黄芪中黄芪甲苷检测方案(液相色谱仪)

OL通微UNIMICRO北京：010-82176650 南京：025-85533522 西安：029-85373011 广州：15011756765www. unimicrotech. com. cn技术服务专线：021-50801569 黄芪中黄芪甲苷的含量检测 HPLC/ELSDApplicationNo. 20160812 黄芪中药材为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，具有益气养血的功效，其中的黄芪甲苷为主要的药用活性成分。黄芪甲苷化学结构中没有强的紫外吸收基团，仅在201nm左右有较弱的紫外末端吸收，采用紫外检测器检测的基线噪音大、分离度重现性差。而采用通用的质量型检测器ELSD则可有效避免紫外检测的缺陷。 本报告中依据中华人民共和国药典2015年版一部第302页方法对黄芪中黄芪甲苷进行分离检测。 样品制备 对照品溶液制备：取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取黄芪粉约4 g， 精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40 mL，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10 mL， 微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次， 每次40 mL， 合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次， 每次40 mL， 弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1.5 cm， 柱高为12cm)，以水50mL洗兑，弃去水液，再用40%乙醇30 mL洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇80 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 测试条件 仪器 EasySep@-1020液相色谱系统，配备ELSD-UM5000测器 色谱柱 C18，250×4.6 mm， 5um 流速 1.0 mL/min 流动相 乙腈-水(35：65) 载气流速 2.5 L/min 漂移管温度 75℃ 图1 对照品的检测谱图 Application No. 20160812黄芪中黄芪甲苷的含量检测 序号 保留时间 名称 峰面积 峰高 峰分离度 理论塔板数 序号 保留时间 名称 峰面积 峰高 峰分离度 理论塔板数 1 10.022 黄芪甲苷 1520518 73771 0.00 5517 10.108 黄芪甲苷 2326343 113352 2.11 5660 2 11.319 200143 8844 0.00 5838 总计 1520518 73771 总计 2526486 122196 EasySep@-1020二元梯度液相系统(配自动进样器和柱温箱) ELSD-UM5000检测器 Unimicro色谱工作站 上海通微分析技术有限公司Unimicro (Shanghai) Technologies Co.， Ltd. ( 声明： ) ( 1 .本 资料 未经 允许不 得擅 自 修 改 、转载、 销 售 ； ) 地址：上海每浦东新区张江高科技科区松涛路489号C01座 ( 2 .本资料的所 有 信息仅供参考 ，不 予 任 何保证 ； 如有任何变 化 ， 恕不另 行 通 知 。 ) 电话：021-38953588，38953390，38953570 传真：021-38953636 邮箱： info@unimicrotech. com. cn ( 长春：18 6 04418085 ) 本实验按照《中国药典》2015版的要求，采用HPLC-ELSD建立了黄芪中黄芪甲苷含量检测方法，方法准确、灵敏、简便快速，可有效实现黄芪中黄芪甲苷的质量监控。