， 100A， 21.2x250 mm) 填料三磷酸腺苷类样品峰型及分离效果良好，制备接收液可直接冻干。 附：相关产品 ( Email： s s e e r v ice@ag el a . com . cn 网址： w w w. ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 博纳艾杰尔产品应用案例 产品名称 规格 包装数量 订货号 Innoval ODS-2 7 um， 100 A， 21.2×250 mm 1支 Ix972520-2 Innoval ODS-2 10 um， 100 A， 4.6x250 mm 1支 IX902505-2 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写处 100/PK 1109-0519 32×11.6 mm 1.5mL样品瓶盖 9 mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫45°Shore A； 1.0 mm 100/PK 0915-1819 一次性注射器 2mL无针头 100支/包 LZSQ-2ML 液相进样针 20uL， 平头 1支/盒 JYZ-20UL 针筒过滤器 0.22 um 13 mm 单膜 200个/包 AS011320 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真：