浙贝母中贝母素甲、贝母素乙检测方案(液相色谱仪)

OL通微UNIMICRO南京：025-85533522 西安：029-85373011 广州：15011756765www. unimicrotech.com. cn技术服务专线：021-50801569 HPLC/ELSD Application 浙贝母中贝母素甲、贝母素乙的含量检测 No.20161028 浙贝母为百合科贝母属植物浙贝母的干燥鳞茎，具有清热散结，化痰止咳的作用。其中的生物碱类物质贝母素甲和贝母素乙为其主要药用活性成分，由于贝母生物碱为甾体生物碱，紫外吸收弱，采用紫外检测器检测时存在基线波动大、基体干扰严重等诸多问题，相比之下，采用通用型ELSD检测器则可有效避免上述问题。 本报告中依据中华人民共和国药典2015年版反一 第292页方法对浙贝母中贝母素甲、贝母素乙进行分离检测。 样品制备 对照品溶液制备：取贝母素甲对照品、贝母素乙对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含贝母素甲0.2mg、贝母素乙0.15 mg的合合溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四四筛)约2g，精密称定，置烧瓶中，加浓氨试液4mL浸润1小时，精密加入三氯甲烷-甲醇(4：1)的混合溶液40mL，称定重量，混匀，置80℃水浴中加热回流2小时，放冷，再称定重量，加上述混合溶液补足减失的重量，滤过。精密量取续滤液10 mL， 置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至2mL两瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 仪器 EasySep@-1020液色色谱系统，配备ELSD-UM5800检测器 色谱柱 C18，250×4.6 mm， 5um 流速 1.0 mL/min 流动相 乙腈-水-二乙胺(70：30：0.03) 载气流速 2.5 L/min 漂移管温度 80°C 图1 对照品的检测谱图 图2 样品的检测谱图 Application No. 20161028浙母母中贝母素甲、贝母素乙的含量检测 序号 保留时间 名称 峰面积 峰高 峰分离度 理论塔板数 序号 保留时间 名称 峰面积 峰高 峰分离度 理论塔板数 1 13.408 贝母甲 533171 35184 8.03 18269 2 13.503 贝母甲 807704 54231 8.26 19179 16.886 贝母乙 311788 17917 0.00 21971 17.191 贝母乙 254657 13637 0.00 19775 总计 844959 53101 总计 1062361 67868 EasySep@-1020二元梯度液相系统(配自动进样器和柱温箱) ELSD-UM5000检测器 Unimicro色谱工作站 上海通微分析技术有限公司Unimicro (Shanghai) Technologies Co.， Ltd. ( 声明： ) ( 1 .本 资料 未经 允许不 得擅 自 修 改 、转载、 销 售 ； ) 地址：上海市浦东新区张江高科技科技松涛路489号C01座 ( 2 .本资料的所 有 信息仅供参考 ，不 予 任 何保证 ； 如有任何变 化 ， 恕不另 行 通 知 。 ) 电话：021-38953588，38953390，38953570 传真：021-38953636 邮箱： info@unimicrotech. com. cn 北京：010-82176650 长长：18604418085